タンパク質分離用カラム

逆相クロマトグラフィー用カラム1 Protein-R
逆相クロマトグラフィー用カラム2 C18-AR-300・C8-AR-300・C4-AR-300・Ph-AR-300
ゲルろ過用クロマトグラフィー用カラム（水系） Diol-120-II・Diol-300-II
イオン交換クロマトグラフィー用カラム1 IEX シリーズ
イオン交換クロマトグラフィー用カラム2 DEAE・QA・CM・SP
疎水クロマトグラフ用カラム HIC

逆相クロマトグラフィー用カラム1
COSMOSIL® Protein-R

コスモシールProtein-R は、ペプチド・タンパク質の分離精製に使用される逆相クロマトグラフィーカラム（ワイドポアカラム）の性能に要求される、シャープな分離・高い回収率、そして酸性移動相使用時の耐久性の全てを満たす為に新たに設計された固定相を用いた逆相クロマトグラフィーカラムです。
現在、多用されているC18-300 （ワイドポア）・C4-300 （ワイドポア）それぞれの問題点を解消したトータルバランスのいいカラムです。
分析から分取用まで各種サイズを用意しておりますのでご用途に応じてお選びください。

物性

固定相と物性一覧表
充填剤名称 Protein-R
シリカゲル 全多孔性球状シリカゲル
平均粒子径 5 µm
平均細孔径 約300
比表面積 約150ｍ2/g
化学結合基 オクタデシル基
結合形式ポリメリック
相互作用 疎水性相互作用
エンドキャッピング処理 あり
特長
  • 高い回収率
  • 耐酸性タイプ

分離能の比較

Protein-R は従来型のC18 ワイドポアカラムよりもタンパク質をシャープに分離します。

Protein-R 5C18-300
Protein-R 5C18-300
分析条件
カラムサイズ 4.6mmI.D.×150mm サンプル
  1. Ribonuclease A 1.0g
  2. Cytochrome C 1.0g
  3. Lysozyme 1.0g
  4. BSA 1.0g
  5. Myoglobin 1.0g
  6. Ovalbumin 1.0g
移動相 A: 0.05%TFA / 20%アセトニトリル
B: 0.05%TFA / 60%アセトニトリル
B 0→35%/60min 直線グラジエント
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV220nm

回収率

下図は各カラムのタンパク質の回収率を示しています。Protein-R は、C4-300 以上の回収率・C18-300 よりも非常に高い回収率を示しました。

耐久性

下図は各カラムの酸性移動相に対する耐久性を示しています。Protein-R はC4-300 よりも非常に高い耐酸性を示しました。

0.1% トリフルオロ酢酸水溶液を封入、60℃での分解試験
保持比(k') はメタノール: 水＝ 50:50 移動相でのナフタレンの値

ペプチドの分離

分子量の小さなペプチドには細孔径120 の5C18-AR-IIが高い分離能を示しますが、高分子のペプチドにはProtein-R が良い分離を示します。

ペプチドの分離
分析条件
カラムサイズ 4.6mmI.D.×150mm 温度 30℃
移動相 A: 0.05%TFA/ 水
B: 0.05%TFA/ アセトニトリル
B 0→35%/60min 直線グラジエント		 検出 UV 220nm
流速 1.0ml/min サンプル Poly-L-Glutamic Acid Sodium Salt
（分子量:1500-5000, 濃度:2.0mg/ml）

価格表

分析・分取カラム（粒子径5µｍ）
COSMOSIL Protein-R

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL Protein-R Guard Column  4.6mml.D.×10mm 06518-31 25,000
10mml.D.×20mm 06528-01 55,000
 20mml.D.×20mm 08692-81  120,000
COSMOSIL Protein-R Packed Column 2.0mml.D.×150mm 06514-71 55,000
4.6mml.D.×50mm 06525-31 38,000
4.6mml.D.×150mm 06526-21 55,000
4.6mml.D.×250mm 06527-11 65,000
10mml.D.×150mm 06529-91 120,000
10mml.D.×250mm 06530-51 160,000
20mml.D.×150mm 06531-41 275,000
20mml.D.×250mm 06532-31 395,000

※上記以外のカラムサイズをご要望の際はお問合せ下さい。

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逆相クロマトグラフィー用カラム2
COSMOSIL® C18-AR-300・C8-AR-300・C4-AR-300・Ph-AR-300

逆相クロマトグラフィーによるタンパク質・ペプチドの分離は分離能、理論段数、再現性、使いやすさ、コストパフォーマンスなどに優れており、重要な分離分析手法となっています。コスモシールシリーズでは4 種類の固定相構造の異なるワイドポア充填剤をご用意しております。

固定相構造と物性

逆相ワイドポア型充填剤の固定相と物性一覧表

充填剤名称 5C18-AR-300 5C8-AR-300 5C4-AR-300 5Ph-AR-300
シリカゲル 全多孔性球状シリカゲル
平均粒子径 5 µm
平均細孔径 約 300
比表面積 約 150ｍ2/g
固定相構造 オクタデシル基 オクチル基 ブチル基 フェニル基
化学結合基 オクタデシル基 オクチル基 ブチル基 フェニル基
結合形式 ポリメリック
主な相互作用 疎水性相互作用 疎水性相互作用
π-π相互作用
エンドキャッピング処理 あり
炭素含有率 約12％ 約7％ 約6％ 約7％

比較例

コスモシールAR-300 パックドカラムシリーズにはアルキル系固定相3種と芳香族系固定相1種があります。

5C18-AR-300 5C8-AR-300 5C4-AR-300 5Ph-AR-300
5C18-AR-300 5C8-AR-300 5C4-AR-300 5Ph-AR-300
分析条件
カラムサイズ 4.6mmI.D.×150mm 温度 30℃
移動相 A: 0.05%TFA / 20%アセトニトリル
B: 0.05%TFA / 60%アセトニトリル
B 0→100%/20min 直線グラジエント		 検出 UV 220nm
流速 1.0ml/min サンプル Hemoglobin,Bovine 10g

価格表

分析・分取カラム（粒子径5m）
COSMOSIL 5C18-AR-300

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5Ｃ18-AR-300 Guard Column 4.6mml.D.×10mm 37910-11 23,000
10mml.D.×20mm 37965-11 50,000
COSMOSIL 5C18-AR-300 Packed Column 4.6mml.D.×50mm 37911-01 32,000
4.6mml.D.×150mm 37913-81 50,000
4.6mml.D.×250mm 37914-71 62,000
10mml.D.×150mm 37917-41 105,000
10mml.D.×250mm 37918-31 145,000
20mml.D.×150mm 37919-21 250,000
20mml.D.×250mm 37920-81 335,000
COSMOSIL 5C8-AR-300
製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5C8-AR-300 Guard Column 4.6mml.D.×10mm 37950-91 23,000
10mml.D.×20mm 34464-61 50,000
COSMOSIL 5C8-AR-300 Packed Column 4.6mml.D.×50mm 37951-81 32,000
4.6mml.D.×150mm 37953-61 50,000
4.6mml.D.×250mm 37954-51 62,000
10mml.D.×150mm 34345-21 105,000
10mml.D.×250mm 34247-11  145,000
20mml.D.×150mm 05861-51 250,000
20mml.D.×250mm 34364-71 335,000
COSMOSIL 5C4-AR-300
製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5C4-AR-300 Guard Column 4.6mml.D.×10mm 37955-41 23,000
10mml.D.×20mm 05862-41 42,000
COSMOSIL 5C4-AR-300 Packed Column 4.6mml.D.×50mm 37956-31 50,000
4.6mml.D.×150mm 37958-11 50,000
4.6mml.D.×250mm 37959-01 62,000
10mml.D.×150mm 34249-91 105,000
10mml.D.×250mm 38047-11 145,000
20mml.D.×150mm 34477-01 250,000
20mml.D.×250mm 38048-01 335,000
COSMOSIL 5Ph-AR-300
製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5Ph-AR-300 Guard Column 4.6mml.D.×10mm 37960-61 23,000
10mml.D.×20mm 34268-41 50,000
COSMOSIL 5Ph-AR-300 Packed Column 4.6mml.D.×50mm 37961-51 32,000
4.6mml.D.×150mm 37963-31 50,000
4.6mml.D.×250mm 37964-21 62,000
10mml.D.×150mm 05865-11 105,000
10mml.D.×250mm 34267-51 145,000
20mml.D.×150mm 05866-01 250,000
20mml.D.×250mm 34468-21 335,000

※上記以外のカラムサイズをご要望の際はお問合せ下さい。

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ゲルろ過用クロマトグラフィー用カラム（水系）
COSMOSIL® Diol-120-II・Diol-300-II

ゲルろ過クロマトグラフィーは酵素をはじめとするタンパク質や水溶性高分子を分子の大きさにより、分離する液体クロマトグラフィーです。
分離に用いる移動相は緩和な緩衝液と塩のみですので酵素など活性を維持したまま分離することができます。
コスモシールDiol-IIパックドカラムは、高速ゲルろ過クロマトグラフィー用カラムとして種々の水溶性高分子の分離に最適です。

物性

ゲルろ過用充填剤の固定相と物性一覧表

充填剤名称 5Diol-120-II 5Diol-300-II
シリカゲル 全多孔性球状シリカゲル
平均粒子径 5 µm
平均細孔径 約120 約300
化学結合基 ジオール基
対象サンプル タンパク質・水溶性高分子
適正流量 0.5-1.0（ml/min）
タンパク質測定可能分子量範囲 5,000-100,000 10,000-700,000
水溶性高分子測定可能分子量範囲 300-30,000 500-300,000

検量線

タンパク質の検量線
分析条件
カラム COSMOSIL 5Diol-II 7.5mmI.D.×600mm
移動相 20mmol/l Phosphate Buffer(pH 7.0)＋100mmol/l Na2SO4
流速 1.0ml/min
温度 30℃
サンプル
サンプル名 分子量 サンプル名 分子量
Thyroglobulin 660,000 Albumin(Ovalbumin) 45,000
Catalase 250,000 Peroxidase 40,000
Glucose Oxidase 160,000 Carbonic Anhydrase 30,000
Uricase 128,000 α-Chymotrypsinogen A 25,700
Choline Oxidase 95,000 α-Chymotrypsin 25,200
Transferrin 85,000 Trypsinogen 24,000
Conalbumin 77,500 Trypsin(bovine) 23,300
Malate Dehydrogenase 70,000 Myoglobin 17,000
α-Glucosidase 68,500 Lysozyme 14,300
Albumin(BSA) 66,000 Ribonuclease A 13,700
α-Amylase 52,500 Cytochrome C 12,400
Fetuin 48,000 Aprotinin 6,500
Gly-Gly 132

分析例

標準タンパク質の分析
サンプルの分子量に合わせてDiol-120-IIとDiol-300-IIを使い分けて下さい。 また、両者を連結することにより、広範囲の分子量のサンプルに適用できます。

5Diol-300-II
7.5mmI.D. × 600mm		 5Diol-120-II
7.5mmI.D. × 600mm
5Diol-300-II 7.5mmI.D. × 600mm 5Diol-120-II 7.5mmI.D. × 600mm
分析条件
カラム COSMOSIL 5Diol-II 7.5mmI.D.×600mm サンプル
  1. Thyroglobulin
  2. Glucose Oxidase
  3. Conalbumin
  4. Peroxidase
  5. Myoglobin
  6. Aprotinin
移動相 20mmol/l Phosphate Buffer(pH 7.0)＋100mmol/l Na2SO4
流速 1.0ml/min
温度 室温
検出 UV220nm
水溶性ポリスチレン
水溶性ポリスチレン
分析条件
カラム COSMOSIL 5Diol-300-II 7.5mmI.D.×300mm サンプル Sodium Polystyrene Sulfonate
  1. MW 780,000
  2. MW 100,000
  3. MW 35,000
  4. MW 8,000
移動相 20mmol/l Phosphate Buffer(pH 6.7)
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 254nm
ポリエチレングリコール
ポリエチレングリコールポリエチレングリコール
分析条件
カラム COSMOSIL 5Diol-120-II 7.5mmI.D.×300mm サンプル Polyethylene Glycol
  1. PEG 20,000
  2. PEG 6,000
  3. PEG 4,000
  4. PEG 1,000
  5. PEG 300
移動相 メタノール：水＝20：80
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 RI
プルラン
プルランプルラン
分析条件
カラム COSMOSIL 5Diol-300-II 7.5mmI.D.×300mm サンプル Pullulan
  1. P-800
  2. P-100
  3. P-50
  4. P-20
  5. P-5
移動相 水
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 254nm

価格表

分析カラム（粒子径5m）
COSMOSIL 5Diol-120-II

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5Diol-120-II Guard Column 7.5mml.D.×50mm 38049-91 40,000
COSMOSIL 5Diol-120-II Packed Column 7.5mml.D.×300mm 38050-51 100,000
7.5mml.D.×600mm 38051-41 150,000

COSMOSIL 5Diol-300-II

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5Diol-300-II Guard Column 7.5mml.D.×50mm 38052-31 40,000
COSMOSIL 5Diol-300-II Packed Column 7.5mml.D.×300mm 38053-21 100,000
7.5mml.D.×600mm 38054-11 150,000

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イオン交換クロマトグラフィー用カラム 1
COSMOGEL® IEXシリーズ

特長

  • 3 種類の充てん剤タイプ（陰イオン交換型、陽イオン交換型、両イオン交換型）
  • 3 種類のカラムタイプ（精密分析用、高速分析用、精製用）
  • タンパク質や核酸などのバイオポリマーの分離に

 

ラインナップ

コスモゲル IEX シリーズでは、汎用されている陰イオン交換型、陽イオン交換型に加え、
2 種類の充てん剤を混合した両イオン交換型をご用意しています。

イオン交換
モード		 陰イオン交換型 陽イオン交換型
充填剤名称 Type Q Type Q-N Type S Type S-N
ゲル / 平均粒子径 親水性ポリマー / 5µm
平均細孔径 1000Å ノンポーラス 1000Å ノンポーラス
官能基 -ＣH3N+(CH3)3 -(ＣH2)3SO3-
タンパク質 結合量 110-150mg 12-20mg 70-100mg 10-18mg
BSA/ml-resin human IgG/ml-resin
対象サンプル 酸性タンパク質・DNA 塩基性タンパク質
用途 精製用 高速
分析用		 精密
分析用		 精製用 高速
分析用		 精密
分析用
カラムサイズ
内径-長さ(mm)		 4.6-50 4.6-30 4.6-100 4.6-50 4.6-30 4.6-100
イオン交換
モード		 両イオン交換型
充填剤名称 Type M Type M- N
ゲル / 平均粒子径 親水性ポリマー / 5µm
平均細孔径 1000Å ノンポーラス
官能基 -ＣH3N+(CH3)3+ -(ＣH2)3SO3-
タンパク質結合量 55-75mg(BSA)/ml
35-50mg(IgG)/ml		 6-10mg(BSA)/ml
5-9mg(IgG)/ml
対象サンプル 全タンパク質
用途 精製用 精密分析用
カラムサイズ
内径-長さ(mm)		 4.6-50 4.6-100

 

両イオン交換型カラム（Type M）によるタンパク質の包括的分離


両イオン交換型は、サンプル中の酸性タンパク質、塩基性タンパク質を同時に分離することができます。
画像をクリックすると拡大します。

両イオン交換型カラム（Type M）による個別モードでの利用


両イオン交換型は、陰イオン交換型として、あるいは、陽イオン交換型として使用することも可能です。
画像をクリックすると拡大します。

カラムタイプ

コスモゲル IEX シリーズでは、3 種類の用途の異なるカラムをご用意しています。
精製用:
Type Q, Type S, Type M ( 充てん剤：ポーラス(1000Å ), カラムサイズ:4.6mmI.D.-50mm）
ポーラスタイプの充てん剤は、ノンポーラスタイプよりもタンパク質の結合量が高いため、タンパク質を大量に注入してもピーク形状が広がりにくい特性を持っています。そのためサンプルの精製に適して います。
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精密分析用:
Type Q-N, Type S-N, Type M-N ( 充てん剤：ノンポーラス, カラムサイズ:4.6mmI.D.-100mm)
ノンポーラスの充てん剤は、充てん剤内でのサンプルの拡散が抑制される特性を持っています。さらに、 長いカラム長を採用したことからシャープなピーク形状が得られます。抗体医薬の品質管理などの精密分析に適しています。
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高速分析用:
Type Q-N, Type S-N, Type M-N ( 充てん剤：ノンポーラス, カラムサイズ:4.6mmI.D.-30mm)
ノンポーラスの充てん剤は、高流速での移動相送液による分離能低下が少ない特性を持っています。
また、短いカラム長を採用したことから高速分析が可能になります。
画像をクリックすると拡大します。

その他アプリケーションデータ例
その他8種類のアプリケーション例を掲載しておりますので、ぜひご覧下さい。

価格表

イオン交換
モード		 製品名 用途 カラムサイズ
内径×長さ(mm)		 製品番号 価格

陰イオン
交換型

 COSMOGEL IEX Type Q 精製用 4.6×50 06266-31 150,000
COSMOGEL IEX Type Q-N 高速分析用 4.6×30 06264-51 135,000
COSMOGEL IEX Type Q-N 精密分析用 4.6×100 06258-41 150,000
陽イオン
交換型		 COSMOGEL IEX Type S 精製用 4.6×50 06252-01 150,000
COSMOGEL IEX Type S-N 高速分析用 4.6×30 06251-11 135,000
COSMOGEL IEX Type S-N 精密分析用 4.6×100 06250-21 150,000
両イオン
交換型		 COSMOGEL IEX Type M 精製用 4.6×50 06248-71 180,000
COSMOGEL IEX Type M-N 精密分析用 4.6×100 06244-11 180,000
カラム材質：PEEK　　接続：Waters Type

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イオン交換クロマトグラフィー用カラム 2
COSMOGEL® DEAE・QA・CM・SP

コスモゲルイオン交換カラムは酵素をはじめとするタンパク質など、イオン性の生体関連物質の分析、分離精製に最適なイオン交換クロマトグラフィー用カラムです。コスモゲルイオン交換充填剤は全多孔性球状の親水性ポリマーに、イオン交換基を導入した高性能の充填剤です。親水性ポリマーをベースとしているため、非特異的吸着がほとんどなく、穏和な条件下でもタンパク質などの回収率が高く、また、化学的安定性にも優れているため、広いpH 範囲で使用でき、アルカリ溶液の洗浄が可能です。
コスモゲルイオン交換カラムには、強弱陰イオン（アニオン）交換カラムと強弱陽イオン（カチオン）交換カラムの4 種類が揃っており、サンプルにあわせて選択できます。

固定相構造と物性

イオン交換クロマトグラフィー用充填剤物性一覧表

  DEAE QA CM SP
種類 Diethylaminoethyl型
弱陰イオン交換		 Quarternaryammonium型
強陰イオン交換		 Carboxymethyl型
弱陽イオン交換		 Sulfopropyl型
強陽イオン交換
ゲル 全多孔性球状親水性メタクリレート系ポリマー
平均粒子径 10µm
平均細孔径 約1000
官能基 N+H(C2H5)2 N+(CH3)3 COO- SO3-
対イオン Cl- Cl- Na+ Na+
交換容量（meq/g） 0.6 0.4 0.3 0.4
50%解離ｐH 10.8 11.0 5.7 2.6
適用可能ｐH ＜11 全領域 ＞4 全領域
適正流量 7.5mmI.D.、8.0mmI.D…0.5〜1.0ml/min　　20mmI.D.…4.0〜6.0ml/min　
最大流量 7.5mmI.D.、8.0mmI.D…1.5ml/min　　20mmI.D.…8.0ml/min
最大適用可能圧力 1.5MPa
使用温度 10〜50℃

移動相の選択

通常イオン交換カラムで分離する場合の移動相pHは、サンプルの等電点(pI)より1pH単位以上離れたものを使用します。 陰イオン交換カラムの場合は、サンプルの等電点の値よりも1以上高いpHの移動相を、陽イオン交換カラムの場合は1以上低いpHの移動相を使用します。
ビストリス・塩酸塩のように2価のイオンは、トリス・塩酸塩のような１価のイオンと比べ同濃度の場合、イオン強度が大きくなるため溶出力が強くなります。

表 緩衝液の種類とpH
陰イオン交換カラム DEAE，QA ｐH 陽イオン交換カラム CM，SP
　 4.0 ぎ酸緩衝液
ピペラジン緩衝液 5.0 酢酸緩衝液
ビス−トリス緩衝液 6.5 りん酸緩衝液
トリス緩衝液 8.0 HEPES緩衝液
モノエタノールアミン緩衝液 9.5 　

初期移動相(A)は20〜50mmol/lの上記緩衝液とし、最終移動相(B)は移動相Aに20〜600mmol/lの塩（NaCl等）を加えたものとします。

塩の選択

一般に溶離のために添加する塩は、移動相緩衝液のイオン、および固定相の対イオンと同じイオンを持つものを使用します。どのカラムでもNaClが適当ですが、溶出力が弱い場合、DEAE、QAカラムでCaCl2、MgCl2が、CM、SPカラムでNa2SO4を用いることができます。これらの塩はNaClと同濃度でイオン強度は大きくなるため、溶出力が大きくなります。

有機溶媒の選択

緩衝液、塩のみで溶出力が弱い場合、水溶性有機溶媒を加えることにより、良好な結果を得られることがあります。コスモゲルイオン交換カラムでは20%までのアセトニトリル、2 -プロパノール等の水溶性有機溶媒を用いることができます。

分析例

●陰イオン交換カラムによるタンパク質の分離
正の電荷を持つ陰イオン交換カラムでは、負の電荷が大きいサンプルほど保持が大きくなり、下図のように弱アルカリ性移動相条件下においては等電点の低いものほど遅く溶出します。

陰イオン交換カラムによるタンパク質の分離
分析条件
カラム COSMOGEL DEAE 7.5mmI.D.×75mm
移動相 A:20mmol/l Tris-HCl Buffer(pH 8.2)
B:500mmol/l NaCl in Buffer A
B 0 → 100% (30min 直線グラジエント)
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 280nm 0.16AUFS　
サンプル
  1. Myoglobin 20g
  2. Transferrin 50g
  3. Trypsin Inhibitor 70g

●陽イオン交換カラムによるタンパク質の分離
負の電荷を持つ陽イオン交換カラムでは、正の電荷が大きいサンプルほど保持が大きくなり、下図のように弱酸性移動相条件下においては 等電点の高いものほど遅く溶出します。

陽イオン交換カラムによるタンパク質の分離
分析条件
カラム COSMOGEL CM 7.5mmI.D.×75mm
移動相 A:20mmol/l Phosphate Buffer (pH 6.5)
B:500mmol/l NaCl in Buffer A
B 0 → 100% (30min 直線グラジエント)
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 280nm 0.32AUFS　
サンプル
  1. Myoglobin 50g
  2. Ribonuclease A 50g
  3. Cytochrome C 50g
  4. Lysozyme 50g

サンプル負荷量

●サンプル負荷量と分離能
図に、サンプルの絶対量を増加させた場合の分離度Rsを示しました。内径8.0mmカラムでも1mgまではほとんど分離能の低下はなく分離できます。
また分離度が大きければ10mgでも分離可能です。

  総注入量0.2mg 総注入量12.5mg
サンプル負荷量と分離能 サンプル負荷量と分離能 サンプル負荷量と分離能
分析条件
カラム COSMOGEL DEAE GLASS Packed Column， 8.0mmI.D.×75mm 温度 30℃
検出 UV 280nm
移動相 A: 20mmol/l Phosphate Buffer (pH 8.2)
B:500mmol/l NaCl in Buffer A
B 0 → 100% (30min 直線グラジエント)		 サンプル
  1. Myoglobin
  2. Transfferin
  3. Trypsin Inhibitor,Soybean
流速 1.0ml/min

価格表

分析カラム（粒子径10µm）
COSMOGEL Glass Packed Column

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOGEL DEAE Glass Packed Column 8.0mml.D.×75mm 37845-81 98,000
COSMOGEL QA Glass Packed Column 8.0mml.D.×75mm 37846-71 98,000
COSMOGEL CM Glass Packed Column 8.0mml.D.×75mm 37844-91 98,000
COSMOGEL SP Glass Packed Column 8.0mml.D.×75mm 37847-61 98,000

接続タイプ:1/4-28UNFフランジ型

COSMOGEL Stainless Packed Column

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOGEL DEAE Stainless Packed Column 7.5mml.D.×75mm 43371-91 85,000
COSMOGEL QA Stainless Packed Column 7.5mml.D.×75mm 43373-71 85,000
COSMOGEL CM Stainless Packed Column 7.5mml.D.×75mm 43375-51 85,000
COSMOGEL SP Stainless Packed Column 7.5mml.D.×75mm 43377-31 85,000

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疎水クロマトグラフィー用カラム
COSMOSIL® HIC

コスモシール5HICは酵素をはじめとするタンパク質の分離に適した疎水クロマトグラフィー用カラムです。
タンパク質の疎水クロマトグラフィーは、広く知られておりますように、原則として有機溶媒を使用せず、緩衝液の濃度変化によって 分離を行う手法であり、タンパク質を非常に穏やかな条件で分離できることから、酵素活性や3次構造を損なうことが少ない手法とされています。

物性

HIC充填剤物性一覧表

充填剤名称 HIC
シリカゲル 全多孔性球状シリカゲル
平均粒子径 5 µm
平均細孔径 約300
比表面積 約150ｍ2/g
主な相互作用 疎水性相互作用

分析例

●標準タンパク質の分離
疎水性クロマトグラフィーにおいては1.0〜2.0mol/lの硫酸アンモニウムを含む緩衝液を初期溶離液として、タンパク質を充填剤に吸着させた後、 徐々に塩濃度を下げて疎水性の低いタンパク質から順に充填剤から脱離させてカラムから溶出させます。下記の分離例では、ミオグロビンは、塩濃度が高い条件下においても早く溶出し、後に溶出するBSAよりも相対的に固定相との相互作用が 小さいタンパク質であることが示唆されます。

標準タンパク質の分離
分析条件
カラム COSMOSIL 5HIC 4.6mmI.D.×50mm
移動相 A:20mmol/l Phosphate Buffer+100mmol/l Na2SO4+1.5mol/l (NH4)2SO4(pH6.0)
B:20mmol/l Phosphate Buffer+100mmol/l　Na2SO4(pH6.7)
B 0 → 100% (10min 直線グラジエント)
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 220nm
サンプル
  1. Myoglobin 0.5 mg/ml
  2. β-Lactoglobulin 1.0 mg/ml
  3. Hemoglobin 2.5 mg/ml
  4. BSA 1.0 mg/ml
注入量 混合サンプル　2.0ｌ

●粗β-Glucosidaseの分離
5HICカラムで粗製のタンパク質を分離する時は硫酸アンモニウム濃度を2.0〜0mol/lの間で使用しますが、さらに相互分離を改善させるためには、グラジエント時間をより長くすることで相互分離を高めることが可能となると考えられます。

粗β-Glucosidaseの分離
分析条件
カラム COSMOSIL 5HIC 4.6mmI.D.×50mm
移動相 A:20mmol/l Phosphate Buffer+100mmol/l Na2SO4+2.0mol/l (NH4)2SO4(pH6.0)
B:20mmol/l Phosphate Buffer+100mmol/l　Na2SO4(pH6.7)
B 0 → 100% (10min 直線グラジエント)
流速 1.0ml/min
温度 30℃
検出 UV 220nm
サンプル 粗β-Glucosidase 10.0 mg/ml
注入量 注入量 1.5ｌ

価格表

分析カラム（粒子径5m）

製品名 サイズ 製品番号 価格
COSMOSIL 5HIC Packed Column 4.6mml.D.×50mm 04263-21 45,000

※掲載の内容は、'12年1月現在の情報に基づいております。
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