ウェスタンブロッティング用化学発光検出試薬Chemi-Lumi One シリーズ
弊社では、ウェスタンブロッティング用化学発光検出試薬を 3 種類ラインアップしています。ご利用目的に応じて使い分けください。
性能比較
Chemi-Lumi One シリーズ比較一覧表
製品名 | Chemi-Lumi One L | Chemi-Lumi One Super | Chemi-Lumi One Ultra |
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製品番号 | #07880 | #02230 | #11644 |
推奨用途 | 一般的な化学発光検出 使いやすい感度設計で、実験条件の検討開始時に適した製品 |
高感度化学発光検出 Chemi-Lumi One L よりも高感度で検出したい場合に適した製品 |
超高感度化学発光検出 ターゲットタンパク質や抗体が貴重な場合に適した製品 |
感 度 | ピコグラム低域 | フェムトグラム中域 | フェムトグラム低域 |
検出限界は実験条件により異なります。本結果は PVDF メンブレンに HRP 標識抗体を直接スロットブロッティングし検出した以下の結果に基づきます。 | |||
<実験条件> PVDF メンブレンに goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)を希釈し、スロットブロッティングしました
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一次抗体希釈率 目安* |
1:1,000 ~ 1:5,000 | 1:1,000 ~ 1:20,000 | 1:5,000 ~ 1:100,000 |
二次抗体希釈率 目安* |
1:20,000 ~ 1:100,000 | 1:20,000 ~ 1:200,000 | 1:100,000 ~ 1:500,000 |
価 格 | ・24,100 円(4,000 cm2用) ・8,000 円(800 cm2用) |
・29,700 円(1,000 cm2用) ・8,000 円(200 cm2用) |
・49,000 円(1,000 cm2用) ・12,000 円(200 cm2用) |
単位面積当たりの費用 | ・約 6 円/cm2(4,000 cm2用) ・10 円/cm2(800 cm2用) |
・約 30 円/cm2(1,000 cm2用) ・40 円/cm2(200 cm2用) |
・49 円/cm2(1,000 cm2用) ・60 円/cm2(200 cm2用) |
*1 mg/mL の抗体を使用した場合
Chemi-Lumi One L
Chemi-Lumi One L は、抗体の希釈率やバックグラウンドシグナルの低減など、実験条件の至適化が容易な感度設計となっています。従って、初めて検出を行うサンプルや目的タンパク質量が不明な場合など、実験条件の検討開始時に適した製品です。
特長
- 使いやすい感度設計で実験条件の検討開始時に推奨
- リーズナブルな価格
- 幅広いタンパク質濃度範囲で検出可能
性能確認 1
検出可能なタンパク質濃度範囲
検出可能なタンパク質濃度範囲が広いため、目的タンパク質の量が不明な場合の検出や、実験条件の検討開始時に向いています。
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- | |
洗浄液 | 0.1% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | Blocking One |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:1,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:20,000 |
発光 |
Chemi-Lumi One L(1 分) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 30 分(反応終了から 3 分後に測定) |
性能確認 2
他社製品との感度比較
Chemi-Lumi One L は他社通常感度試薬とほぼ同等もしくは同等以上の感度を示します。
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- | |
洗浄液 | 0.1% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | Blocking One |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:1,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:20,000 |
発光 | 各発光試薬(1 分)(取扱説明書記載時間で反応) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 5 分(反応終了から 3 分後に測定) |
価格表
Chemi-Lumi One Super
Chemi-Lumi One Super は、Chemi-Lumi One L で検出できない、微量のタンパク質の検出ができます。 また、最高発光強度まで速やかに到達するので、迅速に検出ができます。
特長
- 高感度検出試薬であり、微量タンパク質の検出が可能
- 迅速に検出可能
- 露光時間の延長が可能で、より微量のタンパク質の検出が可能
性能確認 1
他社製品との感度比較
Chemi-Lumi One Super は他社高感度試薬と比較し、高感度であることが分かります。また Chemi-Lumi One Super は最高発光強度までの到達が速やかであるため、他社製品が Working 溶液との反応が 5 分必要である一方、Chemi-Lumi One Super は 1 分で検出開始が可能となります。
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- | |
洗浄液 | 0.1% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | Blocking One |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:2,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:30,000 |
発光 |
Chemi-Lumi One Super(1 分) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 5 分 (反応終了から 3 分後に測定) |
性能確認 2
低バックグラウンドであるため、露光時間の延長が可能
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- | |
洗浄液 | 0.05% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | 各検出試薬推奨ブロッキング剤を使用 (ブロッキング時間は各ブロッキング剤推奨処置時間で処置) |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:1,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:10,000 |
発光 | Chemi-Lumi One Super(1 分)、A 社製品(5 分) (各試薬の Working 溶液を取扱説明書記載時間で反応) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 1 分および 10 分(反応終了から 3 分後に測定) |
性能確認 3
Chemi-Lumi One Super の発光強度の持続性
発光強度は時間とともに少しずつ低下していきます。そのため、30 分後などに撮影を行う場合は露光時間の延長を行ってください。
サンプル | HL-60 細胞抽出タンパク質 (1:0.5 μg、2:0.25 μg、3:0.125 μg) |
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ブロッキング | Blocking One 30 分処置 |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:1,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:10,000 |
発光 | Chemi-Lumi One Super(1 分) |
検出 | LAS-3000(High モード)露光時間 1 分 |
他社新規高感度製品との性能比較例
低バックグラウンドで高感度検出が可能
Chemi-Lumi One Super は Chemi-Lumi One L および A 社高感度検出試薬よりも感度が高く、A 社新規高感度検出試薬と同等の感度を示しています。また、感度を上げるため露光時間の延長もしくはシグナルエンハンサー HIKARI を使用すると、A 社新規高感度検出試薬と A 社高感度検出用ブロッキング剤の組み合わせでは顕著なバックグラウンドの上昇が見られますが、Chemi-Lumi One Super と Blocking One の組み合わせの場合、より低バックグラウンドで検出できます。
サンプル | HL-60 細胞抽出タンパク質 (1:0.5 μg、2:0.25 μg、3:0.125 μg) |
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ブロッキング | 各検出試薬推奨ブロッキング剤を使用(ブロッキング時間は各ブロッキング剤推奨処置時間で処置) |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:1,000 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:10,000 |
発光 | Chemi-Lumi One L(1 分)、Chemi-Lumi One Super(1 分)、A 社新規高感度検出試薬(5 分)、A 社高感度検出試薬(5 分) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 1 分および 10 分 (反応終了より 2 分後に測定) |
高感度検出試薬のメリット
- 露光時間の短縮
- 抗体の節約
- 貴重なサンプルの節約
Chemi-Lumi One Super(高感度検出試薬) | A 社発光試薬 |
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30 分露光 1STAb 1:3,000 2ndAb 1:10,000 | |
メリット①露光時間の短縮
Chemi-Lumi One Super 使用により、露光時間の短縮が可能になります。例えば、今まで検出に 30 分かかっていた実験を 5 分で行なうことができます。
30 分露光 1STAb 1:3,000 2ndAb 1:10,000
メリット②抗体の節約
Chemi-Lumi One Super 使用により、一次抗体ならば 3 倍 ~ 4 倍希釈、二次抗体ならば 10 倍希釈程度まで希釈することが可能となり、貴重な抗体の節約につながります。
メリット③抗原量の節約
Chemi-Lumi One Super 使用により、約 2 倍 ~ 4 倍サンプル量を節約することができます。
30 分露光 1STAb 1:3,000 2ndAb 1:10,000
価格表
Chemi-Lumi One Ultra
Chemi-Lumi One Ultra は、超高感度ウェスタンブロッティング用化学発光検出試薬です。シリーズ中最高感度である Chemi-Lumi One Ultra は、従来の Chemi-Lumi One L や Chemi-Lumi One Super で検出できない、微量のタンパク質の検出ができます。
特長
- シリーズ最高感度
- 優れた持続性
- バックグラウンドが低く幅広い実験条件に対応
性能確認 1
他社製品との感度持続性比較
Chemi-Lumi One Ultra は他社超高感度試薬とほぼ同等の感度・持続性を示します。
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- 装置は SNAP i.d.®(メルク ライフサイエンス リサーチ&バイオロジー)を使用 SNAP i.d.® はメルク コマンデイトゲゼルシャフト アウフ アクチェンの登録商標です。 |
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洗浄液 | 0.1% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | Blocking One 原液(フィルターによる前処理なし) |
一次抗体 | β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1:300 |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:1,000 |
発光 | 各発光試薬(5 分) (各試薬の Working 溶液を取扱説明書記載時間で反応) |
検出 | LAS-3000(High モード) 露光時間 3 分(反応終了から 3 分後、30 分後に測定) |
性能確認 2
一次抗体濃度の至適化
本製品は超高感度試薬にも関わらず、バックグラウンドが低いため、幅広い一次抗体濃度に対応可能であり、実験条件の至適化が容易です。
電気泳動 | 10% アクリルアミドゲル |
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--以下ウェスタンブロッティング-- | |
洗浄液 | 0.1% tTBS(1 ×)(pH 7.4) |
ブロッキング | Blocking One |
一次抗体 | PCNA 抗体(PC10)(Santa Cruz #sc-56) |
二次抗体 | goat anti-mouse IgG-HRP(Santa Cruz #sc-2005)1:100,000 |
発光 | Chemi-Lumi One Ultra 5 分 |
検出 | LAS-3000(High モード)(反応終了から 3 分後に測定) 露光時間 一次抗体希釈率(1:1,000)3 分、(1:5,000)5 分、(1:10,000)8 分 |
特許情報
This Product is manufactured and patented by Cyanagen s.r.l and protected by US7803573; EP1962095; US7855287;EP1950207 US2012009603(A1); CA2742025; EP2405016 and foreign equivalents and other pending patents
価格表
※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。