製品情報

LifeSensors 社 脱ユビキチン化酵素阻害剤 PR-619

LifeSensors 社は、ユビキチン / ユビキチン様タンパク質分野に特化した製品を販売しています。
本製品は脱ユビキチン化酵素(Ub イソペプチダーゼ)だけでなく、UbL イソペプチダーゼも阻害します。

特長

  • 細胞膜浸透性
  • 非選択的・可逆的阻害剤

使用例

in vivo における DUBs の阻害

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HCT-116 細胞に PR-619(30 µM)を加え、1、2、4、8、16、24 時間後に回収し、25 µg の細胞溶解液でウェスタンブロッティングを行った。検出は抗ユビキチン抗体(上図)と抗 βactin 抗体(下図)を用いた。
添加 1 時間後にポリユビキチン化タンパク質量が増加し、そして可逆的阻害であることから徐々に減少した。

in vitro における DUBs の阻害

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HEK293 細胞の溶解液(PR-619 または DMSO 含有)へ Agarose-TUBE1*1 を加えてユビキチン化タンパク質をプルダウンした。Agarose-TUBE1*1 からユビキチン化タンパク質を溶出し、ウェスタンブロッティングを行った。検出には Biotin-TUBE1*1 と Streptavidin-HRP を用いた。図中の重量はプルダウンに使用したタンパク質量を示している。
Input:遠心分離前のサンプル
Mock:TUBE1 が結合していない Agarose でプルダウンしたサンプル
Unbound:遠心分離後のサンプル
細胞溶解液へ PR-619 を添加することで、溶解後の脱ユビキチン化が防がれていた。

*1 TUBE は Tandem Ubiquitin Binding Entity のことで、ユビキチンに対する特異性と親和性が抗体よりも高い人工タンパク質です。

価格表

製品名貯法メーカー
製品番号
容量オンライン
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PR-619 -20℃ SI9619 5mg e-Nacalai.jpg
25mg
分子量:223 Da 純度:>95%

多くの場合 5-20 µM の範囲で使用されます。

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