製品情報

AAT Bioquest社 蛍光カルシウムインジケーター

AAT Bioquest社は、ライフサイエンス研究に有用な蛍光、発光、発色系の色素を豊富に取り扱うメーカーです。 ここでは2種類の蛍光カルシウムインジケーターを紹介します。

Fluo-8®シリーズ

Fluo-8®シリーズは、従来の緑色蛍光カルシウムインジケーターFluo-4を改変したインジケーター試薬です。

特長

  • Fluo-8®は、Fluo-4 AMの2倍、Fluo-3 AMの4倍の蛍光強度
  • カルシウムイオンの結合により、蛍光強度が200倍程度変化するのでS/N比が高い
  • アセトキシメチル体やカルシウムへの親和性の違いなどさまざまな製品ラインアップ
  • 反応後の洗浄が不要なFluo-8 NWアッセイキットもご用意
  • 室温使用が可能で、HTSに便利

製品概要

Fluo-8®シリーズの詳細

インジケーターカルシウムへの
親和性(Kd)
検出波長
(Ex/Em)
検出機器
Fluo-8® 389 nM 490 nm / 514 nm FLIPR™(Molecular Device)
FDSS(浜松ホトニクス)
BMG Novostar™(BMG Labtech)
Fluo-8H™ 232 nM
Fluo-8L™

1.86μM

使用例

Fluo-8® AMの蛍光強度比較

Fluo8hikaku.jpg

図1:96ウェルプレートに播種したU2OS細胞の培地を除去した後、Fluo-3 AM, Fluo-4 AM, Fluo-8® AM (4μM in HHBS)を添加し37℃(5% CO2インキュベーター)で1時間インキュベーション、洗浄後、蛍光顕微鏡(Olympus IX71)にて観察しました。Fluo-8の蛍光強度の高さが実証されています。

参考データ

Fluo-8 NW Assay Kitを用いたカルバコール応答性の比較

図2:96ウェルプレートに播種したHEK293細胞の培地を除去した後、Screen Quest™ Fluo-8 NW Calcium Assay Kit(Medium Removalタイプ)およびFluo-4 NW Kitに付属のFluo-8、Fluo-4溶液をそれぞれ調製、細胞に添加し37℃(5% CO2インキュベーター)で1時間インキュベーションしました。Fluo-8を用いたAssay Kitは、低濃度で作用し、高い蛍光強度を示すことが実証されています。

*グラフ横軸は投与されたカルバコール濃度、縦軸は蛍光強度を示しています。

文献

Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR. Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements. Cell Calcium, 36, 509. (2004)

関連商品

製品名貯法メーカー
製品番号
容量オンライン
カタログへ
Screen Quest™ Fluo-8 NW Calcium
Assay Kit Medium Removal
-20℃ 36308 1 kit
(10 plates)
e-Nacalai.jpg
Screen Quest™ Fluo-8 NW Calcium
Assay Kit 1% FBS Growth Medium
-20℃ 36315 1 kit
(10 plates)
e-Nacalai.jpg

価格表

製品名貯法メーカー
製品番号
容量オンライン
カタログへ
Fluo-8®, AM Cell-permeable -20℃ 21081 5×50μg e-Nacalai.jpg
21082 10×50μg e-Nacalai.jpg
Fluo-8®, sodium salt -20℃ 21088 10×50μg e-Nacalai.jpg
Fluo-8H™, AM Cell-permeable -20℃ 21091 10×50μg e-Nacalai.jpg
Fluo-8L™, AM Cell-permeable -20℃ 21097 10×50μg e-Nacalai.jpg

Rhod-4™シリーズ

Rhod-4™シリーズは、従来の赤色蛍光カルシウムインジケーターRhod-2を改変したインジケーター試薬です。

特長

  • Rhod-2の4倍の蛍光強度とダイナミックレンジを実現
  • ミトコンドリアへの集積を抑え、主に細胞質のカルシウムイオン濃度測定が可能
  • さまざまな波長で励起が可能
  • 反応後の洗浄が不要なRhod-4 NWアッセイキットもご用意

製品概要

Rhod-4™ AMとRhod-2 AMの比較

インジケーターカルシウムへの
親和性(Kd)
検出波長
(Ex/Em)
色素の主な局在性
Rhod-4™ AM 525 nM 530* nm / 555 nm 細胞質
Rhod-2 AM 570 nM 549 nm / 578 nm ミトコンドリア

*490nm、514nm、546nmにも十分な吸収を持ち励起・蛍光検出が可能です。

使用例

Rhod-4™の蛍光強度比較

Rhod4hikaku.jpg

図3:96ウェルプレートに播種したU2OS細胞の培地を除去した後、Rhod-2 AM, Rhod-4™ AMをそれぞれ最終濃度2μMとなるように添加し37℃(5% CO2インキュベーター)で1時間インキュベーション、洗浄後、蛍光顕微鏡(Olympus IX71)にて観察しました。Rhod-4™ AMの蛍光強度の高さが実証されています。

参考データ

Screen Quest™ Rhod-4 NW Assay Kitを用いたカルバコール応答性の比較

図4:96ウェルプレートに播種したHEK293細胞の培地を除去した後、Screen Quest™ Rhod-4 NW Assay Kit(Medium Removalタイプ)およびRhod-2 AMの溶液をそれぞれ調製、細胞に添加し37℃(5% CO2インキュベーター)で1時間インキュベーションしました。Rhod-4を用いたAssay Kitは、低濃度で作用し、高い蛍光強度とダイナミックレンジを示すことが実証されています。

*グラフ横軸は投与されたカルバコール濃度、縦軸は蛍光強度を示しています。
*励起/蛍光の検出条件:530nm/555nm

関連商品

製品名貯法メーカー
製品番号
容量価格
Screen Quest™ Rhod-4 NW Calcium
Assay Kit Medium Removal
-20℃ 36331 1 kit
(10 plates)
e-Nacalai.jpg
Screen Quest™ Rhod-4 NW Calcium
Assay Kit 1% FBS Growth Medium
-20℃ 36334 1 kit
(10 plates)
e-Nacalai.jpg

価格表

製品名貯法メーカー
製品番号
容量価格
Rhod-4™ AM -20℃ 21121 5×50μg e-Nacalai.jpg
21122 10×50μg e-Nacalai.jpg
Rhod-4™, sodium salt -20℃ 21128 5×50μg e-Nacalai.jpg

※掲載の内容は、'16年7月現在の情報に基づいております。