ナカライテスク

Molecular Targeting Technologies Inc. 社ホスファチジルセリン検出プローブ

 

PSVue® はbis(zinc2+dipicolylamine：Zn-DPA）を含む蛍光プローブです。Zn-DPAは陰イオン性リン脂質に高い親和性を示すことが知られており、細胞膜上のフォスファチジルセリン（PS）へ結合します。アポトーシス¹、ネクローシス²、グラム陰性/陽性細菌^3-5等の検出に使用することができます。

 

特　長

• UV～近赤外（検出波長）までラインアップ
• in vitroとin vivoに使用可能
• HTSスクリーニングへ適用可能
• アネキシンVのようにPSへ結合

 

アネキシンVに勝る点

• 結合が早い^6,7
• カルシウムイオン非依存的に結合（膜のscramblaseによる影響が無い）⁸
• 広い範囲の条件（例：10%血清存在下、4～37℃）でアポトーシスを検出⁸
• 小さい（1つのアネキシンVが結合する範囲に10個以上結合する）⁹

 

PSVue® の構造

 

 

膜結合の模式図

 

生理条件下では、ほとんどのPSVueはZn²⁺イオン１分子が結合している（A）。PSVue®は陰イオンのPSへZn²⁺を介して結合し（B）、もう1分子のZn²⁺を更に結合させて膜へ結合していると考えられる(C)。

 

 

 

 

 

 

 

 

In vitroでの実施例

 

 

 

 

アネキシンVとPSVue®794での多重染色

Jurkat細胞をカンプトテシン10μMで3.5時間処理し、アネキシンV連結色素とPSVue®794両色素で染色した。A：明視野、B：アネキシンV連結色素、C：PSVue®794、D：重ね合わせ
（データ提供：Notre Dame大学 Dr. Bradley Smith）

 

 

 

 

 

 

 

In vivoでの実施例

 

前立腺癌モデルラットでの実施例 

PSVue®794（4.0mg/kg）をインジェクションして24時間後に観察したところ、はっきりと癌組織に蓄積していた。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

EMT-6移植ヌードマウスでの実施例 

PSVue®794をインジェクションして24時間後に観察したところ、はっきりと癌組織に蓄積していた。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

黄色ブドウ球菌感染マウスでの実施例 

左後肢の大腿筋へ接種する前（A）、直後（PSVue®794インジェクション）（B）、6時間後(C)、12時間後(D)、18時間後(E)、21時間後(F)

 

 

 

 

データ提供：Notre Dame大学 Dr. Bradley Smith

 

参考文献

1. Hanshaw RG, Lakshmi C, Lambert TN, Johnson JR and Smith BD. Fluorescent detection of apoptotic cells by using zinc coordination complexes with a selective affinity for membranes surfaces enriched with phosphatidylserine. ChemBioChem, 2005, 6, 2214-2220.
2. Smith BA, Akers WJ, Leevy WM, Lampkins AJ, Xiao S, Wolter W, Suckow MA, Achilefu S and Smith BD. Optical imaging of mammary and prostrate tumors in living animals using a synthetic near infrared zinc(II)-dipicolylamine probe for anionic cell surfaces. J. Am. Chem. Soc. 2010, 132 (1), 67-69.
3. Leevy, WM; Johnson, JR.; Lakshmi, C.; Morris, J.; Marquez, M.; Smith, BD. Selective recognition of bacterial membranes by zinc(II)-coordination complexes. Chem. Commun. 2006, 595-1597.
4. Leevy WM, Gammon, ST, Jiang H, Johnson JR, Maxwell DJ, Marquez M, Piwinica-Worms D and Smith BD. Optical imaging of bacterial infection in living mice using a fluorescent near-infrared molecular probe. J. Am. Chem. Soc., 2006, 128, 16476-16477.
5. Leevy WM, Gammon ST, Johnson JR, Johnson JR, Lampkins AJ, Jiang H, Marquez M, Piwinica-Worms D and Smith BD. Noninvasive optical imaging of Straphylococcus aureus bacterial infection in living mice using a bis-dipicolylamine-zinc (II) affinity group conjugated to a near infrared fluorophore. Bioconj. Chem. 2008, 19, 686-692
6. DiVittorio KM, Johnson JR, Johansson E, Reynolds AJ, Jolliffe KA and Smith BD. Synthetic peptides with selective affinity for apoptotic cells. Org. Biomol. Chem., 2006, 4, 1966-1976.
7. Koulov AV, Stucker KA, Lakshmi C, Robinson JP and Smith BD. Detection of apoptotic cells using a synthetic fluorescent sensor for membrane surfaces that contain phosphatidylserine. Cell Death and Differentiation, 2003, 10, 1357-1359
8. Hanshaw RG and Smith BD. New reagents for phosphatidylserine recognition and detection of apoptosis. Bioorg. & Med. Chem. 2005, 13, 5035-5042
9. Koulov AV, Hanshaw RG, Stucker KA, Lakshmi C and Smith BD. Biophysical studies of a synthetic mimic of the apoptosis-detecting protein annexin V. Israel. J of Chem., 2005, 45, 373-379.

 

価格表　(構造式の画像をクリックすると拡大してご覧いただけます。)

製品名	メーカー製品番号	構造式	Ex/Em (nm)	容量	価格	買い物かご
PSVue® 794	P-1001		794/810	1 kit	48,000
	キット構成：PSVue® 794（1mMに溶解後約0.68mL）、希釈液、硝酸亜鉛バッファー
PSVue®380	P-1002		380/440	1 kit	41,000
	キット構成：PSVue®380（2mMに溶解後約0.4mL）、硝酸亜鉛バッファー PSVue®380の希釈はエタノールを使用します。
PSVue®480	P-1003		480/519	1 kit	41,000
	キット構成：PSVue®480（1mMに溶解後約0.5mL)、硝酸亜鉛バッファー PSVue®480の希釈はDMSOを使用します。
PSVue®Biotin	P-1004		-	1mg	32,000
	キット構成：PSVue®Biotin（約1mg）PSVue®Biotinの希釈はTESバッファーを使用します。
PSVue®550	P-1005		553/615	1 kit	41,000
	キット構成：PSVue®550（1mMに溶解後約0.5mL)、硝酸亜鉛バッファー PSVue®550の希釈はDMSOを使用します。