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簡単！　グラジエントゲル様の分離
WIDE RANGE Gel Preparation Buffer (4X) for PAGE

本製品は、アクリルアミド/ビス混合液などに緩衝液として加えるだけで、均一ゲルと同じ作成方法でグラジエントゲルのように分析範囲が広いゲルを作成することが出来ます。泳動緩衝液や試料緩衝液は従来と同じものが使用できます。また、CBB染色、銀染色などの染色法においても、通常のゲルと同様に染色できます。

 

 

特 長

• 広範囲の分子量レンジで分離可能なゲルが作製可能
• 従来の均一ゲルと同様の簡単な作製方法
• 分離/濃縮ゲルの調製に緩衝液の使い分け不要 
• ゲルの保存性や強度が向上

 

本製品の特長について詳細を以下に記載します。

 

性能評価

■SDS-PAGE
本品添加10%アクリルアミドゲルとLaemmli法12%アクリルアミドゲルおよびプレキャストグラジエントゲルとの比較

 

分析条件
サンプル：タンパク質マーカー（#29458）（1x）
染色：CBB Stain One（#04543）

 

 

本品添加10%ゲルを使用することで、従来のLaemmli法の12%ゲルでは分離できなかった低分子タンパク質（6.5、14kDa）を分離することができました。一方で高分子領域におけるバンド （45～200kDa）の移動度は大きくなりました。すなわち本品を使用するだけで、均一ゲルでもタンパク質の分析範囲が広がりプレキャストグラジエントゲルのような分離が可能となります。

 

 

■ウェスタンブロッティング

 

 

 

使用例

■銀染色（二次元電気泳動）

サンプル
HL-60細胞由来タンパク質

電気泳動
一次元：Immobiline™ pH 4-7
二次元：本品添加ゲル（12％ゲル）

染色
Sil-Best Stain One（#06865）

Immobiline™はGE Healthcare社の商標です。

 

 

 

 

ゲル調製表

本表は、「40(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液(29:1)（#06119）」または「40(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液(37.5:1)（#06121）」を用いてSDS-PAGE用ポリアクリルアミドゲルを作製する場合のものです。

 

■分離ゲルの調製　　単位：ml

アクリルアミド濃度	液　名	10 ml	20 ml	30 ml	40 ml
6%	精製水	5.9	11.8	17.7	23.6
	40(w/v)%アクリルアミド/ビス混合液	1.5	3.0	4.5	6.0
	本品	2.5	5.0	7.5	10.0
	10(w/v)%ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液	0.1	0.2	0.3	0.4
	TEMED	0.008	0.016	0.024	0.032
8%	精製水	5.4	10.8	16.2	21.6
	40(w/v)%アクリルアミド/ビス混合液	2.0	4.0	6.0	8.0
	本品	2.5	5.0	7.5	10.0
	10(w/v)%ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液	0.1	0.2	0.3	0.4
	TEMED	0.006	0.012	0.018	0.024
10%	精製水	4.9	9.8	14.7	19.6
	40(w/v)%アクリルアミド/ビス混合液	2.5	5.0	7.5	10.0
	本品	2.5	5.0	7.5	10.0
	10(w/v)%ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液	0.1	0.2	0.3	0.4
	TEMED	0.006	0.012	0.018	0.024
12%	精製水	4.4	8.8	13.2	17.6
	40(w/v)%アクリルアミド/ビス混合液	3.0	6.0	9.0	12.0
	本品	2.5	5.0	7.5	10.0
	10(w/v)%ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液	0.1	0.2	0.3	0.4
	TEMED	0.006	0.012	0.018	0.024

 

 ■濃縮ゲルの調製　　単位：ml

アクリルアミド濃度	液　名	2 ml	4 ml	6 ml	8 ml
3%	精製水	1.33	2.66	3.99	5.32
	40(w/v)%アクリルアミド/ビス混合液	0.15	0.30	0.45	0.60
	本品	0.50	1.00	1.50	2.0
	10(w/v)%ペルオキソ二硫酸アンモニウム溶液	0.02	0.04	0.06	0.08
	TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008

「30(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液(29:1)（#06141）」または「30(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液(37.5:1)（#06144）」については、30(w/v)%-アクリルアミド/ビス混合液用ゲル調製表の分離ゲル調製用緩衝液(4倍濃縮)（#30651）、濃縮ゲル調製用緩衝液(4倍濃縮)（#09267）を本品に置き代えてご使用ください。

 

分析条件
ゲルサイズ：8cm×10cm×1mm（ミニゲル）
サンプル：タンパク質マーカー（#29458）（1x）
染色：CBB Stain One（#04543） 

 

 

 

ゲル強度

 

 

本品を添加すると、6%ゲルでもLaemmli法の10%ゲルに近い強度があり、泳動後のゲルの取り扱いが容易になります。 

 

 

価格表

※記載の内容は、'15年11月現在の情報に基づいております。