ぜひ、ご参加ください

4th Annual Ubiquitin Drug Discovery & Diagnostics Conference 2012

会期：2012年7月24日（月）～26日（水）

会場：アメリカ合衆国　フィラデルフィア　Four Seasons Hotel Philadelphia

Web Site: http://www.ubiquitinconference.com/

LifeSensors社 Web Site

http://www.lifesensors.com/

ユビキチン研究試薬に特化したメーカーのLifeSensors社より新製品Biotin-K63 TUBE（Tandem Ubiquitin Binding Entity）1が発売されましたのでご紹介します。本製品はK63ポリユビキチン鎖を特異的に高感度に検出する試薬で、Sims氏の発表したペプチド^*1を基に開発されました。Far-ウェスタンや、精製、in situ検出等にご利用ください。

^*1Sims, J.J. et al. Polyubiquitin-sensor proteins reveal localization and linkage-type dependence of cellular ubiquitin signaling. Nat Methods. 5;9(3):303-9 (2012).

特長

• 特異性が高い
• 感度が高い

他社抗体との比較

K48ポリユビキチンとK63ポリユビキチンの検出について、本品（Far-ウェスタン）と他社の抗K63ポリユビキチンモノクローナル抗体（ウェスタン）と比較しました。本品およびC社品がK63ポリユビキチン鎖を強く検出しました。

本品（Far-ウェスタン）とC社品（ウェスタン）について、K11ポリユビキチン鎖も加えて検出をしたところ、本品はK63ポリユビキチン鎖に対する特異性が高いことが示されました。

プロトコール

■Biotin-K63 TUBE1を用いたFar-ウェスタン

1. 細胞抽出液の準備
2. 各レーン30-50μgのタンパク質量でSDS-PAGE
3. 膜へ転写、膜のブロッキング
4. TBS-T（1% BSA）で1000倍希釈したBiotin-K63 TUBE1と室温1時間でインキュベーション
5. TBS-Tで10分洗浄（3回）
6. avidin-HRP等を用いた検出

本プロトコールは推奨プロトコールです。サンプルのK63ポリユビキチン鎖、K63ポリユビキチン化タンパク質の量や、検出試薬等によって条件を検討してください。また、転写膜は熱等の変性処理はしないでください。

価格表

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Ark Pharm社は、創薬研究で役立つヘテロ環中間体、医薬品のビルディングブロックを取扱っており、特にアルコール、アミン、アルデヒド、酸/エステル、ハロヘテロ環を含んだ化合物を数多く取り揃えています。今回は、他社で販売の少ない化合物の中から一部をご紹介します。

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RhoA / Rac1 / Cdc42 Activation Assay Combo Bioc hem Kit (bead pull-down format) - 3 x 10 assays

Product Overview

• The combo kit is an ideal choice when your experimental observations suggest that one or more Rho family proteins are activated.
• Provides 10 assays each for detection of activated RhoA, Rac1, and Cdc42. 
• Includes an extensive array of reagents (see kit contents below).
• Most cost effective way to obtain a Rho family activation profile.

Assay Principle

The principle of the assay is shown schematically below (Figure 1).  The assay is based upon the fact that a Rho family effector protein is known to bind preferentially to the active (GTP-bound) form of its target GTPase (1).  In the case of RhoA activation, the rhotekin-RBD effector domain is used to make the affinity beads (2). In the case of Cdc42 and Rac1 activation, the PAK-PBD effector domain is used for affinity beads (3).  Example Western blot results and detailed protocols can be viewed by clicking the documents tab above and downloading the pdf datasheet.

　　　　　　　Figure 1. Schematic of RhoA/Rac1/Cdc42 Activation (Pull-down) Assay

   

 

 

Kit contents
The kit contains sufficient materials for 10 assays each for RhoA, Rac1, and Cdc42 (depending on activation levels in cells),  including reagents for positive and negative controls. The following components are included:

1. GST-tagged Rhotekin-RBD protein on colored agarose beads (Part # RT02-S)
2. GST-tagged PAK-PBD protein on colored agarose beads (Part # PAK02-S)
   
3. RhoA-specific monoclonal antibody, 50 ug (Cat. # ARH03)
4. Rac1-specific monoclonal antibody, 50 ug (Cat. # ARC03)
5. Cdc42 monoclonal antibody, 50 ug (Cat. # ACD03)
6. His-tagged RhoA protein (Part # RHWT)
7. His-tagged Rac1 protein (Part # RCWT)
8. His-tagged Cdc42 protein (Part # CDWT)
9. GTPγS: (non-hydrolyzable GTP analog) (Cat. # BS01)
10. GDP (Part # GDP01)
    
11. Cell lysis Buffer (Part # CLB01)
    
12. Wash Buffer (Part # WB01-S)
    
13. Loading Buffer (Part # LB01)
    
14. STOP Buffer (Part # STP01)
    
15. DMSO (Part # DMSO)
16. Protease inhibitor cocktail (Cat. # PIC02)
17. Manual with detailed protocols and extensive troubleshooting guide

 

 

Equipment needed

1. SDS-PAGE minigel system and Western blotting transfer apparatus

 

References

1. Aspenstrom, P.  1999.  Effectors for the Rho GTPases.  Curr. Opin. In Cell Biol. 11, 95-102.
2. Ren, X.D. et al.  1999.  Regulation of the small GTP-binding protein Rho by cell adhesion and the cytoskeleton.  EMBO J. 18, 578-585.
3. Benard, V. et al. 1999. Characterization of Rac and Cdc42 activation in chemoattractant-stimulated human neutrophils using a novel assay for active GTPases.  J. Biol. Chem. 274: 13198-13204       

          

Product Description	MSDS	Datasheet	Cat #
RhoA / Rac1 / Cdc42 Activation Assay Combo Biochem Kit (bead pull-down format) - 3 x 10 assays			BK030
Cdc42 Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays			BK034-S
Rac1 Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays			BK035-S
Ras Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays			BK008-S
RhoA Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays			BK036-S

 

Please check out the new versions of Activation Assays and associated products:

G-LISA^® Activation Assays:
Cdc42 G-LISA^® Activation Assay, colorimetric format (Cat.# BK127)
Rac1 G-LISA^® Activation Assay, luminescence format (Cat.# BK126)
Rac1,2,3 G-LISA^® Activation Assay, colorimetric format (Cat.# BK125)
RhoA G-LISA^® Activation Assay, colorimetric format (Cat.# BK124)
RhoA G-LISA^® Activation Assay, luminescence format (Cat.# BK121)

Large Pull-down Activation Assays:
Cdc42 Activation Assay Biochem Kit, bead pull-down format (Cat.# BK034)
Rac1 Activation Assay Biochem Kit, bead pull-down format (Cat.# BK035)
RhoA Activation Assay Biochem Kit, bead pull-down format (Cat.# BK036)

Associated Products:
Anti-Cdc42 monoclonal antibody (Cat.# ACD03)
Anti-Rac1 monoclonal antibody (Cat.# ARC03)
Anti-RhoA monoclonal antibody (Cat.# ARH03)
GST-tagged Rhotekin-RBD protein on colored agarose beads (Cat. # RT02)
GST-tagged PAK-PBD protein on colored agarose beads (Cat. # PAK02)
His-tagged RhoA protein (Cat. # RH01)
His-tagged Rac1 protein (Cat. # RC01)
His-tagged Cdc42 protein (Cat. # CD01)

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PathoGreen™ Histofluorescent Stain, 1000X

Product Description
PathoGreen™ Histofluorescent Stain is an anionic green fluorescent dye . The dye stains degenerating neurons and their processes after exposure to a variety of neurotoxic insults in brain sections and cultured neurons. The mechanism of neuronal staining by anionic fluorescent dyes has not been determined. It has been proposed that the negatively charged dyes bind to positively charged polyamines or other molecules specifically generated in dying neurons.

Reference: Schmued, L.C. and Hopkins, K.J. Fluoro-Jade: Novel Fluorochromes for Detecting Toxicant-Induced Neuronal Degeneration. Toxicol Pathol 28, 91 (2000).

Figure 1. Degenerating neurons in a section of mouse hippocampus stained with PathoGreen™ Histofluorescent Stain.

Product Name	Product No.	Size	Downloads
PathoGreen Histofluorescent Stain, 1000X in water	80027-5mL	5 mL	Product Protocol
	80027-50mL	50 mL

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・     コスモシール3C₁₈-EBによる塩基性化合物の分析例

       AP-1227 （Fexofenadineの分析)、AP-1230 (Gabapentinの分析)を掲載

・     コスモシールBuckyprep-DによるC₆₀インデン誘導体や酸化フラーレンなど誘導体化フラーレンの分析例

       AP-1234、AP-1235 (C₆₀ [Indene]nの分析)、AP-1237、AP-1239 (酸化フラーレンの分析)を掲載

・     ストレスマーカーの分析例

       AP-1209 (HILIC)を掲載

・     薬剤の分析例

       AP-1210 (5C₁₈-MS-II)、AP-1211 (5C₁₈-MS-II) を掲載

・     コスモシール3C₁₈-EBによる塩基性化合物の分析例

       AP-1227 （Fexofenadineの分析)、AP-1230 (Gabapentinの分析)を掲載

・     コスモシールBuckyprep-DによるC₆₀インデン誘導体や酸化フラーレンなど誘導体化フラーレンの分析例

       AP-1234、AP-1235 (C₆₀ [Indene]nの分析)、AP-1237、AP-1239 (酸化フラーレンの分析)を掲載

・     ストレスマーカーの分析例

       AP-1209 (HILIC)を掲載

・     薬剤の分析例

       AP-1210 (5C₁₈-MS-II)、AP-1211 (5C₁₈-MS-II) を掲載

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New products are an essential component of our range. Introductions are made on an ongoing basis, with hundreds of new small molecules, peptides and antibodies being added every year. Our aim is to find the latest, otherwise unobtainable research tools, and bring them to the market as quickly as we can. 

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今後、弊社Webサイト上にて順次掲載して参りますので、ご覧頂けましたら幸いです。

■現在掲載中のニュースレター

• InvivoGen社　「InvivoGen Insight　2012 JAN-FEB」 
• Polyscience社　「Poly Facts　6.2」

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Cat.No.	Product Name	Activity
4432	TTP 22	High affinity, selective CK2 inhibitor
4486	PMSF	Non-specific protease inhibitor; also blocks anandamide metabolism
4370	TC-N 22A	Potent, selective mGlu4 positive allosteric modulator
4416	ADX 10059 hydrochloride	Negative allosteric modulator at mGlu5
4357	Bicifadine hydrochloride	Noradrenalin, 5-HT and dopamine re-uptake inhibitor
3357	Ellipticine	Antitumor and intercalating agent; inhibits DNA topoisomerase II
3354	PF 429242	Competitive inhibitor of SREBP site 1 protease
4481	Ki 20227	c-Fms inhibitor; suppresses osteolysis and osteoclast accumulation
4474	20(S)-Hydroxycholesterol	Allosteric activator of Hedgehog signaling; induces Smo accumulation
4458	VU 29	Potent mGlu5 allosteric potentiator
4371	VU 0364439	Positive allosteric modulator at mGlu4
4343	UNC 0638	Selective G9a and GLP histone lysine methyltransferase (HMTase) inhibitor
3988	Hesperadin hydrochloride	Potent Aurora B kinase inhibitor
4469	VU 0364770	Positive allosteric modulator at mGlu4
4471	DMH4	Potent, selective VEGFR-2 inhibitor
4460	Trifluorothymidine	Thymidylate synthase inhibitor; induces DNA fragmentation
4405	NVP BHG 712	Potent EphB4 kinase inhibito
4307	YC 1	Soluble guanylyl cyclase (sGC) activator; induces G1 cell cycle arrest

                                                                                                                                                                                                                                                                       

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今般の合併及び営業所開設により、お客様へ総合的かつよりよいサービスの提供を推進してまいりますとともに、これを機に社員一同より一層の努力をしてまいりますので、何卒倍旧のご支援ご厚誼を賜りますようお願い申し上げます。

敬具

平成24年3月

開設日：平成24年　4月　2日（月）

住　所：〒981-0915　仙台市青葉区通町2-2-8　モンレーブ通町101

連絡先：

TEL：022-727-8070　FAX：022-727-8071
E-mail: info.sendai@nacalai.co.jp

※住所、TEL、FAXは大信化学から変更ありません。