有機溶媒の種を変更する。
（例：アセトニトリルからメタノールに変えるなど）

細孔径が大きいタンパク質分離用逆相クロマトグラフィー用カラムである コスモシール Protein-R（細孔径 300 Å）をお薦めします。

特定のサンプルのみブロードになる場合
カラムが劣化している可能性があります。

充填剤に化合物が吸着を起こしている可能性があります。

全てのサンプルでブロードになる場合

カラムが劣化している可能性があります。

異なる充填剤のカラムへ変更してください。（例えばサンプルが塩基性化合物の場合、塩基性化合物に対して吸着が起こりにくいコスモシール 3C₁₈-EB または C₁₈-MS-IIをお薦めします。

移動相とサンプル溶媒において、溶出力やサンプルの溶解性が大きく異なる可能性があります。

サンプルを移動相に溶かしてください。溶けない場合は、溶解する溶媒に溶かし移動相で希釈してください。

移動相とサンプル溶媒において、溶出力やサンプルの溶解性が大きく異なる可能性があります。

サンプルを移動相に溶かしてください。溶けない場合は、溶解する溶媒に溶かし移動相で希釈してください。

安定剤を含まない高速液体クロマトグラフ用溶媒で調製してください。

（サンプルが溶出してくる程度まで）移動相の溶出力を高めてください。
例：

①メタノールやアセトニトリルなどの有機溶媒濃度を上げてください（最大 100%まで）。

②それでも溶出しない場合は、さらに溶出力の高い有機溶媒（テトラヒドロフランやクロロホルムなど）を 10 ～ 30%程度メタノールやアセトニトリルに混ぜた移動相に変更してください（例: テトラヒドロフラン/メタノール = 30/70）

塩基性化合物の場合
残存シラノールの影響が考えられます。コスモシール 3C₁₈-EB または C₁₈-MS-Ⅱなど残存シラノールの少ないカラムへ変更してください。あるいは、移動相に酸（トリフルオロ酢酸や酢酸など）を 0.1 ～ 1.0%程度添加してください。

金属配位性化合物の場合
充填剤に含まれる微量の金属不純物との配位が考えられます。移動相に 5 mmol/L 程度エチレンジアミン四酢酸二水素二ナトリウム（EDTA・2Na）を添加してください。

（サンプルが溶出してくる程度まで）移動相の水の割合を増やしてください。
例：コスモシール Sugar-D やコスモシール HILIC の場合水 100%の条件まで可能です。
コスモシール 5NH₂-MS の場合水 50%の条件(例: アセトニトリル/水 = 50/50)まで可能です。

硫酸アンモニウム濃度を 0.5 mol/L 以下まで下げ、沈殿しないようにしてください。

気泡を抜いてください（下記 T7 をご参照ください）。

増締めや配管の交換をしてください。

検出器附属の取扱説明書を参考に正しく接続してください。

検出器からレコーダーに信号が適切
に送られてない。

信号が出ていないなど検出器自体に問題がある場合は、機器メーカーにお問い合わせください。

サンプルに対して適切な UV 吸収領域で分析してください。UV 吸収がない、もしくは UV 吸収が小さい場合は、示差屈折率（RI）検出器や蒸発光散乱（ELSD）検出器などサンプルにあった検出器を使用してください。またはサンプルをラベル化してください。

コスモシール PE-MS・πNAP・PYE・NPE・PBr・Cholester など固定相自体に UV 吸収があるカラムを使用している場合、微量の固定相の剥離によって（UV 吸収があるため）ベースラインが安定しない可能性があります。

「よくあるご質問　Q13.カラムの洗浄方法は？」に示す溶出力の強い溶媒で洗浄を行ってください。

ポンプの圧力が変動している場合は、ポンプに空気が混入している可能性があります。

気泡を抜いてください。（下記 T7 をご参照ください）

恒温槽を用いてカラムの温度を一定にするだけでなく、エアコンの風が直接 RI 検出器や配管にあたらないようにしてください。
【注意事項】
装置や配管をエアコンの風が当たらないように覆うなども有効です。

（移動相中の）残存ガス量が変化していることが原因である可能性があります。

脱気（脱気装置・超音波・アスピレーターなど）を必ず行ってください。

検出器の出口を押さえ、加圧し気泡を抜いてください。
【注意事項】
圧力をかけすぎるとセルが破損する恐れがありますので注意してください。それでも改善しない場合は、カラムを装着していない状態で粘度の高い溶媒（2-プロパノールなど）を 15 分程度流してください。

適切なカラムの温度で分析してください。通常カラムの温度は 20 ～ 50℃で行います。
【注意事項】
正確な分析を行うために、移動相の沸点より 20～50℃低い温度に設定することをお薦めします。

（例: メタノール［沸点(b.p):64.7℃］の場合、45℃以下で分析を行うことをお薦めします）

平衡時間を長くしてください。特に、緩衝液やイオンペア試薬を使用した場合、塩を含まない移動相に比べて長い平衡時間が必要です。

(a)緩衝液の濃度を下げる。
（例：100 mmol/L から20 mmol/L へ）
(b)緩衝液の種類を変更する。
（例：りん酸バッファーから酢酸バッファーへ）
(c)有機溶媒濃度を下げる。
（例：70%アセトニトリル/水 = 70/30 から 50/50 へ）
(d)有機溶媒を変更する。
（例：アセトニトリルからメタノールへ）

気泡を抜いてください（下記 T7 ご参照ください）。特に順相クロマトグラフィーで用いる溶媒は、沸点が低いため気泡が発生しやすく、また粘度が低いため気泡が流れ出にくくなります。

液もれ箇所の増締めを行ってください。それでも改善しない場合は、部品の交換を行ってください。

恒温槽やカラムオーブンを用いて一定温度で分析を行ってください。
【注意事項】
恒温槽やカラムオーブンは室温の影響もうけますので設定温度が室温に近い場合には室温+5℃以上に設定することをお薦めします。

移動相にイオンペア試薬を使用している場合。
カラムの平衡不足が原因である可能性があります。

C₁₈ カラムで移動相を水 100%で分析している場合。
一般的に C₁₈ 基の寝込みが原因ではないかといわれています。

水 100%の 条件でも使用可能なコスモシール C₁₈-PAQ を用いることをお薦めします。
【注意事項】
保持時間の再現性が悪くなってしまったカラムは 50%以上の有機溶媒：水（例: メタノール / 水 = 70 / 30など）で洗浄すると再生する場合があります。

水を含まない移動相を検討してください。
水を含むサンプル溶媒を使用している場合はサンプル溶媒を変更するか、もしくは注入量を減らしてください。水が入ってしまった場合は、エタノールを用いて洗浄することにより再生することが可能です。

カラムの再生は不可となります。

カラムを洗浄することにより再生する可能性があります。

カラムの再生は不可となります。