（例）メタノール / 水 = 70 / 30　1 L

特別に表記がない場合には、体積比（V/V）で移動相を調製します。

① メタノール 700 mL をメスシリンダーに量りとる。
② 蒸留水 300 mL を別のメスシリンダーに量りとる。
③ ①②を十分に混合した後、脱気を行う。

※溶媒の体積は温度によって変化するため、精密性・再現性をよく量るためには、容量を比重換算した重量で計量し調製します。下表にその調製例を示します。

※メタノール､アセトニトリルは医薬用外劇物です。取り扱いは手袋･保護メガネ･マスクを着用し、ドラフト内で行ってください。

【参考】移動相の有機溶媒濃度の違いに対する保持時間の変化

メタノール濃度が 1% 違うだけで保持時間は大きく変わります。移動相は正確に調製してください。

（例 1）20 mmol/L りん酸緩衝液（pH 2.5）の調製

① 20 mmol/L りん酸二水素ナトリウム水溶液を調製する。（1 L のメスフラスコにりん酸二水素ナトリウム（無水）（#31720-65）2.40 g を量りとり、蒸留水で 1 L にメスアップする）
② 20 mmol/L りん酸水溶液を調製する。（1 L のメスフラスコにりん酸（純度 85%）（#08964-92）2.31 g を量りとり、蒸留水で 1 L にメスアップする）
③ pH メーターで測定しながら、pH 2.5 になるように①と②を混合する。
④ ミリカップ-HV（0.45 µm）（#44054-89）を用いて減圧ろ過する。
※塩類は不溶性固体を含有している場合があり、ポンプのシールの劣化や、カラムの詰まりの原因になるので、必ずろ過してください。
⑤有機溶媒と混合する場合には「1. 有機溶媒と水混合の移動相」の例と同様に体積比で混合してください。
※混合時に塩が析出していないか確認してください。時間経過後、析出する場合もあります。

調製済みの緩衝液〔りん酸緩衝液（pH2.5）（5倍濃縮）（#08969-71）〕を販売していますのでご利用ください。

（例 2）20 mmol/L りん酸緩衝液（pH 7.0）の調製

① 20 mmol/L りん酸二水素ナトリウム水溶液を調製する。（1 L のメスフラスコにりん酸二水素ナトリウム（無水）（#31720-65）2.40 g を量りとり、蒸留水で 1 L にメスアップする）
② 20 mmol/L りん酸水素二ナトリウム水溶液を調製する。（1 Lのメスフラスコにりん酸水素二ナトリウム（無水）（#31801-05）2.84 g を量りとり、蒸留水で１L にメスアップする）
③ pH メーターで測定しながら、pH 7.0 になるように①と②を混合する。
④ ミリカップーHV（0.45 µm）（#44054-89）を用いて減圧ろ過する。
※塩類は不溶性固体を含有している場合があり、ポンプのシールの劣化や、力ラムの詰まりの原因になるので、必ずろ過してください。
⑤ 有機溶媒と混合する場合には「1. 有機溶媒と水混合の移動相」の例と同様に体積比で混合してください。
※混合時に塩が析出していないか確認してください。時間経過後、析出する場合もあります。

調製済みの緩衝液〔りん酸緩衝液（pH7.0）（5倍濃縮）（#08968-81）〕を販売していますのでご利用ください。

（例 3）5 mmol/L 1-へキサンスルホン酸ナトリウム，20 mmol/L りん酸緩衝液（pH 2.5）の調製

① 5 mmol/L 1-へキサンスルホン酸ナトリウム、20 mmol/Lりん酸二水素ナトリウム水溶液を調製する。（１Lのメスフラスコに、 1-へキサンスルホン酸ナトリウム（#31529-24） 0.94 g と、りん酸二水素ナトリウム（無水）（#31720-65）2.40 g を量りとり、蒸留水で １ L にメスアップする）
② 5 mmol/L 1-へキサンスルホン酸ナトリウム、20 mmol/L りん酸水溶液を調製する。（1 L のメスフラスコに、1-へキサンスルホン酸ナトリウム（#31529-24） 0.94 g と、りん酸（純度 85%）（#08964-92）2.31 g を量りとり、蒸留水で 1 L にメスアップする）
③ pH メーターで測定しながら、pH 2.5 になるように①と②を混合する。
④ ミリカップーHV（0.45 µm）（#44054-89）を用いて減圧ろ過する。
※塩類は不溶性固体を含有している場合があり、ポンプのシールの劣化や、力ラムの詰まりの原因になるので、必ずろ過してください。
⑤ 有機溶媒と混合する場合には「1. 有機溶媒と水混合の移動相」の例と同様に体積比で混合してください。
※混合時に塩が析出していないか確認してください。時間経過後、析出する場合もあります。