この度、弊社製品の高純度イミダゾールジペプチド［L-カルノシン（Car）、L-アンセリン（Ans）、L-バレニン（Bal）］と L-2-オキソカルノシン（2-oxo-Car）を用いた、種々の活性酸素種（ROS）によるタンパク質と核酸の分解抑制効果および、マウス筋芽細胞 C2C12 内の ROS 産生抑制効果についての論文（図 1）が、「AppliedChem」に掲載されました。本研究は京都大学大学院 薬学研究科 掛谷 秀昭 教授と京都大学大学院 農学研究科 友永 省三 助教らとの共同研究成果です。

論文名 :
Inhibitory effect of imidazole dipeptides and 2-oxo-imidazole dipeptides on intracellular ROS generation and degradation of protein and DNA

著者名 :
Yamada Yasunari¹, Hayashi Kohei¹, Yoshimochi Kenji¹, Hirose Tsunehisa¹, Shimotsuma Motoshi¹, Kuranaga Takefumi², Kakeya Hideaki², Tomonaga Shozo³, and Ozaki Makoto¹

所属 :
1 ナカライテスク株式会社 研究開発部
2 京都大学大学院 薬学研究科 創発医薬科学専攻 システムケモセラピー・制御分子学分野
3 京都大学大学院 農学研究科 応用生物科学専攻 動物栄養科学分野

誌名 :
AppliedChem. 2026;6:15.
DOI : https://doi.org/10.3390/appliedchem6010015

図 1. 本研究の概要図

概要 :
イミダゾールジペプチド（IDPs）は、食肉中に豊富に含まれる機能性食品成分であり、抗酸化活性や抗疲労作用を有しています。イミダゾール基の 2 位が酸化された 2-オキソイミダゾールジペプチド（2-oxo-IDPs）は、生体内に微量存在し、IDPs と比較して著しく高い抗酸化活性を示します。市販の IDPs 試薬にも微量の 2-oxo-IDPs が含有しており、IDPs の抗酸化活性に影響を与える可能性が示唆されています。本研究では、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）と DPPH（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl）アッセイによって、さまざまなメーカーの IDPs 試薬中の 2-oxo-IDPs の含有の有無を評価しました。微量の 2-oxo-IDPs を含む一部の IDPs 試薬は、2-oxo-IDPs を含まない高純度の IDPs 試薬と比較して高い抗酸化活性を示しました（図 2）。このことから、IDPs の機能を正確に評価するには、高純度の IDPs 試薬を使用する必要があることが示されました。

図 2.（A）カルノシン（Car）、アンセリン（Ans）、バレニン（Bal）、および 2-オキソカルノシン（2-oxo-Car）の構造、（B）さまざまなメーカーのカルノシン Car および Ans 試薬の HPLC クロマトグラム、（C）DPPH アッセイによる抗酸化活性評価

次に、2-oxo-IDPs を含まない高純度の IDPs 試薬（Car、Ans、Bal）と 2-oxo-Car を用いて、ROS によるタンパク質および DNA の分解に対する抑制効果を評価しました。その結果、2-oxo-Car は IDPs と比較して、次亜塩素酸イオン（ClO^-）およびペルオキシナイトライト（ONOO^-）によるタンパク質と DNA の分解を、著しく阻害しました（図 3A、B）。さらに 2-oxo-Car は、C2C12 細胞におけるピオシアニンによる ROS 生成を、IDPs やグルタチオン（GSH）と比較して優位に抑制しました（図 3C）。今後、2-oxo-Car の代謝動態を明らかにすることで、2-oxo-Car を IDPs のサプリメントの代替として利用することが期待できます。

図3.（A）ONOO^- とタンパク質（オボアルブミン）、各種抗酸化剤添加条件における SDS-PAGE 像、（B）ClO^- と DNA（λファージDNA）、各種抗酸化剤添加条件におけるアガロース電気泳動像、（C）ピオシアニン処理後の C2C12 細胞における各種抗酸化剤による ROS の生成抑制率 ^* p < 0.05; ^** p < 0.01.

▼ 本論文で使用した製品

• L-カルノシン 1 g（e-nacalai へ）
• L-カルノシン 25 g（e-nacalai へ）
• L-アンセリン 25 mg（e-nacalai へ）
• L-バレニン 25 mg（e-nacalai へ）
• L-2-オキソカルノシン 25 mg（e-nacalai へ）
• コスモシール 3PBr パックドカラム（3.0 mm I.D. × 150 mm）（e-nacalai へ）
• コスモシール 3PBr パックドカラム（4.6 mm I.D. × 250 mm）（e-nacalai へ）
• 1-フルオロ-2,4-ジニトロフェニル-5-L-バリン-N,N-ジメチルエチレンジアミンアミド 50 mg（e-nacalai へ）

▼ 関連資料

• [TN-35] C₁₈ カラムでは分離困難な食肉に含まれる高親水性のイミダゾールジペプチドの高速分析
• [TN-34] COSMOSIL PBr カラムでの、食肉中のイミダゾールジペプチドとその構成アミノ酸、タウリンの一斉分析

▼ 関連文献

• Rapid separation and quantification of imidazole dipeptides in meats using a PBr column packed with 3-(pentabromobenzyloxy) propyl group modified silica gel.
  Ozaki M, Nakade T, Yamada Y, Hirose T, Shimotsuma M, Tomonaga S. J Chromatogr B. 2025;1262:124660.
  DOI : https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2025.124660
• Simultaneous analysis of imidazole dipeptides, constituent amino acids, and taurine in meats using the highly sensitive labeling reagent L-FDVDA and PBr Column.
  Ozaki M, Nakade T, Sekiguchi M, Shimotsuma M, Hirose T, Kawase T, Tsuji A, Kuranaga T, Kakeya H, Tomonaga S. J Agric Food Chem. 2024;72:27538-27548.　DOI : https://doi.org/10.1021/acs.jafc.4c07391
  ※ Featured on Supplementary Cover
• Simultaneous separation and identification of all structural isomers and enantiomers of aminobutyric acid using a highly sensitive chiral resolution labeling reagent.
  Ozaki M, Shimotsuma M, Kuranaga T, Kakeya H, Hirose T. Anal Methods. 2023;15:6648-6655.
  DOI : https://doi.org/10.1039/D3AY01665J　※ Featured on Front Cover
• Separation and identification of isoleucine enantiomers and diastereomers using an original chiral resolution labeling reagent.
  Ozaki M, Shimotsuma M, Kuranaga T, Kakeya H, Hirose T. Chem Pharm Bull. 2023;71:824-831.
  DOI : https://doi.org/10.1248/cpb.c23-00439