HPLC(高速液体クロマトグラフィー)用関連試薬
HPLC 用溶媒
HPLC は『優れた分離能』『高検出感度』『短時間分析』『簡単操作』などの長所を生かし、臨床・医学の分野から天然物の精製・分取、さらには公害分析・食品分析まで現在の機器分析の主流となっています。
弊社では検出器などの高感度化に対応した厳しい規格を設定し、これらの規格を保証した高純度の各種 HPLC 用溶媒を用意しています。
規格
製品名 | Assay (GC) (%) | Density (20℃) (g/mL) | Specific Gravity (20/ 20℃) | Refractive Index n20D | Absorbance | Maximum Impurities |
---|---|---|---|---|---|---|
Acetone | min.99.7 | 0.789 〜 0.792 |
- | 1.358 〜 1.360 | 330 nm max. 1.00 335 nm max. 0.30 340 nm max. 0.10 345 nm max. 0.05 350〜400 nm max. 0.01 |
|
Acetonitrile | min.99.8 | (0.780 〜 0.784)* | 0.782 〜 0.785 |
1.343 〜 1.346 | 200 nm max. 0.05 220 nm max. 0.02 225〜400 nm max. 0.01 |
|
t-Butyl Methyl Ether |
min.99.5 | 0.738 〜 0.742 |
- | 1.368 〜 1.371 | 220 nm max. 1.00 250 nm max. 0.15 280 nm max. 0.01 |
|
Chloroform | min.99.0 | (1.474 〜 1.491)* | 1.477 〜 1.494 |
1.444 〜 1.446 | 254 nm max. 0.30 260 nm max. 0.10 280 nm max. 0.02 300〜400 nm max. 0.01 |
|
Cyclohexane | min.99.7 | 0.777 〜 0.779 |
- | 1.425 〜 1.427 | 210 nm max. 1.00 220 nm max. 0.50 230 nm max. 0.20 240 nm max. 0.05 250〜400 nm max. 0.01 |
|
o-Dichloro- benzene |
min.99.0 | (1.303 〜 1.308)* | 1.305 〜 1.310 |
1.550 〜 1.553 | 300 nm max. 0.30 310 nm max. 0.15 350 nm max. 0.10 360〜400 nm max. 0.05 |
|
Dichloro- methane |
min.99.5 | (1.322)* | - | - | 235 nm max. 0.70 240 nm max. 0.30 254 nm max. 0.02 270〜400 nm max. 0.01 |
|
N,N-Dimethyl- formamide |
min.99.7 | 0.947 〜 0.952 |
- | 1.428 〜 1.432 | 270 nm max. 1.00 290 nm max. 0.10 310 nm max. 0.05 330〜400 nm max. 0.01 |
|
1,4-Dioxane | min.99.0 | (1.030 〜 1.037)* | 1.032 〜 1.039 |
1.421 〜 1.423 | 240 nm max. 1.00 254 nm max. 0.35 280 nm max. 0.10 300〜400 nm max. 0.01 |
|
Distilled Water | - | - | - | 1.332 〜 1.334 | 210 nm max. 0.02 230〜400 nm max. 0.01 |
|
Ethanol (99.5) |
min.99.5 | 0.789 〜 0.791 |
- | 1.360 〜 1.363 | 210 nm max. 0.70 220 nm max. 0.40 230 nm max. 0.20 254 nm max. 0.03 280 〜400 nm max. 0.01 |
|
Ethyl Acetate | min.99.8 | 0.898 〜 0.902 |
- | 1.371 〜 1.374 | 254 nm max. 1.00 260 nm max. 0.20 270 nm max. 0.10 280 nm max. 0.02 290〜400 nm max. 0.01 |
|
Heptane | min.99.0 | (0.680 〜 0.686)* | 0.681 〜 0.687 |
1.386 〜 1.389 | 210 nm max. 0.70 220 nm max. 0.30 230 nm max. 0.10 240 nm max. 0.05 254 〜400 nm max. 0.01 |
|
1,1,1,3,3,3- Hexafluoro- 2-propanol |
min.99.5 | (1.616 〜 1.620)* | 1.619 〜 1.623 |
- | 200 nm max. 0.05 220 nm max. 0.03 240 nm max. 0.02 |
|
Hexane | min.96.0 | (0.658 〜 0.662)* | 0.659 〜 0.663 |
1.374 〜 1.377 | 210 nm max. 0.30 220 nm max. 0.15 230 nm max. 0.05 240 nm max. 0.03 254 〜400 nm max. 0.01 |
|
Methanol | min.99.8 | (0.792)* | - | 1.327 〜 1.330 | 210 nm max. 0.70 220 nm max. 0.30 230 nm max. 0.15 240 nm max. 0.07 254 nm max. 0.02 270〜400 nm max. 0.01 |
|
1-Propanol | min.99.5 | 0.801 〜 0.806 |
- | 1.383 〜 1.387 | 230 nm max. 0.30 240 nm max. 0.15 254 nm max. 0.03 270〜400 nm max. 0.01 |
|
2-Propanol | min.99.7 | 0.784 〜 0.787 |
- | 1.376 〜 1.379 | 210 nm max. 0.70 220 nm max. 0.30 230 nm max. 0.20 254 nm max. 0.05 260〜400 nm max. 0.01 |
|
Tetrahydrofuran | min.99.7 | 0.884 〜 0.889 |
- | 1.406 〜 1.409 | 254 nm max. 0.30 280 nm max. 0.10 313 nm max. 0.05 340〜400 nm max. 0.01 |
|
Toluene | min.99.8 | 0.864 〜 0.868 | - | 1.496 〜 1.498 | 285 nm max. 1.00 290 nm max. 0.50 300 nm max. 0.20 310 nm max. 0.05 320 nm max. 0.03 350〜400 nm max. 0.01 |
|
( )*の中の数値は規格値ではなく、参考としての物性値です。
価格表
HPLC 用プレミックス溶離液・HPLC 用プレミックス調製液・HPLC 移動相調製用添加剤
価格表
劇 :劇物
危 4-1 :危険物第 4 類第 1 石油類
危 4-2 :危険物第 4 類第 2 石油類
危 4-3 :危険物第 4 類第 3 石油類
危 4-アル :危険物第 4 類アルコール類
水 :水溶性液体
HPLC 用イオンペア試薬
イオンペア試薬は、逆相クロマトグラフィーにおいて、有機溶媒と緩衝液だけでは保持時間が短くなる、親水性の高い化合物を分析するための試薬です。弊社では医薬品や生体内物質の分析にも安心してご使用いただける製品を用意しています。
使用方法
移動相とする緩衝液中にイオンペア試薬を溶解して使用します。イオンペア試薬を使用して分析を行う際は、分析前の平衡時間や分析終了後のカラム洗浄時間を長めにしてください。これはイオンペア試薬自体が充填剤に保持されるので平衡や洗浄に時間がかかるためです。炭素鎖長が C10 以下のイオンペア試薬を使用する場合、目安としては分析前の平衡は 20 分、分析後の洗浄は 5% アセトニトリルなどで 30 分程度必要です。(C10 以上のイオンペア試薬を使用する場合、カラム内のイオンペア試薬の洗浄に 1 時間以上かかることもありますので、専用のカラムを用意していただくことをお薦めします)
条件設定方法
以下の方法は弊社、推奨の設定方法です。
※HILIC カラムについてはこちら
イオンペア試薬の条件設定
分析条件 | |||
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カラム | COSMOSIL 5C18-PAQ | 検 出 |
UV 270 nm |
カラムサイズ | 4.6 mm I.D. × 150 mm | サンプル |
1.L-Noradrenaline 2.L-Adrenaline 3.L-DOPA 4.Dopamine |
移動相 | ** | ||
流 速 | 1.0 mL/min | ||
温 度 | 30℃ |
分析例
低分子不飽和カルボン酸
分析条件 | |
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カラム | COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ 4.6 mm I.D. × 150 mm |
移動相 |
Acetonitrile / 5 mmol/L Tetra-n-butylammonium Phosphate, 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7) = 10 / 90 |
流 速 | 1.0 mL/min |
温 度 | 30℃ |
検 出 | UV 230 nm, 0.5 AUFS |
サンプル |
|
アミノ酸
分析条件 | |
---|---|
カラム | COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ 4.6 mm I.D. × 150 mm |
移動相 | Acetonitrile / 5 mmol/L Sodium 1-Hexanesulfonate, 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 3) = 10 / 90 |
流 速 | 1.0 mL/min |
温 度 | 30℃ |
検 出 | UV 215 nm, 0.5 AUFS |
サンプル |
|
価格表
塩基性物質用
酸性物質用
アミノ酸誘導体化試薬
アミノ酸誘導体化試薬についてはこちら
HPLC 用ラベル化剤
アミノ酸や脂質など検出が難しい化合物をラベル化することにより、高感度検出が可能になります。また、他成分との分離の向上も期待できます。弊社では各種ラベル化剤をご用意しています。
可視ラベル化剤
Dabsyl Chloride(4-Dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonyl Chloride)
分析条件 | |
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カラム | COSMOSIL 5C18-MS-II 4.6 mm I.D. × 150 mm |
移動相 | Methanol / 20 mmol/L Phosphoric Acid = 70 / 30 |
流 速 | 1.0 mL/min |
温 度 | 30℃ |
検 出 | UV 430 nm, 2.56 AUFS |
サンプル |
|
C14H14ClN3O2S
M.W.=323.80
本製品は暗赤色結晶、m.p.185 ~ 188℃ (dec.)、水にはほとんど溶けない。アセトンにわずかに溶ける。
アミノ基のラベル化剤で、アミン、アミノ酸、ペプチドなどと結合し、可視部に強い吸収(最大吸収波長 430 nm)をもつ Dabsyl 誘導体を生成する。
DNBC(3,5-Dinitrobenzoyl Chloride)に比べ約 100 倍、蛍光ラベル化剤であるダンシルクロリドと同程度の感度を有するラベル化剤です。
例)
- アミノ酸のラベル化
アミノ酸 60 nmol を 0.3 mL の炭酸ナトリウム-炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH 8.9、0.1 mol/L)に溶かし、本製品の 10 µmol/mL アセトン溶液 0.3 mL を加え、 攪拌しながら 70℃で 6 分反応させる。 - ペプチドのラベル化
サンプル 300 nmol を 0.5 mL の炭酸ナトリウム-炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH 8.9)に溶かし、本製品の 10 µmol/mL アセトン溶液 0.5 mL を加え、70℃で 6 分反応させる。反応液を減圧乾固し、5.7N-塩酸 1.5 mL を加え、105℃で 3 時間加水分解し、HPLC のサンプルにする。
Ref.
- J.K.Lin,J.Y.Chang,Anal.Chem.47,1634(1975).
- J.Y.Chang,E.H.Creaser,J.Chromatogr.116,215(1976).
- J.K.Lin,C.C.Lai,Anal.Chem.52,630(1980).
価格表
蛍光ラベル化剤
NBD Chloride(7-Chloro-4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole)
本製品は淡黄色結晶、m.p.95 ~ 98℃、アルコールに可溶、ダンシルクロリドより水に溶ける。
アミノ基(R-NH2、R-NH-R')と反応して強い蛍光を発する。また、加水分解によって得られたアミノ基(カルバミド系農薬)やメルカプト基(R-SH)ともよく反応する。
分析条件 | |
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カラム | COSMOSIL 5C18-MS-II 4.6 mmI.D. × 150 mm |
移動相 | Methanol / 20 mmol/L Phosphoric Acid = 60 / 40 |
流 速 | 1.0 mL/min |
温 度 | 30℃ |
検 出 | Ex.465 nm Em.520 nm, RANGE 128 |
サンプル |
|
C6H2ClN3O3
M.W.=199.55
例)
1 ~ 20 µg のアミンを含むメタノール溶液 25 ~ 500 µL に 4 ~ 8 倍モル過剰の本製品 0.05% メタノール溶液を加え、0.1 M-炭酸水素ナトリウム 50 ~ 100 µLを加えて攪拌し、55℃ で 1 ~ 5 時間反応させ、室温と冷却後、反応液を HPLC のサンプルにする。
Ref.
- J.F.Lawrence,R.W.Frei,Anal.Chem.,44,2046(1972)
- H.F.Van,A.Heyndrickx,Anal.Chem.,46,286(1974)
- H.J.Klimisch,L.Stadlen,J.Chromatogr.,90,141(1974)
- J.H.Wolfram,J.Chromatogr.,132,37(1977)
- Y.Nishikawa,K.Kuwata,Anal.Chem.,57,1864(1985)
o-Phthalaldehyde,recryst(OPA)
本製品は黄色結晶、m.p.56 ~ 57℃。水、多くの有機溶媒に可溶、エーテルに難溶。1 級アミン、チオール化合物と反応して蛍光を発する。
分析条件 | |
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カラム | COSMOSIL 5C18-MS-II 4.6 mm I.D. × 150 mm |
移動相 | Methanol / 20 mmol/L Phosphoric Acid = 70 / 30 |
流 速 | 1.0 mL/min |
温 度 | 30℃ |
検 出 | Ex.340 nm Em.450 nm, RANGE 128 |
サンプル |
|
C6H4(CHO)2
M.W.=134.13
例)
サンプル 5 mL に 10% 塩酸 0.05 mL 加えて酸性とした後、本製品の 4 mg/mL メタノール溶液 2 mL を加えて攪拌し、2-メルカプトエタノール 0.05 mL と pH 9 炭酸緩衝液 3 mL を加え、1 分室温に放置してからフィルターでろ過し、HPLC のサンプルにする。