ナカライテスク株式会社

細胞凍結保存液

Cell Reservoir One

  • 細胞培養

Cell Reservoir One は、マユ由来タンパク質のセリシンを主成分とした細胞保存液です。セリシンは、血清と同程度の凍結保存効果があり、DMSO の毒性緩和作用も示します。しかしながら、一般的に DMSO が細胞の機能に影響を与えることが指摘されていることから、本製品では DMSO 含有と DMSO 不含タイプの 2 種類を販売しています。
※本製品は、セーレン株式会社との共同推進のもと製造しています。(特許第 4588598 号)

特長
  • 高い回復率(増殖能・機能)と生存率
  • 血清および哺乳動物由来成分不含
  • 無血清培養細胞の保存に最適
  • ES 細胞の保存にも有効(DMSO 不含タイプ)
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製品説明

凍結保存実績

以下に Cell Reservoir One を用いた細胞の凍結保存試験(生存率)の結果および保存実績を紹介します。

凍結保存試験(生存率)

動物種 細胞種 由来組織 凍結期間 Cell Reservoir One 生存率(%)
DMSO 含有 DMSO 不含
ヒト Jurkat 血液 1 年 90 85
ヒト HL-60 血液 1 年 90 80
ヒト WIL2-NS 脾臓 1 年 90 70
ヒト MSC 骨髄 1 年 90 70
ヒト HeLa 子宮頸部 1 年 90 80
ヒト HepG2 肝臓 1 年 85 70
ヒト NHDF 正常皮膚 1 年 90 75
マウス KUSA-A1 骨髄 9 カ月 90 80
マウス 2E3-O ハイブリドーマ 1 年 90 80
マウス P3U1 骨髄 1 年 90 80
マウス OP9 頭蓋冠 10 カ月 95 85
マウス ES 1 年 80 90
ラット PC-12 副腎 1 年 90 70
ハムスター CHO 卵巣 1 年 95 90
ウサギ RC4 角膜 1 年 90 70
昆虫 Sf-9 卵巣 1 年 75 70

保存温度 : -80℃

細胞種 : Jurkat 細胞種 : HeLa
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細胞種 : CHO 細胞種 : マウス ES
N14_seizonritu-CHO.png N14_seizonritu-ES.png
① Cell Reservoir One(DMSO含有) ② Cell Reservoir One(DMSO不含) ③ 製品 B(血清 / DMSO 含有) ④ 製品 D(血清不含 / DMSO 含有)

凍結条件 : -80℃、1 年

凍結保存実績 細胞例

3T3-L1 Caco-2 HT-1080 MCF-7 NIH/3T3
A-431 COS-7 HuH-7 MDA-MB-231 RAW264.7
A549 HaCaT HUVEC MDCK SH-SY5Y
BHK-21 HCT116 K-562 MEF SW480
C2C12 HEK293 MC3T3-E1 Neuro-2a U-87 MG

Cell Reservoir One(DMSO不含) のマウス ES 細胞への適用

Cell Reservoir One(DMSO不含) を用いて凍結保存したマウス ES 細胞を解凍し、生存率、増殖能、未分化維持および拍動心筋分化への影響を評価しました。

解凍後の細胞生存率への影響

生存率が低下しやすいマウス ES 細胞においても高い細胞生存率を示しました。

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増殖能 / 未分化状態への影響

解凍後の細胞においても増殖能および未分化状態を維持しました。

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拍動心筋分化への影響

解凍後の細胞においても拍動心筋への分化能を維持しました。

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凍結操作時間による細胞生存率への影響

細胞を懸濁してから 30 分後に凍結した場合でも、高い細胞生存率を示しました。

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使用方法

保存時

  1. 対数増殖期にある細胞を回収します。
  2. 回収した細胞を 5 × 105 ~ 1 × 107 個/mL になるように本製品に懸濁します。
  3. 凍結保存用チューブに分注します。
  4. 予備凍結せずに-80℃ で凍結保存します。-80℃ で凍結した細胞は、液体窒素でも保存可能です。

解凍時

  1. 解凍した細胞を、37℃ の恒温槽中で速やかに解凍します。
  2. 解凍後、直ちに使用される培地で懸濁し、遠心分離します。
  3. 上清を除去し、適量の培地で懸濁した細胞を定法に従って培養します。

注意事項

  1. ご使用に際しては、目的の細胞で事前に試用試験を実施してください。
  2. 弊社は本製品の使用に起因する事故や損害についての責任を負いかねますので、ご了承ください。

製品使用例

Cell Reservoir One のヒト不死化間葉系間質細胞(hMSC)への適用

Cell Reservoir One を用いて凍結保存したヒト不死化間葉系間質細胞(hMSC)を解凍し、骨分化への影響を評価した結果、骨への分化能を維持していました。

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顧客使用例

Cell Reservoir One(DMSO含有) のラットインスリノーマ由来細胞株(RIN-5F)およびヒトへパトーマ由来細胞株(HepG2)への適用

Cell Reservoir One(DMSO含有) を用いて凍結保存した RIN-5F 細胞および HepG2 細胞を解凍し、増殖能およびタンパク質産生能への影響を評価しました。 Cell Reservoir One で保存した細胞では細胞増殖能だけでなくインスリンやアルブミン産生能も維持されており、またそれらには Cell Reservoir One の主成分であるセリシンが大きく寄与していました。

RIN-5F 細胞を用いた膵島移植モデル

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HepG2 細胞を用いた人工肝臓モデル

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本データは福井大学 様よりご提供いただきました。

価格表

製品名

規格

貯法

製品番号

容量

オンライン
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Cell Reservoir One(with DMSO) SP(細胞培養用) 冷蔵 07485-86 10 mL e-Nacalai.jpg
07485-44 100 mL
Cell Reservoir One(without DMSO) SP(細胞培養用) 冷蔵 07579-37 10 mL e-Nacalai.jpg
07579-24 100 mL

主成分のセリシンは、セーレン株式会社で製造

※研究者の皆さまのご所属などは、データご提供時の情報に基づいています。
※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。