ナカライテスク株式会社

ジスルフィド結合を切断する還元剤

TCEP-HCl

  • 電気泳動
  • その他

Tris(2-carboxyethyl)phosphine Hydrochloride〔TCEP-HCl〕は、タンパク質内やタンパク質間のジスルフィド結合を切断する還元剤です。2-メルカプトエタノールと異なり毒物に該当しない還元剤で、電気泳動用試料緩衝液やサンプル抽出時などタンパク質研究で広く使用されています。

特長
  • 毒物非該当
  • 還元力が強い
  • 無臭
  • 広範囲の pH で使用可能
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製品説明

製品説明

  • 広い範囲の pH の水溶性緩衝液によく溶解する。
  • 酸性および塩基性の水溶液は安定。 直接水に溶解すると、pH は約 2.5 になる。
  • 中性付近のりん酸緩衝液では、不安定である。 PBS Buffer で使用する場合は、使用の直前に溶解準備する。 SDS-PAGE のローディングバッファーには、25 ~ 50 mM で使用されることが多い。
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TCEP によるジスルフィド結合の還元

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性能評価

還元力 熱安定性
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※pH 未調整
※TCEP の還元力を 100% として比較
※pH 未調整
※各々の試薬の調製時の還元力を100% として保存後に残存する還元力の割合を比較

還元力・熱安定性の比較における還元力の測定方法

サンプル 2 mL  (熱安定性の比較に用いたサンプルは測定前に 0.5 mM に希釈)  

↓ 5 mM 4, 4'-ジチオジピリジン 100 μL 

↓ 5 分間反応

吸光度測定(324 nm)

SDS-PAGE 用試料緩衝液に添加する TCEP 濃度
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試料緩衝液(2 倍濃縮)、0.5M TCEP(pH 7.0)、γ-グロブリンを下記の濃度になるよう調製 ↓加熱(90℃ ~ 95℃)、5 分間
 ↓冷却
  SDS-PAGE(12% ゲル)
  染色(ラピッドステインCBBキット #30035-14)

①タンパク質マーカー ⑥TCEP 10 mM
②2ME 5%(一般組成) ⑦TCEP 5 mM
③TCEP 100 mM ⑧TCEP 2.5 mM
④TCEP 50 mM ⑨TCEP 1 mM
⑤TCEP 20 mM ⑩TCEP 0  mM

 

 

 

 

 

 

 

γ-グロブリン(2.5 μg/レーン)

 

関連資料

価格表

製品名 規格 貯法 製品番号 容量 オンラインカタログへ

Tris(2-carboxyethyl)phosphine

Hydrochloride〔TCEP-HCl〕

SP 冷蔵 07277-61 1 g e-Nacalai.jpg
07277-16 10 g

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