ナカライテスク株式会社

高感度ペルオキシダーゼ DAB 染色

Peroxidase Stain DAB Kit & エンハンサー

  • 免疫染色
  • ブロッティング

高感度、簡便、点眼瓶採用による発がん性物質との接触リスク軽減が特長のペルオキシダーゼ染色 DAB キット(Brown stain) と、DAB 染色用メタルエンハンサーを組み合わせた使用例を紹介します。併用することで色調は Gary へ変化し、更に感度を上げることが可能です。

特長
  • 高感度(染色液調製時の水をエンハンサーに変えるだけで更に感度アップ)
  • エンハンサー使用で Brown から Gray へ色調が変化
  • RNase, DNase テスト済みなので in situ ハイブリダイゼーションに使用可能
  • 点眼瓶採用により発がん性物質への接触リスクが軽減
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製品説明

ドットブロットによる DAB 染色液の性能比較

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Brown キット単独でも、他社製品より感度よく検出できますが、エンハンサーを組み合わせることにより、さらに感度が 2 倍程度上昇します。

使用方法

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ペルオキシダーゼ染色 DAB キット(Brown stain)の反応液調製で、水を DAB 染色用メタルエンハンサーに変えるだけ!

製品使用例

抗 PCNA 抗体を用いたマウス小腸の免疫組織染色(連続切片)

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発色剤
ナカライテスク (Gray)ペルオキシダーゼ染色 DAB キット(Brown stain)+Metal Enhancer for DAB
(Brown)ペルオキシダーゼ染色 DAB キット(Brown stain)
A 社 (Gray)キット品使用(キット付属ニッケル水溶液添加)
(Brown)キット品使用(キット付属ニッケル水溶液未添加)
一般手法 (Gray)0.6 mg/mL DAB, 0.03% H2O2, 50 mM Tris-HCl Buffer pH 7.6, 0.03% NiCl2
(Brown)0.6 mg/mL DAB, 0.03% H2O2, 50 mM Tris-HCl Buffer pH 7.6

DAB 染色用メタルエンハンサーを併用することで、高感度に染色(Gray)できています。 Brown に染色(エンハンサーなし)の場合でも他社製品よりも高感度な結果が得られています。

FAQ(よくあるご質問/トラブルシュート)

ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)はどのような製品ですか?
本製品は、免疫染色において、ペルオキシダーゼを検出するための染色キットです。 本製品の使用により、化学発光検出法に近い検出感度が通常実験室の操作で得られます。
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)のキット内容を教えてください。
本製品のキット内容は、DAB 溶液(10 mL)、緩衝液(10 mL)、基質試薬(10 mL)です。 別途、一次抗体、二次抗体、ペルオキシダーゼ標識試薬等をご準備ください。ペルオキシダーゼ標識試薬として、ストレプト ABC ペルオキシダーゼキット(#30462)がございます。
1 キットで使用できる回数は何回ですか?
組織染色に使用する場合は約 200 回、メンブレン発色に使用する場合は約 10 回となります。 組織染色用溶液の調製は、試験官にイオン交換水を 2 mL 分取し、そこに DAB 溶液、緩衝液、基質試薬をそれぞれ 1 滴(約 45 μL)ずつ添加して行います。 メンブレン発色用溶液の調製は、メスシリンダーにイオン交換水を 40 mL 分取し、そこに DAB 溶液、緩衝液、基質試薬をそれぞれ 900 μL ずつ添加して行います。
使用方法を教えてください。
組織染色の場合、ペルオキシダーゼ標識試薬を反応させたスライドを洗浄後、調製した本製品を滴下します。 適当な染色像を得られたら、水洗して反応を止め、顕微鏡で観察します。使用方法の詳細は、取扱説明書をご参照ください。
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)とペルオキシダーゼ染色キット(#26652)の違いを教えてください。
染色時の色が異なります。 本製品は茶色に発色するのに対して(発色原液の成分 : DAB)、ペルオキシダーゼ染色キットはで赤紫色に発色します(発色原液の成分 : ナフトール誘導体 / ベンチジン誘導体)。感度は同じです(感度 : 約 50-100 pg)。
免疫細胞染色への適応は可能ですか?
可能です。
in situ ハイブリダイゼーション(ISH)への適応は可能ですか?
可能です。 本製品は、DNase、RNase 試験済みであるため、核酸の検出にも安心してご使用いただけます。
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)を用いて膜を染色した場合、染色後の膜の保管方法を教えてください。
遮光状態で保管してください。 強い光に曝されると、染色像の退色が促進されます。
一度調製した発色液を保存しておき、再度使用することは可能ですか?
一度調製した発色液は酸化反応により径時的に着色します。 したがって、溶液は用時調製し、調製後は 10 分以内にご使用ください。
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)(#25985)と DAB 染色用メタルエンハンサーを混合後、細かい粒子が出現した場合、改善策はありますか?
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)(#25985)と本製品を混合後、長時間経過すると析出物が発生することがあります。 そのため、調製液は調製後すぐに使用し、反応時間を可能な限り短縮してください。細胞または組織染色の場合、反応時間は 30 分以内を推奨しております。
DAB 染色用メタルエンハンサーは、どのような製品ですか?
本製品は、免疫染色や in situ ハイブリダイゼーション(ISH)において、ペルオキシダーゼ染色 DAB キット(#25985-50)と併用することで、ペルオキシダーゼを灰色に検出します。 また、本製品の使用により、ペルオキシダーゼ染色 DAB キット単体での使用よりも感度が上昇します。当社 HP と BULLETIN L-119 に上記製品を併用した実施例を掲載しておりますので、ご参照ください。
使用方法を教えてください。
ペルオキシダーゼ染色 DAB キット(#25985-50)の反応液調製で、イオン交換水を本製品に置き換えるだけです。 使用方法の詳細は、取扱説明書をご参照ください。
DAB 染色用メタルエンハンサーは、他社の DAB キットと併用することは可能ですか?
併用可能な他社製品もあるかと思われますが、予備検討を行っていただく必要があります。 本製品は、当社のペルオキシダーゼ染色 DAB キット(#25985-50)とセットでご使用いただくことを想定して、最適化されています。
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)(#25985)と DAB 染色用メタルエンハンサーを混合後、細かい粒子が出現した場合、改善策はありますか?
ペルオキシダーゼ゙染色 DAB キット(BROWN STAIN)(#25985)と本製品を混合後、長時間経過すると析出物が発生することがあります。 そのため、調製液は調製後すぐに使用し、反応時間を可能な限り短縮してください。細胞または組織染色の場合、反応時間は 30 分以内を推奨しております。

価格表

製品名 規格 貯法 製品番号 容量 オンライン
カタログへ
Peroxidase Stain DAB Kit(Brown Stain) SP 冷蔵 25985-50 1 kit e-Nacalai.jpg
Metal Enhancer for DAB Stain SP 室温 07388-24 100 mL e-Nacalai.jpg

※Peroxidase Stain DAB Kit(Dark Gray)(#25986-40)は販売中止となりました。

※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。