Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit の例

正常な細胞では、膜りん脂質であるホスファチジルセリン（PS）が細胞膜の内側に存在するため、アネキシン V に認識されません。アポトーシス初期の細胞では、細胞膜構造は維持したまま PS が細胞表面に露出してくるため、アネキシン V-FITC に認識されて細胞表面だけが緑（FITC）に染色されます。アポトーシス後期の細胞では、細胞内に PI が取り込まれるようになり、細胞内が赤（PI）に染色されます。

細胞種　：マウス B16 メラノーマ細胞

細胞数　：10,000 個

検出装置：Gallios（Beckman Coulter, Inc.）

シクロヘキシミドおよび UV 照射（1 µg/mL）によりアポトーシスを誘導し（37 ℃、3.5 時間）、フローサイトメーターで解析したところ、本キットは A 社製品と同等の性能を有していることを示した。

未処理においては、アポトーシスは認められなかった。シクロヘキシミドでアポトーシスを誘導すると、アポトーシス初期の細胞が多数確認できた。また UV 処理した細胞でもアポトーシスが確認できた。

-- ：アネキシン V-FITC および PI の双方共に蛍光値が低い。生細胞領域。

+- ：アネキシン V-FITC の蛍光値は高く、PI は低い。アポトーシス初期。

++ ：アネキシン V-FITC および PI の双方共に蛍光値が高い。アポトーシス後期。

データご提供：京都大学大学院 薬学研究科 病態情報薬学　高橋 有己 助教

細胞種　：U-87 MG 細胞

検出装置：Tali® イメージサイトメーター（Thermo Fisher Scientific Inc.）

グルコースを除き飢餓状態（48 時間）によりアポトーシスを誘導し、イメージングサイトメーターで解析したところ、アポトーシス初期の細胞が確認できた。

データご提供： 京都府立医科大学大学院 医学研究科 生体情報・機能形態学分野 神経発生生物学（生物学教室）　後藤 仁志 講師

＜商標について＞ ・Tali® は Thermo Fisher Scientific Inc. の登録商標です。

Jurkat 細胞に 1 µg/mL のスタウロスポリンを 37 ℃で 3.5 時間作用させてアポトーシスを誘導し、蛍光顕微鏡で観察した。

アネキシン V-FITC（緑） PI（赤）

Jurkat 細胞に 1 µg/mL のスタウロスポリンを 37 ℃で 3.5 時間作用させてアポトーシスを誘導し、フローサイトメーターで解析した。

*1 test は、細胞数 1×10⁶ cells/mL を用いたアッセイに相当します。