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COSMOSIL HILIC
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Cosmosil

COSMOSIL HILIC

  • HPLC/UHPLC

コスモシール HILIC は、トリアゾールをシリカゲルに化学結合した充填剤を用いた親水性相互作用クロマトグラフィー（Hydrophilic Interaction Chromatography=HILIC）用カラムです。親水性相互作用クロマトグラフィーは順相クロマトグラフィーの一種で、主な相互作用は水素結合です。逆相クロマトグラフィーとは正反対の分離作用で、カラムに注入されたサンプルは、親水性の低い（疎水性の高い）化合物から溶出します。これまで C₁₈ では保持がなく分析できなかった、または、保持時間が短くイオンペア試薬を使用して分析していた親水性化合物がイオンペア試薬なしで分析することができます。また、トリアゾールの陰イオン交換能により酸性化合物を強く保持する性質も持っていますので、更に分離の幅が広がります。

特長
  • トリアゾール結合型
  • 逆相で保持のない親水性化合物の分離に最適
  • 親水性相互作用＋陰イオン交換能
0705651.jpg zoom

製品説明

物性

充填剤名称 HILIC
シリカゲル 全多孔性球状高純度シリカゲル
平均粒子径（µm） 2.5 5
平均細孔径（nm） 13 12
比表面積（m2/g） 330 300
固定相構造 07_1.gif
化学結合基 トリアゾール
USP カテゴリー L104
結合形式 モノメリック
主な相互作用 親水性
陰イオン交換能
エンドキャッピング －
炭素含有率（%） － －
使用可能 pH 範囲 2 〜 7.5

逆相（C18 ）カラムとの比較

親水性相互作用クロマトグラフィー（Hydrophilic Interaction Chromatography = HILIC）は順相クロマトグラフィーの一種です。 逆相クロマトグラフィーとは反対の分離作用であり、カラムに注入されたサンプルは、親水性の低い（疎水性の高い）化合物から溶出します。 C18 カラムで保持のない親水性化合物を分析する場合、イオンペア試薬を使用することが多いですが、コスモシール HILIC ではイオンペア試薬を使用せずに分離が可能になります。イオンペア試薬の問題点である、カラムの平衡に時間がかかる、カラムの劣化が速い、移動相の調製が手間であるなどが解消できます。 また、コスモシール HILIC は、固定相のトリアゾールの効果により陰イオン交換能が働くため、酸性化合物の保持が大きくなる特性を持っています。

HILIC-3no2.png
Conditions
Column size 4.6 mm I.D. × 250 mm Sample
  1. Glycine (5.0 mg/mL)
  2. Glycylglycine (0.125 mg/mL)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃
Detection UV 210 nm Inj. Vol. 2.0 µL

他社とは異なる分離特性

コスモシール HILIC は固定相にトリアゾールを有します。そのため酸性化合物に対して保持が大きくなり、他社カラムと異なる分離特性を示します。クロマトグラムにおいて Peak 3、4 は、陰イオン交換能により他社カラムと比べて保持時間が大きくなっています。

2.5HILIC-3.png
Conditions
Column size 4.6 mm I.D. × 250 mm Detection UV 225 nm
Mobile phase Acetonitrile / 10 mmol/L Ammonium Acetate =
（COSMOSIL) = 70 / 30
（他社）= 80 / 20		 Sample
  1. Melamine (0.10 mg/mL)
  2. Ammeline (0.075 mg/mL)
  3. Cyanuric Acid (0.75 mg/mL)
  4. Ammelide (0.05 mg/mL)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃ Inj. Vol. 1.0 µL

相互作用と分離例：親水性相互作用と陰イオン交換能の効果

コスモシール HILIC は固定相のトリアゾールの効果による親水性相互作用（水素結合による）と陰イオン交換能の 2 つの相互作用によって化合物を分離します。2 つの相互作用は移動相によって使い分けることが出来ます。

親水性相互作用による分離

HILIC-4no3.png
Conditions
Column COSMOSIL HILIC
4.6 mm I.D. × 250 mm		 Sample
  1. Isoascorbic Acid 〔Erythorbic Acid〕 (0.5 mg/mL)
  2. Ascorbic Acid (0.5 mg/mL)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃
Detection UV 245 nm Inj. Vol. 2.0 µL

陰イオン交換能による分離

HILIC-5no2.png
Conditions
Column COSMOSIL HILIC
4.6 mm I.D. × 250 mm		 Detection UV 210 nm
Mobile phase Acetonitrile / 10 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7.0) = 50 / 50 Sample
  1. Oxamic Acid (0.4 mg/mL)
  2. Oxalic Acid (2.0 mg/mL)
Flow rate 1.0 mL/min Inj. Vol. 2.0 µL
Temperature 30℃

製品使用例

分析例

メラミン関連物質

AP-1076.jpg
Conditions
Column COSMOSIL HILIC 4.6 mm I.D. × 250 mm Detection UV 225 nm
Mobile phase Acetonitrile / 10 mmol/L Ammonium Acetate = 70 / 30 Sample
  1. Melamine (0.1 µg)
  2. Ammeline (0.075 µg)
  3. Cyanuric Acid (0.75 µg)
  4. Ammelide (0.05 µg)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃

BCAA（分岐鎖アミノ酸）

AP-0312.png
Conditions
Column COSMOSIL HILIC 4.6 mm I.D. × 250 mm Detection ELSD
Mobile phase Acetonitrile/ 10 mmol/L Ammonium Acetate = 85 / 15 Sample
  1. L-Leucine (3.0 µg)
  2. L-Isoleucine (3.0 µg)
  3. L-Valine (3.0 µg)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃

C18 カラムとの併用利用

C18 カラムと組み合わせてお使いいただくことにより分離の幅が広がります。

C18 カラムとの併用利用
HILIC-6no2.png
Conditions
Column size 4.6 mm I.D. × 250 mm Detection UV 220 nm
Mobile phase 5C18-AR-II:
A:Acetonitrile / 0.1% TFA = 10 / 90
B:Acetonitrile / 0.1% TFA = 30 / 70
B 0 → 100% 20 min Linear gradient
HILIC:
Acetonitrile / 10 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7) = 70 / 30		 Sample
  1. Angiotensin II, 〔Sar1,Thr8〕 (0.5 µg)
  2. Angiotensin II, 〔Sar1,Ala8〕 (0.5 µg)
  3. Angiotensin II, Des-Asp1-〔Ile8〕 (0.5 µg)
  4. Angiotensin II, 〔Sar1,Ile8〕 (0.5 µg)
  5. Angiotensin II, 〔Asn1,Val5〕 (0.5 µg)
  6. Angiotensin II, 〔Val5〕 (0.5 µg)
  7. Angiotensin II (Human) (0.5 µg)
Flow rate 1.0 mL/min
Temperature 30℃

分析条件の設定

親水性相互作用クロマトグラフィーは比較的新しい分離機構であり、まだ使用例が多くありません。そこで弊社ではコスモシール HILlC カラムを身近に使っていただくために、分析例をご用意しました。分析したい化合物はもちろんのこと、類似化合物の分離条件の参考としてご利用ください。

07_8.gif

COSMOSIL Application Data HILIC 2012 の一例

HPLC COSMOSIL Application Data HILIC 2012 (PDF ファイル 17 MB)
印刷冊子をご希望の方は資料請求ください。

新しい分析例は随時こちらで公開しています。

COSMOSIL_application_button.png　

使用文献

  • Zongyun Huang, Robert Francis, Yan Zha, Joan Ruan. Development of a simple method for quantitation of methanesulfonic acid at low ppm level using hydrophilic interaction chromatography coupled with ESI-MS. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 102, 2015, 17-24.
  • Yukiko Yamashita-Higuchi, Sachiko Sugimoto, Katsuyoshi Matsunami, Hideaki Otsuka, Takahito Nakai. Grevillosides J-Q, Arbutin Derivatives from the Leaves of Grevillea robusta and Their Melanogenesis Inhibitory Activity. Chem. Pharm. Bull., 62 (4), 2014, 364-372.
  • Lucie Novakova, Alexandre Grand-Guillaume Perrenoud, Isabelle Francois, Caroline West, Eric Lesellier, Davy Guillarme. Modern analytical supercritical fluid chromatography using columns packed with sub-2 μm particles: A tutorial. Analytica Chimica Acta, 824 (8), 2014, 18-35.
  • Hsiao-Chin Jen, Thi Anh-Tuyet Nguyen, Ya-Jung Wu, Tung Hoang, Osamu Arakawa, Wen-Feng Lin, Deng-Fwu Hwang. Tetrodotoxin and paralytic shellfish poisons in gastropod species from Vietnam analyzed by high-performance liquid chromatography and liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Journal of Food and Drug Analysis, 22 (2), 2014, 178-188.
  • Naonobu Tanaka, Rei Momose, Azusa Takahashi-Nakaguchi, Tohru Gonoi, Jane Fromont, Jun'ichi Kobayashi. Hyrtimomines, indole alkaloids from Okinawan marine sponges Hyrtios spp. Tetrahedron, 70 (4), 2014, 832-837.
  • Taishi Kusama, Naonobu Tanaka, Azusa Takahashi-Nakaguchi, Tohru Gonoi, Jane Fromont, Jun’ichi Kobayashi. Bromopyrrole Alkaloids from a Marine Sponge Agelas sp. Chem. Pharm. Bull., 62 (5), 2014, 499-503.
  • Muneki Isokawa, Takahiro Kanamori, Takashi Funatsu-- & Makoto Tsunoda--. Recent advances in hydrophilic interaction chromatography for quantitative analysis of endogenous and pharmaceutical compounds in plasma samples. Bioanalysis, 6 (18), 2014, 2421-2439.
  • Melissa Dunkle, Caroline West, Alberto Pereira, Steven Van der Plas, Annemieke Madder, William Farrell, Eric Lesellier, Frederic Lynen, Pat Sandra. Synthesis of stationary phases containing pyridine, phenol, aniline and morpholine via click chemistry and their characterization and evaluation in supercritical fluid chromatography. Scientia Chromatographica, 6 (2), 2014, 85-103.
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  • Gianni Pastore, Antonio D'Aloise, Sabrina Lucchetti, Mariateresa Maldini, Elisabetta Moneta, Marina Peparaio, Antonio Raffo, Fiorella Sinesio. Effect of oxygen reduction during malaxation on the quality of extra virgin olive oil (Cv. Carboncella) extracted through “two-phase” and “three-phase” centrifugal decanters. LWT - Food Science and Technology, 59 (1), 2014, 163-172.
  • Takumi Kawaguchi, Tomohiro Suzuki, Yuka Kobayashi, Shinya Kodani, Hirofumi Hirai, Kaoru Nagai and Hirokazu Kawagishi. Unusual amino acid derivatives from the mushroom Pleurocybella porrigens. Tetrahedron, 66(2), 2010, 504-507.
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  • S. Mutalik, A.K. Hewavitharana, P.N. Shaw, Y.G. Anissimov, M.S. Roberts and H.S. Parekh. Development and validation of a reversed-phase high-performance liquid chromatographic method for quantification of peptide dendrimers in human skin permeation experiments. Journal of Chromatography B, 877(29), 2009, 3556-3562.
  • Phey Yen Han, P. Nicholas Shaw and Carl M.J. Kirkpatrick. Determination of para-aminohippuric acid (PAH) in human plasma and urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Journal of Chromatography B, 877(27), 2009, 3215-3220.
  • Tomoko Fujino, Naomi Yamazaki and Hiroyuki Isobe. Convergent synthesis of oligomers of triazole-linked DNA analogue (TLDNA) in solution phase. Tetrahedron Letters, 50(28), 2009, 4101-4103.
  • Takahiro Doi, Keiji Kajimura, Satoshi Takatori, Naoki Fukui, Shuzo Taguchi and Shozo Iwagami. Simultaneous measurement of diazolidinyl urea, urea, and allantoin in cosmetic samples by hydrophilic interaction chromatography. Journal of Chromatography B, 877(10), 2009, 1005-1010.
  • Yasunobu ASAO, Toshio MORIKAWA, Yuanyuan XIE, Masaki OKAMOTO,Makoto HAMAO, Hisashi MATSUDA, Osamu MURAOKA, Dan YUAN, and Masayuki YOSHIKAWA. Structures of Acetylated Oleanane-type Triterpene Saponins,Rarasaponins IV, V, and VI, and Anti-hyperlipidemic Constituentsfrom the Pericarps of Sapindus rarak. Chem. Pharm. Bull., 57(2), 2009, 198-203.
  • Hsiao-Chin Jen, Shin-Jung Lin, Yung-Hsiang Tsai, Chun-Hsiang Chen, Zu-Chun Lin and Deng-Fwu Hwang. Tetrodotoxin poisoning evidenced by solid-phase extraction combining with liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Journal of Chromatography B, 871(1), 2008, 95-100.
  • Hiroyuki Isobe, Tomoko Fujino, Naomi Yamazaki, Marine Guillot-Nieckowski and Eiichi Nakamura. Triazole-Linked Analogue of Deoxyribonucleic Acid (TLDNA): Design, Synthesis, and Double-Strand Formation with Natural DNA. ORGANIC LETTERS, 10(17), 2008, 3729-3732. 
 

関連資料

取扱説明書

COSMOSIL Technical Note など :

関連動画

COSMOSIL HILIC ～逆相で保持のない親水性化合物の対処法～

価格表

分析・分取カラム（粒子径 5 µm）
COSMOSIL HILIC

製品名 サイズ 製品番号 オンラインカタログへ
COSMOSIL　HILIC　Guard Column / Guard Cartridge 2.0 mm I.D. × 10 mm 07569-41 e-Nacalai.jpg
4.6 mm l.D. × 10 mm
Cartridge＊1		 19184-14 e-Nacalai.jpg
10 mm I.D. × 20 mm 07058-31 e-Nacalai.jpg
20 mm I.D. × 20 mm 07854-91 e-Nacalai.jpg
20 mm I.D. × 50 mm 07873-41 e-Nacalai.jpg
28 mm I.D. × 50 mm 07874-31 e-Nacalai.jpg
COSMOSIL　HILIC　Packed　Column 1.0 mm I.D. × 150 mm 07869-11 e-Nacalai.jpg
1.0 mm I.D. × 250 mm 07870-71 e-Nacalai.jpg
2.0 mm I.D. × 30 mm 08568-21 e-Nacalai.jpg
2.0 mm I.D. × 50 mm 07052-91 e-Nacalai.jpg
2.0 mm I.D. × 100 mm 08569-11 e-Nacalai.jpg
2.0 mm I.D. × 150 mm 07054-71 e-Nacalai.jpg
2.0 mm I.D. × 250 mm 07489-91 e-Nacalai.jpg
3.0 mm I.D. × 150 mm 07871-61 e-Nacalai.jpg
3.0 mm I.D. × 250 mm 07872-51 e-Nacalai.jpg
4.6 mm I.D. × 150 mm＊2 07056-51 e-Nacalai.jpg
4.6 mm I.D. × 150 mm
3 ロットセット ＊2, 3		 09385-23 e-Nacalai.jpg
4.6 mm I.D. × 250 mm＊2 07057-41 e-Nacalai.jpg
10 mm I.D. × 150 mm 05564-51 e-Nacalai.jpg
10 mm I.D. × 250 mm 07059-21 e-Nacalai.jpg
20 mm I.D. × 250 mm 07060-81 e-Nacalai.jpg
28 mm I.D. × 250 mm 07875-21 e-Nacalai.jpg

＊1 Guard Cartridge は 2 個入りです。別途にカートリッジホルダーが必要です。
＊2 バリデーション対象カラム
＊3 3 ロット提供　弊社では、コスモシールの高い再現性を証明するために充填剤ロットの異なる 3 種類のカラムの提供を行っています。詳しくは最寄りの弊社営業所・販売取扱店、またはお問い合わせフォーム（https://www.e-nacalai.jp/Contact/）からお問い合わせください。

※価格表に記載のないカラムサイズをご要望の際はお問い合わせください。

COSMOSIL / コスモシールはナカライテスク株式会社の登録商標です。

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※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。