マイコプラズマの検出・除去・予防
マイコプラズマ汚染の問題点
- 実験データの信頼性を損なう恐れ
- 大切な培養細胞の DNA・RNA・タンパク質合成への影響や染色体の変異を誘発
- 培養液に明確な変化を引き起こさないため、汚染の継続・拡大が進む
このようにマイコプラズマによるコンタミネーションは哺乳類細胞を培養する上で重大な問題となっています。
InvivoGen 社では、マイコプラズマ感染の検出、除去、予防に関連する製品をラインアップしています。
製品説明
製品名をクリックすると、各製品の説明に移動します。
| 用途 | 製品名 | マイコプラズマ | 細菌 | 酵母 | 真菌 |
|---|---|---|---|---|---|
| 検出 | MycoStrip | ○ | － | － | － |
| 除去 | Plasmocin® treatment | ○ | － | － | － |
| Plasmocure | ○ | － | － | － | |
| 予防 | Plasmocin® prophylactic | ○ | － | － | － |
| Normocin | ○ | ○ | ○ | ○ | |
| Primocin® | ○ | ○ | ○ | ○ |
検出 MycoStrip－マイコプラズマ検出キット
「混ぜて、垂らす」だけ、特別な装置は使いません。 また、実質の操作時間は約 15 分のみ、結果まで約 1 時間で完了します。基本原理はマイコプラズマに特有の 16S rRNA 遺伝⼦を等温 PCR 法により増幅することです。等温 PCR 法は、多数のプライマーが同時に機能することで増幅が可能となるため偽陽性の⼼配がなく⾼感度に検出が可能です。
詳細は、MycoStrip のページをご覧ください。
除去 Plasmocin® treatment－マイコプラズマ除去試薬
Plasmocin® treatment は、Plasmocin® prophylactic（予防試薬）と比べて高い濃度で使用します。これにより 2 週間でマイコプラズマを除去することができます。
特長
- 2 週間でマイコプラズマを除去
- 細胞内在性のマイコプラズマも除去
- 動物細胞には作用せず、細胞毒性なし
- 細胞の代謝への影響は認められない
- 耐性マイコプラズマが出現しにくい
- ES 細胞、ハイブリドーマ、レトロウイルスパッケージング細胞でも処理実績あり
推奨使用濃度
25 µg/mL（本製品 1 mL で 1 L の培地を調製）
※もし 2 週間処理した後でも除去が不十分だった場合は、37.5 µg/mL で引き続き処理してください。
作用ターゲット
- DNA Gyrase
- リボソームの 50S サブユニット
幹細胞の分化能の検証データ
マイコプラズマに汚染後 Plasmocin® で処理した hES 細胞 H5 884 は、汚染されていない hES 細胞 H5 と同様の分化能を示しました。
Romorini L, Riva DA, Blüguermann C, et al. Effect of antibiotics against Mycoplasma sp. on human embryonic stem cells undifferentiated status, pluripotency, cell viability and growth. PLoS One. 2013 Jul 30;8(7):e70267. doi: 10.1371/journal.pone.0070267. Print 2013
除去 Plasmocure－マイコプラズマ除去試薬
非常に稀なケースですが、Plasmocin® に耐性のあるマイコプラズマが報告されています。これらの耐性マイコプラズマを除去するために、InvivoGen 社は Plasmocure を開発しました。本製品は Plasmocin® とは異なるメカニズムでマイコプラズマに作用する 2 種類の抗生物質を含有しています。マイコプラズマ除去処理中は、細胞に対して微弱な毒性を示すことが報告されていますが、除去後は細胞の回復が見込まれます。
特長
- Plasmocin® に耐性のマイコプラズマを除去可能
推奨使用濃度
50 µg/mL（本製品 1 mL で 2 L の培地が調製）
作用ターゲット
- Isoleusyl Synthetase
- リボソームの 50S サブユニット
予防 Plasmocin® prophylactic－マイコプラズマ予防試薬
Plasmocin® prophylactic は、マイコプラズマに作用する強力な 2 種類の殺菌成分を含有しており、一方はタンパク質合成に作用し、他方は DNA 複製に作用します。これら 2 つの特異的かつ独立したターゲットは、マイコプラズマや他の多くの細菌にのみ見られるもので、真核細胞には全く存在しません。
特長
- ターゲットが異なる 2 種類の殺菌成分を含む
- 動物細胞には作用せず、細胞毒性なし
- 細胞の代謝への影響は認められない
推奨使用濃度
2.5 ～ 5 μg/mL（本製品 1 mLで 500 mL ～ 1 L の培地を調製）
作用ターゲット
- DNA Gyrase
- リボソームの 50S サブユニット
予防 Normocin－マイコプラズマ、細菌、真菌感染予防試薬
Normocin は、マイコプラズマ、細菌、真菌に対して活性のある 3 種類の抗生物質を配合した革新的な抗菌剤です。
特長
- マイコプラズマ、細菌、真菌に作用
- 使用条件下で培養細胞の代謝への影響なし
- 他の抗菌剤と併用可能
推奨使用濃度
100 μg/mL（本製品 1 mLで 500 mL の培地を調製）
作用ターゲット
- 原核生物 : DNA Gyrase，リボソームの 50S サブユニット
- 真菌 : 細胞膜を介したイオン交換
予防 Primocin®－初代培養細胞用のマイコプラズマ、細菌、真菌感染予防試薬
Primocin® は培養時のコンタミネーションから初代培養細胞を守るために特別に設計された新しい抗菌剤です。 特に、解剖の際のコンタミネーションや動物内在性のマイコプラズマから守ります。
特長
- マイコプラズマ、細菌、真菌に作用
- 初代培養細胞に毒性なし
- 他の抗菌剤は不要
推奨使用濃度
100 μg/mL（本製品 1 mL で 500 mL の培地を調製）
作用ターゲット
- 原核生物 : DNA Gyrase，リボソームの 30S、50S サブユニット
- 真菌 : エルゴステロール
FAQ（よくあるご質問/トラブルシュート）
- どのような細胞で処理実績がありますか？
-
以下に処理実績のある一部の細胞を掲載します。
- Human Cell Lines : HEK293、HeLa、Colo357、HL60、HSB2、MCF-7、PC3、Hep-G2、MDA-MB231、SW13、SW620、T47D、U-373、U-87
- Rodent Cell Lines : 235-1、NIH3T3、B16、CHO、CT60、PC12、C2C12、C6、ES Cells
- その他 : Hybridomas、Retrovirus Packaging Cell Line、Bi-color damselfish Cell Lines
- 動物細胞に対して毒性はありますか？
- Plasmocin® はマイコプラズマと多くの細菌だけをターゲットとして作用します。細胞に高濃度の Plasmocin® を作用させている場合、細胞の成長率が減速するかもしれませんが、培養液から Plasmocin® を除くと、すぐに正常な成長率に戻ります。
- ペニシリン/ストレプトマイシンを添加した培養液に Plasmocin®、Normocin、Primocin® を添加できますか？
- Plasmocin®、Normocin はペニシリン/ストレプトマイシン溶液と互換性があります。ペニシリン/ストレプトマイシンと同時に添加することで、抗菌活性スペクトルを広げることができます。初代培養細胞用の Primocin® についてはペニシリン/ストレプトマイシンを添加する必要はありません。
- 選択用抗生物質存在下でも使用できますか？
- G418、Zeocin®、Hygromycin B、Blasticidin S、Puromycin などの一般的な選択用抗生物質と互換性があり、同時に使用できます。
- 耐性マイコプラズマの出現リスクはありますか？
- 耐性菌の存在を確認するために、繰り返し変異の生じる割合を測定しましたが、培養液中に耐性菌は全く出現しませんでした。従って、本製品に対する耐性マイコプラズマは実質的に出現しないと考えられます。もし Plasmocin® 耐性マイコプラズマの出現が懸念される場合は Plasmocure をご使用ください。
- 昆虫細胞でも使用できますか？
- 哺乳動物細胞と同様のプロトコル（推奨濃度 25 µg/mL で 2 週間）でマイコプラズマを除去できます。至適濃度につきましては、50% の範囲で増減（12.5 µg/mL ～ 37.5 µg/mL）させてお試しください。
- ウイルスパッケージング細胞でも使用できますか？
- 同様のプロトコルで使用できます。ウイルス生産前のパッケージング細胞からのマイコプラズマ除去であれば除去用の Plasmocin® treatment、ウイルス生産の間であれば Plasmocin® prophylactic または Normocin をご使用ください。
- tet 調節発現系細胞でも使用できますか？
- Plasmocin® はテトラサイクリン・ファミリーに属しませんので、問題なく使用できます。
価格表
検出
| 製品名 | メーカー製品番号 | 容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|
| MycoStrip | rep-mys-10 | 10 tests |  |
| rep-mys-20 | 20 tests | |
|
| rep-mys-50 | 50 tests | |
|
| MycoStrip 50＊ | rep-mysnc-50 | 50 tests | |
| MycoStrip 100＊ | rep-mysnc-100 | 100 tests | |
＊MycoStrip 50および MycoStrip 100 はカセットのないタイプとなり、他容量のタイプとは操作方法が若干異なります。
製品の仕様など詳細は、InvivoGen 社 Web site をご参照ください。
除去
| 製品名 | 製品濃度 | メーカー製品番号 | 容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|---|
| Plasmocin® treatment | 25 mg/mL | ant-mpt-1 | 25 mg（1 X 1 mL） | |
| ant-mpt | 50 mg（2 X 1 mL） | |
||
| Plasmocure | 100 mg/mL | ant-pc | 100 mg（1 mL） | |
予防
| 製品名 | 製品濃度 | メーカー製品番号 | 容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|---|
| Plasmocin® prophylactic | 2.5 mg/mL | ant-mpp | 25 mg（10 X 1 mL） | |
| Normocin | 50 mg/mL | ant-nr-05 | 250 mg（5 X 1 mL） | |
| ant-nr-1 | 500 mg（10 X 1 mL） | |
||
| ant-nr-2 | 1 g（1 X 20 mL） | |
||
| Primocin® | 50 mg/mL | ant-pm-05 | 250 mg（5 X 1 mL） | |
| ant-pm-1 | 500 mg（10 X 1 mL） | |
||
| ant-pm-2 | 1 g（1 X 20 mL） | |
Plasmocin、Primocin、Zeocin は INVIVOGEN の登録商標です。
※掲載内容は 2025 年 8 月現在の情報に基づいています。