あらゆる核酸に対応した次世代トランスフェクション試薬
ProteanFect TuffCell Transfection Kit
OriGene Technologies 社（以下 OriGene 社）が提供する ProteanFect TuffCell Transfection Kit は、一般的な脂質ベースのトランスフェクション試薬ではない、コアセルベート技術を用いた次世代のトランスフェクション試薬です。
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特長
- 哺乳類由来タンパク質を使ったコアセルベート型デリバリー
（細胞にやさしく、高生存率を維持しながら核酸の導入が可能） - 導入が難しい細胞に高効率で導入可能
（T 細胞、NK 細胞、iPS 細胞、神経細胞、幹細胞など）
コアセルベート技術とは
核酸と哺乳類由来の内在性タンパク質が液滴（コアセルベート）を形成する仕組みを利用して導入を行います。プラス電荷のタンパク質とマイナス電荷の DNA / mRNA / siRNA が混ざると、自己集合しナノ・ミクロサイズの液滴が形成されます。この核酸が濃縮した液滴をキャリアとして用います。
核酸と哺乳類由来の内在性タンパク質が液滴（コアセルベート）を形成する仕組みを利用して導入を行います。プラス電荷のタンパク質とマイナス電荷の DNA / mRNA / siRNA が混ざると、自己集合しナノ・ミクロサイズの液滴が形成されます。この核酸が濃縮した液滴をキャリアとして用います。
製品説明
一般的なトランスフェクション法との比較
| ProteanFect | 一般的なトランスフェクション試薬 | エレクトロポレーション | |
|---|---|---|---|
| 技術基盤 | 哺乳類タンパク質ベースのコアセルベート | カチオン性脂質 | 電気パルス |
| 細胞生存率 | 高い（表現型と機能を維持） | 中 ～ 低 | 低いことも多い |
| 適応細胞 | T / NK 細胞、幹細胞、神経細胞、初代細胞など非常に広い | 主に細胞株、初代細胞はやや難しい | 初代細胞にも可だがダメージが大きい |
| 遺伝子導入効率 | 初代・免疫細胞でも高効率 | 細胞株では高いが免疫細胞は難しい | 高いが細胞死リスクも高い |
| 対応 cargo | DNA（大きいサイズも可）/ mRNA / siRNA / CRISPR Cas9（mRNA・RNP） | 主に DNA / RNA | さまざまなペイロードに対応 ただし、細胞生存率に大きく影響 |
導入効率の比較データ
pDNA / mRNA トランスフェクション性能比較（Jurkat T 細胞）
トランスフェクション試薬（Reagent L）もしくは ProteanFect を用いて、EGFP 発現プラスミド（pDNA）および EGFP mRNA をJurakat T 細胞に導入した際の、発現効率の違いを示しています。ProteanFect は Reagent L と比べて、pDNA・mRNA のいずれにおいても導入効率が高いことが示されています。
サイズの大きな pDNA の導入と 2 種類の mRNA の共発現のデータ（Jurkat T 細胞）
ProteanFect が大きいプラスミド DNA（8 kb・15.7 kb）および、2 種類の mRNA（EGFP・mCherry）の導入において、問題なく導入できることを示しています。
左図）A 社リポフェクション試薬では、大きいプラスミド DNA の導入効率が 1 % 以下にとどまるのに対し、ProteanFect は高い発現率を実現しています。
右図）2 種類の mRNA（EGFP と mCherry）を ProteanFect で同時導入をしています。共トランスフェクションにも対応できることが確認できます。
Cas9 タンパク質と sgRNA（RNP）による遺伝子編集（Mouse Primary T 細胞）
左図）Trac（CD3）遺伝子ターゲットに対して 83.5 % の高い indel 効率が確認できます。
中央図）細胞増殖データでは、ノックアウト後 72 時間でも TCR-CD3⁻ 細胞が高い生存率を維持しており、ProteanFect による細胞健全性を損なわないことが分かります。
右図）未刺激 T 細胞を含む異なる活性化条件においても、54 ～ 80 % の indel 効率を達成しています。
ProteanFect で成功した初代細胞・細胞株一覧
OriGene 社の Web サイトには、初代細胞・免疫細胞に関する豊富なトランスフェクションデータが公開されています。ぜひご参照ください。
ProteanFect TuffCell Transfection Kit | OriGene Technologies Inc.
| Cell Type | Tested Cargo | Transfection Efficiency | |
|---|---|---|---|
| Primary Cells | Human T Cells | mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % |
| Human B Cells | mRNA siRNA RNP | 20 ～ 75 % | |
| Human Natural Killer Cells | mRNA siRNA RNP | 25 ～ 75 % | |
| iPSCs (Induced Pluripotent Stem Cells) | pDNA mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| HSCs (Human CD34+ Hematopoietic Stem Cells) | mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| UC-MSCs (Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| Human Skin Fibroblasts | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| KSL (Mouse Hematopoietic Stem Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| Mouse Neurons | pDNA mRNA siRNA | 10 ～ 50 % | |
| Mouse Oligodendrocytes | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| Porcine Macrophages | mRNA siRNA | 50 ～ 75 % | |
| Bovine Fibroblasts | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| M. rosenbergii Hemocytes | mRNA siRNA | 25 ～ 75 % | |
| Chicken Primordial Germ Cells | mRNA siRNA RNP | 25 ～ 100 % | |
| L. crocea Mesenchymal Stem Cells | mRNA siRNA | 25 ～ 50 % | |
| Cell Type | Tested Cargo | Transfection Efficiency | |
|---|---|---|---|
| Cell Lines | Jurkat (Human T Cells) | pDNA mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % |
| MOLT-16 (Human T-ALL Cells) | mRNA siRNA | 10 ～ 30 % | |
| Raji (Human B Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| MEC-1 (Human B Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| TMD8 (Human Diffuse Large B-Cell Lymphoma Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| NK-92 (Human Natural Killer Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| K562 (Human Chronic Myeloid Leukemia) | pDNA mRNA siRNA RNP | 30 ～ 100 % | |
| THP-1 (Human Monocytic Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| Kasumi-1 (Human Acute Myeloid Leukemia) | mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| MDS-L (Human Leukemia Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| U937 (Human Myeloid Leukemia) | mRNA siRNA | 50 ～ 75 % | |
| HL-60 (Human Promyelocytic Leukemia) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| HFF (Human Fibroblasts) | mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| LX-2 (Human Hepatic Stellate Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| HepG2 (Human Liver Carcinoma) | pDNA mRNA siRNA RNP | 25 ～ 75 % | |
| KYSE-510 (Human Esophageal Squamous Cell Carcinoma) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| Mum2B (Human Melanoma) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| H1-hESC (Human Embryonic Stem Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| U2OS (Human Osteosarcoma) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| HT-29 (Human Colorectal Adenocarcinoma Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| 5637 (Human Bladder Carcinoma Cells) | pDNA mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| HGC-27 (Human Gastric Carcinoma Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| SH-SY5Y (Human Neuroblastoma Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| U251MG Cells (Human Glioblastoma Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| HEK293 (Human Embryonic Kidney Cells) | pDNA mRNA siRNA RNP | 50 ～ 100 % | |
| Neuro 2A (Mouse Neuroblastoma Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| MC38 (Mouse Colon Adenocarcinoma Cells) | mRNA siRNA | 25 ～ 75 % | |
| RAW264.7 (Mouse Macrophages) | mRNA siRNA | 50 ～ 80 % | |
| LLC (Mouse Lewis Lung Carcinoma) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| CH12 (Mouse Lymphoma Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| BV-2 (Mouse Microglial Cells) | mRNA siRNA | 25 ～ 50 % | |
| C2C12 (Mouse Myoblasts) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| B16 (Mouse Melanoma Cells) | mRNA siRNA | 25 ～ 75 % | |
| MH-S (Mouse Macrophages) | mRNA siRNA | 25 ～ 50 % | |
| MODE-K (Mouse Intestinal Epithelial Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| MEF (Mouse Embryonic Fibroblasts) | pDNA mRNA siRNA | 25 ～ 100 % | |
| 3T3 (Mouse Embryonic Fibroblasts) | mRNA siRNA | 25 ～ 50 % | |
| OLN93 (Rat Oligodendrocyte Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| MDBK (Bovine Kidney Epithelial Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| MAC-T (Bovine Mammary Epithelial Cells) | mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
| COS-7 (Monkey Kidney Fibroblast-like Cells) | pDNA mRNA siRNA | 50 ～ 100 % | |
価格表
| 製品名 | メーカー 製品番号 |
容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|
| ProteanFect TuffCell Transfection Kit | TT300007S | 20 μL |  |
| TT300007M | 100 μL | |
|
| TT300007L | 1.0 mL | |
|
| ProteanFect TuffCell Mouse Immunocyte Transfection Kit | TT300008S | 20 μL | |
| TT300008M | 100 μL | |
|
| TT300008L | 1.0 mL | |
※掲載内容は 2026 年 1 月現在の情報に基づいています。