製品情報

GFP融合タンパク質の精製に最適 抗GFP抗体結合ビーズ GFP-nAb™

通常の抗体は軽鎖と重鎖からなる大きな複合体(~150kDa)ですが、ラクダ科動物由来のシングルドメイン(VHH)抗体は、重鎖可変領域のみから成る小さな抗体(~13kDa)です。この性質により、隠れたエピトープを認識でき、また非特異的な相互作用が起きないため、目的タンパク質の精製に最適です。Allele Biotechnology社では、GFPおよび遺伝子改変したGFPを認識するVHH抗体を磁気ビーズ、アガロース、もしくはポリアクリルアミドに連結した製品GFP-nAb™を販売しています。

特長

  • シングルドメイン(VHH)抗体を採用
  • 優れた特異性
  • 高い安定性(70℃、2M NaCl、0.5% SDSの条件まで使用可能)

ラインアップ

ハンドリングに優れた磁気ビーズタイプや耐久性があり再利用可能なFPLC / HPLCに利用可能なポリアクリルアミドタイプなどを用意しています。

製品名 担体の種類 粒径 結合容量*
GFP-nAb™ Magnetic 磁気ビーズ ~1µm  >0.5µg /10µl
GFP-nAb™ Agarose アガロース ~90µm  >5µg /10µl
GFP-nAb™ Polyacrylamide Resin ポリアクリルアミド 50~80µm  >1mg/ml

*EGFPの結合量で評価 

使用例

GFP-nAb™ Agarose Spin Kitを用いたEGFPの精製

siyourei.jpg

M :マーカー
I :Sf9細胞のライセート
FT :素通り画分
E :溶出したEGFP

本製品よりEGFPを発現するSf9(昆虫細胞)のライセートから、EGFPを精製した後、電気泳動を行い、ゲルをCBB染色した。その結果、EGFPを特異的に精製できていることが示されています。

適用

  • 免疫沈降(Co-IP)
  • クロマチン免疫沈降(ChIP)
  • RIPアッセイ(RNA免疫沈降)
  • FPLC(GFP-nAb™ Polyacrylamide Resinのみ適用可)
  • 定量分析
  • 相互作用のあるタンパク質の探索
  • CLIP アッセイ(in vivo クロスリンクと免疫沈降) 

特異性

本製品は以下の遺伝子改変GFPタンパク質も精製可能です。

UV Proteins CyPet Emerald / mEmerald
Sirius mTurquoise EGFP / mEmerald
Blue Proteins mTurquoise2 Clover
Azurite Sapphire-type Proteins Yellow Proteins
EBFP2 Sapphire EYFP / mEYFP
mKalama1 T-Sapphire Topaz / mTopaz
Cyan Proteins mAmetrine Venus / mVenus
ECFP / mECFP GFPuv SYFP2
Cerulean / mCerulean Green Proteins Citrine / mCitrine
SCFP3A Superfolder GFP Ypet

キット内容

ここではGFP-nAb™ Magnetic Kit(20回)を紹介します。キットには試料の調製からタンパク質の精製までに必要な一連の試薬から構成されています。

キット内容 組成
GFP-nAb™ Magnetic beads
1x Lysis Buffer 20mM Tris-HCl pH 7.5, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 0.5% NP-40
1x Binding Buffer 10mM Tris-HCl pH 7.5, 150mM NaCl
1x Wash Buffer 10mM Tris-HCl pH 7.5, 500mM NaCl
1x Elution Buffer 200mM glycine pH 2.5
1x Neutralization Buffer 1M Tris Base

*磁気スタンドは別途必要となります。
*なお、Agarose Spin Kitは各種緩衝液の他に、スピンカラムも同封されています。 

価格表

キット以外にキットの構成品も販売しています。

製品名メーカー製品番号容量価格
GFP-nAb™ Magnetic Kit ABP-NAB-GFPMK20 20 回 169,000
GFP-nAb™ Magnetic ABP-NAB-GFPM025 250 µl 79,000
ABP-NAB-GFPM050 500 µl 144,000
ABP-NAB-GFPM100 1 ml 259,000
nAb™ Magnetic Control ABP-nAb-MCNTRL5 500 µl 18,000
GFP-nAb™ Agarose Spin Kit ABP-NAB-GFPAK20 20 回 169,000
GFP-nAb™ Agarose ABP-NAB-GFPA025 250 µl 79,000
ABP-NAB-GFPA050 500 µl 144,000
ABP-NAB-GFPA100 1 ml 259,000
nAb™ Agarose Control ABP-nAb-ACNTRL5 500 µl 18,000
nAb™ Spin Kit Columns and Buffers ABP-NAB-SPINK20 20 回 36,000
GFP-nAb™ Polyacrylamide Resin ABP-NAB-GFPP010 1 ml 324,000
ABP-NAB-GFPP050 5 ml ご照会
ABP-NAB-GFPP100 10 ml ご照会
GFP-nAb™ Purified Protein ABP-NAB-GFPAB 250 µg 72,000

※記載の内容は、'17年12月現在の情報に基づいております。