製品情報

ウェスタンブロッティング用発色検出試薬TMB Solution for Western Blotting

本製品はウェスタンブロッティング用発色検出試薬です。化学発光検出試薬のように暗室や CCD イメージャーを必要とせず、目視にて検出が可能です。また、発がん性が報告されている DAB や o-ジアニシジン不使用で、ready to use であるため取り扱いが容易です。

※本製品は ELISA、免疫組織染色にはご使用いただけません。

siyouzu.png

特長

  • 暗室や CCD イメージャーを必要とせず、化学発光検出試薬(一般的感度)と遜色ないレベルで検出が可能
  • 従来の発色法と比べ、感度は同等以上かつ視認容易な色調(青紫色)
  • Ready to use

実施例1

TMB Solution for Western Blotting による大豆タンパク質(Gly m4)の検出

大豆タンパク質(Gly m4)を TMB Solution for Western Blotting により検出しました。本分子は CBB 染色では確認できませんが、本製品を用いたウェスタンブロッティングでは検出が可能でした。

CBB 染色ウェスタンブロッティング
cbb.png western.png
サンプル :豆乳を 20 倍、60 倍、180 倍、540 倍希釈
検出 :【ウェスタンブロッティング】TMB Solution for Western Blotting 反応時間 5 分

【使用者の評価】
TMB Solution for Western Blotting による検出は、化学発光検出試薬(一般的感度)と比較しても、十分な感度で検出が可能であった(データ省略)。また、他社発色検出試薬と比べ高感度な印象であり、ready to use かつ、化学発光のように操作の手間や検出機器を必要としないことから、学生実習や簡易検出に適している。

データご提供:近畿大学 農学部 応用生命化学科 森山 達哉 教授 / 矢野 えりか 研究員

性能確認1

化学発光検出試薬および従来の発色検出試薬との検出感度比較

化学発光検出試薬(一般的感度)および従来の発色検出試薬との検出感度の比較を行いました。本製品は化学発光検出試薬と遜色ないレベルで検出が可能でした。また、従来の発色検出試薬と比較し、より高感度に検出できました。

発色検出試薬(本製品)・反応時間 10 分
TMB-for-WB.png TMB Solution for Western Blotting
化学発光検出試薬・露光時間 10 分
Chemi-Lumi-One-L.png Chemi-Lumi One L(#07880)
ECL.png A 社製品①
ECL-Start.png A 社製品②
従来の発色検出試薬・反応時間 10 分
Peroxidase-Stain-Kit.png Peroxidase Stain Kit(#26652-70)
Peroxidase-Stain-DAB-Kit.png Peroxidase Stain DAB Kit(#25985-50)
Peroxidase-Stain-DAB-Kit+Metal-Enhancer.png Peroxidase Stain DAB Kit
+Metal Enhancer for DAB Stain(#07388-24)
サンプル :HeLa 細胞タンパク質抽出液 12 μg より 2 倍希釈系列
一次抗体 :Anti-β-Actin mAb(MBL #M177-3) ×5,000
二次抗体 :Anti-Mouse IgG, HRP-Linked Whole Ab Sheep(GE #NA931) ×10,000
検出 :【発色】各発色検出試薬 反応時間 10 分
 【発光】各発光検出試薬 反応は各添付文書記載時間に従う LAS-3000(Super モード) 露光時間 10 分

性能確認2

TMB Solution for Western Blotting の定量性

TMB Solution for Western Blotting の定量性を確認しました。4.62 ~ 178 ng(約 1.6 桁)の間で高い直線性(R2値:0.98)を示しました。

seinoukakunin2.png

サンプル :GST-His タンパク質 600 ng より 1.5 倍希釈系列
一次抗体 :Anti-GST(Mouse IgG2a-κ), Monoclonal(GS019), AS(#04435) ×2,000
二次抗体 :Anti-Mouse IgG, HRP-Linked Whole Ab Sheep(GE #NA931) ×10,000
検出 :TMB Solution for Western Blotting 反応時間 5 分
解析 :スキャナー(セイコーエプソン株式会社)で取り込み、ImageJ にてバンド強度を測定

実施例2

TMB Solution for Western Blotting と Signal Enhancer HIKARI との併用

本製品と Signal Enhancer HIKARI を併用することで、Chemi-Lumi One Super のような高感度化学発光検出試薬と遜色ないレベルで検出できます。

発色検出試薬(本製品)・反応時間 10 分
TMB-for-WB-HIKARI.png TMB Solution for Western Blotting
+Signal Enhancer HIKARI for Western Blotting and ELISA(#02270-81)
化学発光検出試薬・露光時間 10 分
Chemi-Lumi-One-Super.png Chemi-Lumi One Super(#02230)
Clarity(B).png B 社製品
サンプル :HeLa 細胞タンパク質抽出液 3 μg より 2 倍希釈系列
一次抗体 :GAPDH Antibody(Novus #NB300-322) ×5,000
 本製品反応分は Signal Enhancer HIKARI A 液で希釈、発光検出試薬反応分は 0.1% t-TBS で希釈
二次抗体 :Anti-Rabbit IgG, HRP-Linked Whole Ab Donkey(GE #NA934) ×10,000
 本製品反応分は Signal Enhancer HIKARI B 液で希釈、発光検出試薬反応分は 0.1% t-TBS で希釈
検出 :【発色】本製品 反応時間 10 分
 【発光】各発光検出試薬 反応は各添付文書記載時間に従う LAS-3000(Super モード) 露光時間 10 分

価格表

製品名

規格

製品番号

容量

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TMB Solution for Western Blotting SP 18186-24 200 mL e-Nacalai.jpg

※掲載の内容は、'18年4月現在の情報に基づいております。