ナカライテスク株式会社

プロテインアッセイシリーズ

  • その他

タンパク質実験において、タンパク質の濃度を常に把握しておくことはとても重要です。タンパク質の定量法は数多くありますが、弊社では、その中でも汎用性の高い CBB 法(Bradford 法)、ビシンコニン酸(BCA)法、Lowry 法に対応した試薬をラインアップしています

製品説明

プロテインアッセイ セレクションガイド

   d010006_selection_guide.png

プロテインアッセイシリーズの特徴比較

各製品の Web site へリンクしています→  CBB 法(Bradford 法) CBB 法前処理 BCA 法 BCA 法前処理 Lowry 法
製品番号 11617-71 29449 11611-60 06385-00 21014-80 29470-60
製品名 CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
CBB クリーンアップキット
妨害物質
除去キット

CBB 溶液と一緒にご使用ください
BCA キット BCA 還元剤アダプト試薬
還元剤適応
試薬

BCA キットと一緒にご使用ください
Lowry キット
測定波長 595 nm
(580 ~ 610 nm*)
562 nm
(540 ~ 590 nm*)
750 nm
(650 ~ 750 nm*)
迅速性 ×
直線性・測定範囲
タンパク質の種類による反応差
夾雑物の影響 界面活性剤 × ×
還元剤 × ×

*記載している範囲で測定は可能です。ただし、吸収極大波長からずれるため、感度が低下します。詳細は各製品の Web site をご参照ください。

各プロテインアッセイの BSA 測定例の比較

CBB 法(Bradford 法) BCA 法 Lowry 法

d010006_CBB_BSA_250.png

スタンダード法(マイクロプレート)にて測定

 

d010006_BCA_BSA_250.png

標準法(マイクロプレート)にて測定
 

 

d010006_Lowry_BSA_250.png

 
 

共存可能物質表

以下の表は、測定に影響を与えない共存物質の濃度を示したものです。

  • 夾雑物を含まない 0 mg/mL および 1 mg/mL BSA の吸光度変化量(Δ1)に対し、夾雑物を含む 0 mg/mL および 1 mg/mL BSA の吸光度変化量(Δ2)が 90 ~ 110% 以内である場合を共存可能としています。
    Δ1:(夾雑物非含有 1 mg/mL BSA の吸光度)–(夾雑物非含有 0 mg/mL BSA の吸光度)
    Δ2:(夾雑物含有 1 mg/mL BSA の吸光度)–(夾雑物含有 0 mg/mL BSA の吸光度)
    90% < Δ2/Δ1 < 110%
  • 表中「-」および表に記載のない化合物は未検討です。未検討物質がサンプル中に存在する場合は、サンプルと同一溶液で検量線を作成し、直線性が得られるかどうかご確認ください。
  • CBB 溶液 (Ready To Use)(#11617-71)および CBB 溶液 (5 倍濃縮)(#29449):スタンダード法(マイクロプレート)にて測定しています。
  • CBB クリーンアップキット(#11611-60):用法に従い、除去操作後、CBB 溶液 (Ready To Use) にて測定しています。
  • BCA キット(#06385-00):標準法(マイクロプレート)にて測定しています。
  • BCA 還元剤アダプト試薬(#21014-80):用法に従い、マイクロプレートにて測定しています。
    * 1 mM DTT と併用したときの共存物質濃度は BCA 還元剤アダプト試薬の取扱説明書に記載しています。
  • 共存可能濃度は被検液と反応溶液の混合比に影響を受けます。上記以外のアッセイ法で実施する場合は、各アッセイ法の混合比と表中値を参考にご検討ください。
各製品の Web site へリンクしています→  CBB 法(Bradford 法) CBB 法前処理 BCA 法 BCA 法前処理 Lowry 法
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーンアップ
キット

CBB溶液
(Ready To Use)
BCA
キット
アダプト試薬
+
BCAキット*
Lowryキット
共存物質 共存濃度(被検液中)
界面活性剤
Brij 35 0.05% 7.5% 5% 0.1%
Nonidet P-40 0.05% 0.05% 10% 10% 0.1%
Octyl β-Glucoside 1% 1% 15% 15% 10%
Octyl β-Thioglucopyranoside 1% 1% 15% 15% 10%
Triton X-100 0.1% 15% 15% 0.1%
Triton X-114 0.1% 0.1% 15% 0.1% 0.01%
Tween 20 0.05% 0.05% 15% 5% 0.1%
Tween 80 0.025% 0.025% 7.5% 2.5% 0.1%
CTAB 0.005% 2% 0.25% 0.01%
Sodium Deoxycholate Monohydrate 0.025% 0.025% 7.5% 7.5% 7.5%
SDS 0.01% 0.01% 2% 5% 1%
CHAPS 0.5% 0.5% 15% 5% 0.1%
CHAPSO 0.5% 15% 5% 0.1%

 

溶剤
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーンアップ
キット

CBB 溶液
(Ready To Use)
BCA キット アダプト試薬
+
BCA キット*
Lowry キット
Acetone 50% 50% 50% 50% 50%
Acetonitrile 50% 50% 40% 50% 50%
DMF 50% 50% 50% 25% 50%
DMSO 50% 50% 50% 50% 50%
Ethanol 50% 50% 50% 50% 50%
Methanol 50% 50% 50% 50% 50%
Glycerol 50% 50% 50% 2.5% 12.5%
還元剤
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーンアップ
キット

CBB 溶液
(Ready To Use)
BCA キット アダプト 試薬
+
BCA キット*
Lowry キット
DTT 500 mM 500 mM 500 mM 0.1 mM 5 mM 0.1 mM
2-Mercaptoethanol 5 M 5 M 1.25 M 0.25 mM 40 mM 2 mM
TCEP (pH 7.6) 250 mM 250 mM 250 mM 0.25 mM 25 mM 0.1 mM
Glutathione (pH 7) 125 mM 125 mM 125 mM 0.5 mM 10 mM 1 mM
キレート剤
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーンアップ
キット

CBB溶液
(Ready To Use)
BCAキット アダプト試薬
+
BCA キット*
Lowry キット
EDTA (pH 8) 250 mM 250 mM 25 mM 10 mM 1 mM
EGTA (pH 8) 250 mM 5 mM 10 mM 1 mM
Sodium Citrate 250 mM 100 mM 10 mM 250 mM
変性剤
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーンアップ
キット

CBB溶液
(Ready To Use)
BCA キット アダプト 試薬
+
BCA キット*
Lowry キット
Ammonium Sulfate 2 M 2 M 1 M 100 mM 50 mM
Arginine・HCl 2 M 2 M 50 mM 1 mM
Guanidine・HCl 1 M 1 M 6 M 4 M 100 mM
Urea 4 M 4 M 8 M 4 M 4 M
Thiourea 2 M 2 M 0.1 mM 1 mM
Buffer
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーン
アップ
キット

CBB溶液
(Ready To Use)
BCA
キット
アダプト
試薬
+
BCA
キット*
Lowry
キット
Glycine (pH 2.8) 1 M 1 M 100 mM 25 mM 50 mM
HEPES (pH 7.5) 500 mM 500 mM 1 M 300 mM 0.25 mM
Imidazole (pH 7) 2 M 2 M 10 mM 25 mM
MES (pH 6.1) 1 M 1 M 1 M 250 mM 100 mM
MOPS (pH 7.2) 1 M 1 M 500 mM 5 mM
PBS 5 × 5 × 5 × 5 ×
PIPES (pH 6.8) 900 mM 900 mM 500 mM 5 mM
Sodium Acetate (pH 5.2) 750 mM 750 mM 1.5 M 400 mM 100 mM
Sodium Acetate (pH 4) 750 mM 750 mM 200 mM
Sodium Bicarbonate 250 mM 500 mM 100 mM 250 mM
TBS 5 × 5 × 1 × 0.25 ×
Triethanolamine (pH 7.8) 1 M 1 M 25 mM 25 mM
Tris-HCl (pH 8) 2 M 2 M 4 M 10 mM 5 mM
Tricine (pH 8) 500 mM 500 mM 10 mM 5 mM
その他
  CBB 溶液
(Ready To Use)
CBB 溶液
(5 倍濃縮)
クリーン
アップ
キット

CBB溶液
(Ready To Use)
BCA
キット
アダプト
試薬
+
BCA
キット*
Lowry
キット
KCl 1 M 1 M 4 M 2 M 50 mM
NaCl 1.25 M 1.25 M 5 M 2.5 M 2.5 M
MgCl2 500 mM 500 mM 4.5 M 25 mM 25 mM
Glucose 50% 50% 45% 0.2% 0.2%
Sucrose 60% 60% 10% 10%
NaOH 100 mM 100 mM 100 mM 100 mM 200 mM
HCl 100 mM 100 mM 10 mM 200 mM 200 mM
Sodium Azide 5% 5% 5% 5% 5%
Protease Inhibitor Cocktail
for General Use(100x)(#04080)
50 × 50 × 50 × 10 × 2 ×
Protease Inhibitor Cocktail
EDTA free(100x)(#03969)
50 × 50 × 50 × 25 × 5 ×
Protease Inhibitor Cocktail
for Use with Mammalian Cell and Tissue Extracts(#25955)
10 × 10 × 50 × 10 × 5 ×
Phosphatase Inhibitor Cocktail
with EDTA(#07574)
0.5 × 0.5 × 0.5 × 1 × 0.5 ×
Phosphatase Inhibitor Cocktail
EDTA free(#07575)
0.5 × 0.5 × 0.5 × 1 × 1 ×
Sample Buffer Solution
with 2-ME(2x)(#30566)
0.01 × 1 × 0.0005 × 0.05 × 0.001 ×
Sample Buffer Solution
without 2-ME(2x)(#30567)
0.01 × 1 × 0.1 × 0.02 ×
Sample Buffer Solution
with Reducing Reagent(6x)(#09499)
0.01 × 1 × 0.001 × 0.05 × 0.001 ×
Sample Buffer Solution
without Reducing Reagent(6x)(#09500)
0.01 × 1 × 0.1 × 0.02 ×
RIPA Buffer(10x)(SDS+)(#08714) 0.02 × 0.02 × 2.5 × 0.5 × 0.05 ×
RIPA Buffer(10x)(SDS-)(#08714) 0.02 × 0.02 × 5 × 0.5 × 0.1 ×

Brij はクローダ アメリカス リミテッド ライアビリティ カンパニー、Nonidet はシェル ブランズ インターナショナル アクチェンゲゼルシャフト、Triton はユニオン・カーバイド・コーポレーション、Tween はクローダ インターナショナル ピーエルシーの登録商標です。