タンパク質のペプチド結合と銅イオンで紫紅色の錯体を形成させる Biuret 法と、チロシン、トリプトファン、システインの側鎖と反応するフェノール試薬とを組み合わせてタンパク質を定量します。

反応生成物の吸光スペクトル

※本製品には検量線用標準液は含まれていません。
   アルブミン (ウシ血清) 溶液 (2mg/ml)（#00653-31）などの検量線用タンパク質標準液をご準備ください。

詳細は取扱説明書をご参照ください。

検量線用標準液の調製

本製品には検量線用標準液は含まれていません。アルブミン (ウシ血清) 溶液 (2mg/ml)（#00653-31）を適宜希釈してご使用ください。測定サンプルと同一の溶媒で希釈することをお薦めします。

操作

*650 ～ 750 nm で測定は可能です。ただし、吸収極大波長が 750 nm にあるため、できるだけ近い波長での測定をお薦めします。

参考：測定波長 750 nm、700 nm、650 nm の BSA 検量線

タンパク質濃度の算出

検量線用標準液から得られた吸光度（試薬ブランクの吸光度を差し引いた値）を用いて検量線を作成します（横軸：タンパク質濃度　縦軸：吸光度）。この検量線に披検液から得られた吸光度（試薬ブランクの吸光度を差し引いた値）を当てはめてタンパク質濃度を算出します。

本製品を用いて、BSA、γ-Globulin、Transferrin 濃度を測定しました。Lowry 法ではタンパク質の種類による反応差は CBB 法（Bradford 法）と比較して小さくなります。

BSA（左：0 mg/mL、右：1.0 mg/mL）にそれぞれの夾雑物を添加し、反応させました。Lowry 法の原理より、還元剤などの夾雑物はサンプルの測定に影響を与えることがあります。夾雑物が含まれる場合は、共存可能物質表を参考に測定可能な濃度までサンプルを希釈し測定してください。