製品情報

充実したラインアップInvivoGen 社 細胞質内 DNA センサー STING 研究用試薬

InvivoGen 社は自然免疫研究用試薬で高い評価を受けているメーカーです。細胞質内 DNA センサーとして知られている STING 研究用の製品を紹介します。

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STING は、dsDNA の刺激により TBK1 と IRF3 を活性化しⅠ型インターフェロンの発現を誘導するアダプタータンパク質です。一方で STING が環状ジヌクレオチド(CDN)と直接結合することで、Ⅰ型インターフェロンを誘導することも知られています。

製品カテゴリー

STING レポーター細胞

STING 遺伝子をノックアウトした細胞などを取り揃えています。野生型と比較することで STING 経路の活性化を確認できます。

変異型 STING 発現ベクター

ヒトまたはマウスの変異型 STING を発現するベクターを提供しています。

STING リガンド

STING を刺激してインターフェロンの発現を誘導するリガンドです。20 種類以上取り揃えています。

STING レポーター細胞

STING 遺伝子をノックアウトしたレポーター細胞を販売しています。この細胞は、IRF 誘導性プロモーターにより制御されているレポーター遺伝子である SEAP(分泌型アルカリホスファターゼ)もしくは Lucia(ルシフェラーゼ)が組み込まれています。分泌された SEAP、Lucia は、検出試薬である QUANTI-Blue もしくは QUANTI-Luc を用いて簡単に検出することができます。

実施例

THP1-Dual 細胞と THP1-Dual KO-STING 細胞のリガンドに対する応答

THP1-Dual 細胞と THP1-Dual KO-STING 細胞を 100 ng/mL poly(I:C)LMW/LyoVec、1 μg/mL VACV-70/LyoVec、3 μg/mL 2'3'-cGAMP、10 μg/mL c-di-AMP により刺激した。1 × 104 U/mL ヒト IFN-αと IFN-βはポジコンとして使用した。 IRF の活性化は Lucia(ルシフェラーゼ)検出試薬である QUANTI-Luc を用いてルミノメーターにより発光量を測定した。各リガンドの活性化は、IFN-βによる活性化を 100% とした場合の相対値として示されている。

B16-Blue ISG 細胞と B16-Blue ISG-KO-STING 細胞のリガンドに対する応答

両細胞を 30 μg/mL CDNs または 103 U/mL mIFN-βにより刺激し、24 時間インキュベーションした後、SEAP を QUANTI-Blue を用いて定量した。

RAW-Lucia ISG 細胞と RAW-Lucia ISG-KO-STING 細胞のリガンドに対する応答

両細胞を 30 μg/mL CDNs または 103 U/mL mIFN-βにより刺激し、24 時間インキュベーションした後、Lucia を QUANTI-Luc を用いて定量した。

価格表

THP1-Dual KO-STING Cells には、Blasticidin、Zeocin、Normocin、アッセイ用の基質(QUANTI-Blue および QUANTI-Luc)が含まれています。その他の製品は Zeocin、Normocin と QUANTI-Blue または QUANTI-Luc が含まれています。
本製品はお手元に到着次第、すぐに培養する必要があります。

由来:THP1 単球細胞(ヒト)  レポーター:SEAP

製品名メーカー
製品番号
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THP1-Blue ISG Cells thp-isg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg

由来:THP1 単球細胞(ヒト)  レポーター:SEAP/Lucia

製品名毒劇物メーカー
製品番号
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THP1-Dual KO-STING Cells thpd-kostg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg

由来:HEK293 細胞(ヒト)  レポーター:SEAP

製品名メーカー
製品番号
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HEK-Blue ISG Cells hkb-isg-1 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg
HEK-Blue ISG-KO-STING Cells hkb-isgkostg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg

由来:B16 メラノーマ細胞(マウス)  レポーター:SEAP

製品名メーカー
製品番号
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B16-Blue ISG Cells bb-ifnabg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg
B16-Blue ISG-KO-STING Cells bb-kostg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg

RAW 264.7 マクロファージ(マウス)  レポーター:Lucia

製品名メーカー
製品番号
容量オンライン
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RAW-Lucia ISG Cells rawl-isg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg
RAW-Lucia ISG-KO-STING Cells rawl-kostg 3-7 X 106cells e-Nacalai.jpg

変異型 STING 発現ベクター

CDN の認識やシグナル伝達に影響を与えるいくつかの変異型 STING がヒトおよびマウスで報告されています。InvivoGen 社では、これら変異型 STING を発現ベクター(pUNO1)へ組み込んだ状態で販売しています。

製品情報

変異導入部位

赤字:変異アミノ酸

ヒト由来

製品名アミノ酸番号参考文献
71155162200230232293
hSTING R V S I G R R
hSTING-H232 R V S I G H R 1,2
hSTING-A230 R V S I A R R 1
hSTING-HAQ H V S I A R Q 1,3
hSTING-A162 R V A I G R R 4,5
hSTING-M155 R M S I G R R 9
hSTING-MRP R V S I G R 6
hSTING-N200 R V S N G R R 7,8

マウス由来

製品名アミノ酸番号参考文献
70161199229231292
mSTING L S I I R R
mSTING-Gt L S N I R R 8

ベクターマップ

468_5.jpg

性能評価

変異型 STING の CDNs および DMXAA に対する応答

468_6_p3-henseigata-STING-seinouhyouka.png

HEK-Blue ISG KO-STING 細胞に STING もしくは STING 変異体をトランスフェクションし、その細胞を、10 µg/mL 2’3’-cGAMP、3’3’-cGAMP、c-di-GMP もしくは DMXAA により刺激した。24 時間インキュベーション後、SEAP の量を QUANTI-Blue を用いて定量した。

参考文献

  1. Yi, G. et al. Single Nucleotide Polymorphisms of Human STING Can Affect Innate Immune Response to Cyclic Dinucleotides. PLoS One. 8(10), e77846 (2013).
  2. Diner, EJ. et al. The innate immune DNA sensor cGAS produces a noncanonical cyclic dinucleotide that activates human STING. Cell Rep. 3(5), 1355-1361 (2013).
  3. Jin, L. et al. Identification and characterization of a loss-of-function human MPYS variant. Genes Immun. 12(4), 263-269 (2011).
  4. Gao, P. et al. Structure-function analysis of STING activation by c[G(2',5')pA(3',5')p] and targeting by antiviral DMXAA. Cell. 154(4), 748-762 (2013).
  5. Conlon, J. et al. Mouse, but not human STING, binds and signals in response to the vascular disrupting agent 5,6-dimethylxanthenone-4-acetic acid. J Immunol. 190(10), 5216-5225 (2013).
  6. Chen, H. et al. An Alternative Splicing Isoform of MITA Antagonizes MITA-Mediated Induction of Type I IFNs. J Immunol. 192(3), 1162-1170 (2014).
  7. Yin, Q. et al. Cyclic di-GMP sensing via the innate immune signaling protein STING. Mol Cell. 46(6), 735-745 (2012).
  8. Sauer, JD. et al. The N-ethyl-N-nitrosourea-induced Goldenticket mouse mutant reveals an essential function of Sting in the in vivo interferon response to Listeria monocytogenes and cyclic dinucleotides. Infect Immun. 79(9), 688-694 (2011).
  9. Liu Y. et al. Activated STING in a vascular and pulmonary syndrome. N Engl J Med. 371(6), 507-18 (2014).

価格表

各製品には Blasticidin が含まれています。

製品名毒劇物メーカー製品番号容量オンライン
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hSTING puno1-hstingwt 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-HA3x* puno1ha-hsting 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-H232 puno1-hsting-h232 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-A230 puno1-hsting-a230 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-HAQ puno1-hsting-haq 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-A162 puno1-hsting-a162 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-M155 puno1-hsting-m155 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-MRP puno1-hsting-mrp 20 μg e-Nacalai.jpg
hSTING-N200 puno1-hsting-n200 20 μg e-Nacalai.jpg
mSTING puno1-mstingwt 20 μg e-Nacalai.jpg
mSTINGwt-HA3x* puno1ha-mstingwt 20 μg e-Nacalai.jpg
mSTING-Gt puno1-msting-gt 20 μg e-Nacalai.jpg

*C 末端側に HA タグがついているベクターです。

STING リガンド

環状ヌクレオチド(CDN)と DMXAA などの Xanthenone 誘導体は、STING を活性化し、強力なⅠ型インターフェロン応答を誘導するため、自然免疫応答のアゴニストとして注目されています。新製品も拡充されましたので、製品ラインアップ全体を紹介します。

特長

  • 2 種類のグレードを提供
  • 保証項目も充実

グレード

通常グレードと前臨床用グレードの VacciGrade の 2 種類を提供しています。

  • 通常グレード:純度 95% 以上、リガンド活性をレポーター細胞により評価
  • VacciGrade:通常グレードの項目に加え、エンドトキシン(<0.005 EU/μg)、完全滅菌条件下での製造を保証

レポーター細胞を用いた活性評価の例

468_7.png

468_8.png

InvivoGen 社より販売のレポーター細胞 THP1-Dual cells を用いて、各リガンドの活性を評価しています。

価格表

製品名概要メーカー
製品番号
容量オンライン
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環状ジヌクレオチド
3'3'-cGAMP STING リガンド tlrl-nacga 500 μg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga-1 1 mg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga-2.5 5 X 0.5 mg e-Nacalai.jpg
3'3'-cGAMP Control ネガティブコントロール tlrl-napgpa 1 mg e-Nacalai.jpg
3'3'-cGAMP Fluorinated STING リガンド tlrl-nacgaf 100 μg e-Nacalai.jpg
2'3'-cGAMP STING リガンド tlrl-nacga23-02 200 μg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga23 500 μg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga23-1 1 mg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga23-5 5 mg e-Nacalai.jpg
2'3'-cGAMP Control ネガティブコントロール tlrl-nagpap 1 mg e-Nacalai.jpg
2'3'-cGAMP VacciGrade STING リガンド-[G(2',5')pA(3',5')p] vac-nacga23 1 mg e-Nacalai.jpg
2'3'-cGAM(PS)2 (Rp/Sp) STING リガンド tlrl-nacga2srs 250 μg e-Nacalai.jpg
2'2'-cGAMP STING リガンド tlrl-nacga22 500 μg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacga22-1 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-AMP STING リガンド-CDS アゴニスト tlrl-nacda 1 mg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacda-5 5 X 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-AMP Control ネガティブコントロール tlrl-napapa 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-AMP Fluorinated STING リガンド tlrl-nacdaf 100 μg e-Nacalai.jpg
2'3'-c-di-AMP STING リガンド tlrl-nacda23 500 μg e-Nacalai.jpg
2'3'-c-di-AM(PS)2 (Rp, Rp) STING リガンド-Bisphosphorothioate analog of c-di-AMP, Rp isomers tlrl-nacda2r-01 100 μg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacda2r 500 μg e-Nacalai.jpg
c-di-GMP STING リガンド-CDS アゴニスト tlrl-nacdg 1 mg e-Nacalai.jpg
tlrl-nacdg-5 5 X 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-GMP Control ネガティブコントロール tlrl-napgpg 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-GMP Fluorinated STING リガンド tlrl-nacdgf 100 μg e-Nacalai.jpg
c-di-GMP VacciGrade STING リガンド-CDS アゴニスト-Cyclic diadenylate monophosphate vac-nacdg 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-IMP STING リガンド-CDS アゴニスト tlrl-nacdi 1 mg e-Nacalai.jpg
c-di-UMP ネガティブコントロール tlrl-nacdu 1 mg e-Nacalai.jpg
Xanthenone アナログ
DMXAA マウス STING リガンド tlrl-dmx 5 mg e-Nacalai.jpg

※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。