COSMOSIL

PBr

  • ペンタブロモベンジル基結合型
  • 親水性化合物を逆相クロマトグラフィーで分離

適合するサンプル例
・親水性化合物
・ヌクレオチド、ペプチド、カテコールアミン、オリゴ糖など

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セミナー動画

C18 カラムとの比較

コスモシール PBr は、ペンタブロモベンジル基のもたらす効果によって、C18 カラムでは保持が小さい親水性化合物を長く保持し、分離することができます。

PBr-7.png

分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 250 mm サンプル
  1. Uridine-5'-diphosphate (0.8 mg/mL)
  2. Uridine-5'-diphosphogalactose (0.8 mg/mL)
  3. Uridine-5'-diphosphoglucose (0.8 mg/mL)
移動相 100 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7.0)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃
検　出 UV 260 nm　 注入量 1.0 µL

HILIC カラムとの比較

HILIC カラムは、親水性化合物を分析できる手法として注目されていますが、逆相カラムとは全く異なる分離特性から、分析条件設定が煩雑になる場合があります。また、移動相に高濃度のアセトニトリルを使用するため、移動相よりも溶出力の強い水を多量に注入するとサンプル容量以上にサンプルの拡散がおこりピーク形状が乱れるという難点があります。一方、コスモシール PBr は、C18 カラムと同様の逆相クロマトグラフィーでの分析条件設定が可能であり、移動相よりも溶出力の弱い水を大量に注入してもサンプルが拡散することなくピーク形状は乱れません。

PBr-1.png

分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 150 mm サンプル
  1. Uracil (0.1 mg/mL)
  2. Uridine (0.2 mg/mL)
PBr-8.png
移動相 HILIC:Acetonitrile / H2O = 90 / 10
PBr:H2O
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃
検　出 UV 260 nm サンプル溶媒 H2O

分離機構

逆相クロマトグラフィーでは、上側のクロマトグラム（①）のように化合物の疎水性の差(CH2 基の数の差）を識別し分離することができます。一方、下側のクロマトグラム（②）のように疎水性に差がない（OCH2CH2 基の数の差）場合、C18 カラムでは保持時間の差がほとんどありませんが、コスモシール PBr ではペンタブロモベンジル基がもつ分散力効果により分離が可能となります。

①疎水性に差がある化合物


分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 150 mm サンプル
  1. Benzene
  2. Toluene
  3. Ethylbenzene
  4. n-Propylbenzene
  5. n-Butylbenzene
移動相 Methanol / H2O = 80 / 20
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃
検　出 UV 254 nm


②疎水性に差がない化合物


分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 150 mm サンプル
  1. Benzyl Alcohol
  2. Ethylene Glycol Monobenzyl Ether
  3. Diethylene Glycol Monobenzyl Ether
  4. Triethylene Glycol Monobenzyl Ether
  5. Tetraethylene Glycol Monobenzyl Ether
移動相 Methanol/ H2O = 60 / 40
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃
検　出 UV 254 nm

■分散力とは？
一般的に中性分子（無極性分子）には電荷の偏りはありません。しかし電子は絶え間なく動いており、瞬間的な状態をみると電荷の偏りが生じて分極していると見なすことができます。この一時的な電気双極子間の引力によって生じる弱い分子間力が"分散力"と呼ばれます。

■分散力が大きい化合物の一例

  • 鎖長の増加など分子量が増加するような化合物
  • 原子半径が大きい置換基を持つ化合物 (例：ハロゲン置換体)
  • 電子の動きが活発な化合物 (例：芳香族化合物)
                                  
コスモシール PBr は固定相の 5 個の臭素原子によって大きな分散力を示すため、化合物の分散力の差を認識して高い選択性を示します。

コスモシール PBr での分離適用化合物

疎水性の小さな親水性化合物は C18 カラムでは保持が小さいですが、コスモシール PBr では分散力の働きにより保持されます。環式化合物やアミド化合物に対して、コスモシール PBr は C18 カラムよりも大きな保持を与えます。コスモシール PBr でも保持がない化合物にはイオンペア試薬、HILIC カラム、誘導体化などのご使用をお薦めします。

PBr-tekioukagoubutu.png
(移動相)

(1) Methanol / 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7.0) = 10 / 90
(2) 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 2.5)
(3) 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7.0)
(4) Methanol / H2O = 10 / 90

分析例

カテコールアミン

PBr-9.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 150 mm		 検　出 UV 280 nm
移動相 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 2.5) サンプル
  1. L-Noradrenaline (0.5 mg/mL)
  2. L-Adrenaline (0.5 mg/mL)
  3. Dopamine (0.5 mg/mL)
  4. L-DOPA (0.5 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 1.0 µL

ウラシル誘導体

PBr-10.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 150 mm		 検　出 UV 210 nm
移動相 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 2.5) サンプル
  1. 5,6-Dihydrouracil (0.005 mg/mL)
  2. Uracil (0.005 mg/mL)
  3. 5-Fluorouracil (0.005 mg/mL)
  4. 5-Bromouracil (0.005 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 10 µL

オリゴペプチド

PBr-11.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 250 mm		 検　出 UV 220 nm
移動相 0.1% TFA-H2O サンプル
  1. Glycine (25 mg/mL)
  2. Glycylglycine (5 mg/mL)
  3. Glycylglycylglycine (5 mg/mL)
  4. Glycylglycylglycylglycine (5 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 1.0 µL

グルタチオン

PBr-12.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 150 mm		 検　出 UV 220 nm
移動相 0.1% TFA-Acetonitrile / H2O = 5 / 95 サンプル
  1. Glutathione(Reduced Form) (2.5 mg/mL)
  2. Glutathione(Oxidized Form) (2.5 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 1.5 µL

オリゴ糖

PBr-13.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 150 mm		 検　出 ELSD
移動相 A; H2O
B; Acetonitrile
B conc. 2→10% 10 min Linear gradient		 サンプル

Fructooligosaccharides (50 mg/mL)

  1. 1-Kestose
  2. Nystose
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 0.5 µL

メラミン

PBr-14.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 250 mm		 検　出 UV 225 nm
移動相 20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 7.0) サンプル
  1. Ammelide (0.1 mg/mL)
  2. Cyanuric Acid (0.5 mg/mL)
  3. Ammeline (0.1 mg/mL)
  4. Melamine (0.1 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃ 注入量 1.0 µL

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連続分析

水 100% の移動相中で 1,000 回連続分析をしたところ、安定した分析結果が得られました。

PBr-4.png

分析条件
カラム COSMOSIL PBr
4.6 mm I.D. × 150 mm		 サンプル
  1. L-Noradrenaline (0.5 mg/mL)
  2. L-Adrenaline (0.5 mg/mL)
  3. Dopamine (0.5 mg/mL)
  4. L-DOPA (0.5 mg/mL)
移動相

20 mmol/L Phosphate Buffer(pH 2.5)
流　速 1.0 mL/min
温　度 40℃
検　出 UV 280 nm 注入量 1.0 µL

親水性化合物以外への適応

界面活性剤

コスモシール PBr は、C18 カラムや PFP カラムなどと分離特性が違うことから、分離が難しい化合物を分離することができます。

PBr-5.png

分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 150 mm 検　出 UV 254 nm
移動相

5C18-MS-II, 5PFP:Methanol / H2O = 80 / 20

5PBr:Methanol		 サンプル Triton® X-100 (50 mg/mL)
流　速 1.0 mL/min 注入量 2.0 µL
温　度 30℃

Triton® はユニオン・カーバイド・コーポレーションの登録商標です。

ハロゲン化合物

ハロゲン化合物に対し、コスモシール PBr は高い選択性を示しています。

PBr-6.png

分析条件
カラム
サイズ		 4.6 mm I.D. × 150mm サンプル
  1. Fluorobenzene (1.0 mg/mL)
  2. α,α,α-Trifluorotoluene〔Benzotrifluoride〕(0.25 mg/mL)
  3. Toluene (2.5 mg/mL)
  4. Chlorobenzene (5.0 mg/mL)
  5. Bromobenzene (5.0 mg/mL)
  6. Iodobenzene (2.0 mg/mL)
移動相

Methanol / H2O = 65 / 35
流　速 1.0 mL/min
温　度 30℃
検　出 UV 254 nm 注入量 1.0 µL

研究者の使用例など

価格表

分析・分取カラム（粒子径 5 µm）
COSMOSIL PBr

製品名サイズ製品番号価　格
COSMOSIL PBr Guard Column / Guard Cartridge 4.6 mm l.D. × 10 mm
Cartridge＊		 12444-14 22,000
10 mm l.D. × 20 mm 12396-41 53,000
20 mm l.D. × 20 mm 13256-41 115,000
28 mm l.D. × 50 mm 12653-61 ご照会
COSMOSIL PBr Packed Column 2.0 mm l.D. × 50 mm 12943-61 48,000
2.0 mm l.D. × 100 mm 13245-81 50,000
2.0 mm l.D. × 150 mm 12392-81 60,000
2.0 mm l.D. × 250 mm 13247-61 72,000
3.0 mm l.D. × 50 mm 12592-61 46,000
3.0 mm l.D. × 100 mm 13249-41 48,000
3.0 mm l.D. × 150 mm 13250-01 50,000
3.0 mm l.D. × 250 mm 13251-91 63,000
4.6 mm l.D. × 50 mm 13252-81 46,000
4.6 mm l.D. × 100 mm 12594-41 48,000
4.6 mm l.D. × 150 mm 12394-61 50,000
4.6 mm l.D. × 250 mm 12395-51 63,000
10 mm l.D. × 50 mm 13253-71 84,000
10 mm l.D. × 100 mm 13254-61 106,000
10 mm l.D. × 150 mm 13255-51 115,000
10 mm l.D. × 250 mm 12397-31 150,000
20 mm l.D. × 50 mm 13257-31 145,000
20 mm l.D. × 100 mm 13258-21 250,000
20 mm l.D. × 150 mm 13259-11 263,000
20 mm l.D. × 250 mm 12398-21 350,000
28 mm l.D. × 100 mm 13260-71 ご照会
28 mm l.D. × 150 mm 13261-61 ご照会
28 mm l.D. × 250 mm 13262-51 ご照会

＊ ガードカートリッジカラム（2 個入り）。使用には、内径 4.6 mm 用 ガードカートリッジホルダー（別売#38009-79）が必要です。

分析カラム（粒子径 3 µm）
COSMOSIL 3PBr

製品名サイズ製品番号価格

COSMOSIL 3PBr Guard Cartridge

 2.0 mm l.D. × 10 mm＊1 19359-34 22,000
4.6 mm l.D. × 10 mm＊2 19360-94 22,000
COSMOSIL 3PBr Packed Column 2.0 mm l.D. × 50 mm 19345-91 62,000
2.0 mm l.D. × 75 mm 19346-81 62,000
2.0 mm l.D. × 100 mm 19347-71 62,000
2.0 mm l.D. × 150 mm 19078-01 62,000
2.0 mm l.D. × 250 mm 19348-61 74,000
3.0 mm l.D. × 50 mm 19349-51 62,000
3.0 mm l.D. × 75 mm 19350-11 62,000
3.0 mm l.D. × 100 mm 19351-01 62,000
3.0 mm l.D. × 150 mm 19352-91 62,000
3.0 mm l.D. × 250 mm 19353-81 74,000
4.6 mm l.D. × 50 mm 19354-71 62,000
4.6 mm l.D. × 75 mm 19355-61 62,000
4.6 mm l.D. × 100 mm 19356-51 62,000
4.6 mm l.D. × 150 mm
 19357-41 62,000
4.6 mm l.D. × 250 mm
 19358-31 74,000

ガードカートリッジカラム（2 個入り）。使用には、＊1 は内径 2.0 mm 用 ガードカートリッジホルダー（別売 #11884-71）、＊2 は内径 4.6 mm 用 ガードカートリッジホルダー（別売#38009-79）が必要です。

上記以外のカラムサイズをご要望の際はお問合せください 。

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※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。
※掲載価格は 2019 年 9 月現在のものです（消費税は含まれていません）。