Molecular Targeting Technologies Inc. 社ホスファチジルセリン検出プローブ
PSVue® はbis(zinc2+dipicolylamine:Zn-DPA)を含む蛍光プローブです。Zn-DPAは陰イオン性リン脂質に高い親和性を示すことが知られており、細胞膜上のフォスファチジルセリン(PS)へ結合します。アポトーシス1、ネクローシス2、グラム陰性/陽性細菌3-5等の検出に使用することができます。。
特長
- UV~近赤外(検出波長)までラインアップ
- in vitroとin vivoに使用可能
- HTSスクリーニングへ適用可能
- アネキシンVのようにPSへ結合
アネキシンVに勝る点
- 結合が早い6,7
- カルシウムイオン非依存的に結合(膜のscramblaseによる影響が無い)8
- 広い範囲の条件(例:10%血清存在下、4~37℃)でアポトーシスを検出8
- 小さい(1つのアネキシンVが結合する範囲に10個以上結合する)9
PSVue®の構造
膜結合の模式図
生理条件下では、ほとんどのPSVueはZn2+イオン1分子が結合している(A)。PSVue®は陰イオンのPSへZn2+を介して結合し(B)、もう1分子のZn2+を更に結合させて膜へ結合していると考えられる(C)。
In vitroでの実施例
アネキシンVとPSVue®794での多重染色
Jurkat細胞をカンプトテシン10μMで3.5時間処理し、アネキシンV連結色素とPSVue®794両色素で染色した。A:明視野、B:アネキシンV連結色素、C:PSVue®794、D:重ね合わせ
(データ提供:Notre Dame大学 Dr. Bradley Smith)
In vivoでの実施例
前立腺癌モデルラットでの実施例
PSVue®794(4.0mg/kg)をインジェクションして24時間後に観察したところ、はっきりと癌組織に蓄積していた。
EMT-6移植ヌードマウスでの実施例
PSVue®794をインジェクションして24時間後に観察したところ、はっきりと癌組織に蓄積していた。
黄色ブドウ球菌感染マウスでの実施例
左後肢の大腿筋へ接種する前(A)、直後(PSVue®794インジェクション)(B)、6時間後(C)、12時間後(D)、18時間後(E)、21時間後(F)
データ提供:Notre Dame大学 Dr. Bradley Smith
参考文献
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- Smith BA, Akers WJ, Leevy WM, Lampkins AJ, Xiao S, Wolter W, Suckow MA, Achilefu S and Smith BD. Optical imaging of mammary and prostrate tumors in living animals using a synthetic near infrared zinc(II)-dipicolylamine probe for anionic cell surfaces. J. Am. Chem. Soc. 2010, 132 (1), 67-69.
- Leevy, WM; Johnson, JR.; Lakshmi, C.; Morris, J.; Marquez, M.; Smith, BD. Selective recognition of bacterial membranes by zinc(II)-coordination complexes. Chem. Commun. 2006, 595-1597.
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- Leevy WM, Gammon ST, Johnson JR, Johnson JR, Lampkins AJ, Jiang H, Marquez M, Piwinica-Worms D and Smith BD. Noninvasive optical imaging of Straphylococcus aureus bacterial infection in living mice using a bis-dipicolylamine-zinc (II) affinity group conjugated to a near infrared fluorophore. Bioconj. Chem. 2008, 19, 686-692
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- Koulov AV, Stucker KA, Lakshmi C, Robinson JP and Smith BD. Detection of apoptotic cells using a synthetic fluorescent sensor for membrane surfaces that contain phosphatidylserine. Cell Death and Differentiation, 2003, 10, 1357-1359
- Hanshaw RG and Smith BD. New reagents for phosphatidylserine recognition and detection of apoptosis. Bioorg. & Med. Chem. 2005, 13, 5035-5042
- Koulov AV, Hanshaw RG, Stucker KA, Lakshmi C and Smith BD. Biophysical studies of a synthetic mimic of the apoptosis-detecting protein annexin V. Israel. J of Chem., 2005, 45, 373-379.