Biotium社 CF™ Dyeラベリングキット
Biotium社が開発した高輝度・長寿命の次世代蛍光色素CF™ Dyeを用いたラベリングキットを紹介します。
製品使用文献
製品使用文献はこちらのページで閲覧できます。
https://www.nacalai.co.jp/information/literature/BiotiumCFDye.cfm
抗体ラベリングキット
Mix-n-Stain™ Antibody Labeling Kit
CF™ Dyeを用いた抗体用ラベリングキットで、操作が非常に簡便です。
特長
- ラベリング効率がほぼ100%で精製不要
- 混ぜて30分待つだけで使用可能
- 共有結合によるラベリングで多重染色に有利
製品概要
使用例
Mix-n-Stain™ CF™ 633 Antibody Labeling Kitで標識した抗β-tubulin IgM (赤)、CF™ 488A phalloidin (緑)、DAPI (青)を用いてHeLa細胞を染色した。Zeiss 510共焦点顕微鏡を用いてデータを取得した。
安定剤の影響
NaN3 | ○ |
BSA | < 抗体の4倍の質量 |
ゼラチン | < 抗体の4倍の質量 |
グリセロール | < 10% |
Tris | < 20mM |
1) 反応させる抗体保存液中の含有物質が表記濃度を超える場合は精製して除いてください。
安定剤は無いほうが好ましく、許容濃度以下であってもバックグラウンドが高くなることがあります。
Q & A
Q1 | 色素と抗体の結合様式はなんですか? |
---|---|
A1 | 共有結合です。そのため、複数種類のMix-n-Stain™キットを用いて多重染色しても、意図しない抗体と色素の連結は生じません。 |
Q2 | 抗体のどの部位をラベリングするのですか? |
A2 | 抗原結合部位から離れたアミノ酸を標識します。そのため、抗体の力価に影響を与えることはありません。なお、標識の具体的な原理は開示されていません。 |
Q3 | 標識後の抗体はどれくらいの期間安定ですか? |
A3 | 4℃で添付の保存液を使用して保存した場合、最低3ヶ月間安定です。 |
Q4 | 抗体以外のタンパク質を標識することはできますか? |
A4 | Mix-n-Stain™キットはIgGのラベリング用に最適化されています。抗体以外のタンパク質を本キットでラベリングできるか否かは不明です。なお、本キットのラベリング条件ではIgMを変性させる恐れがあります。 |
Q5 | 腹水、血清、ハイブリドーマ培養上清でも使用することができますか? |
A5 | 精製することをお薦めします。 |
Q6 | 50μgの抗体をラベリングしたい場合は(20-50μg) と(50-100μg) どちらの容量を使用するべきですか? |
A6 | どちらでも問題ありませんが、 (20-50μg)をお薦めします。 |
Q7 | キットは数回に分けて使用できますか? |
A7 | 本製品は1ラベリング用に最適化されており、分割しての使用はお奨めできません。 |
Q8 | 使用する抗体濃度は? |
A8 | 抗体の濃度は0.5-1.0mg/mlに合わせてください。それよりも薄い場合は限外ろ過で濃縮、濃い場合は1×PBSで希釈してください。 |
キット構成
- CF™ Dye
- Mix-n-Stain™ reaction buffer, 10×
- Mix-n-Stain™ antibody storage buffer
- Ultrafiltration vial
価格表
タンパク質ラベリングキット
SE Protein Labeling Kit
タンパク質のアミノ基と反応するCF™ Dyeのスクシンイミジルエステル(SE)誘導体にバッファーや精製カラム等が一緒になったキットです。
キット構成
- CF™-Dye SE
- DMSO, anhydrous
- Sodium bicarbonate solution
- 1×PBS
- Ultrafiltration vial
- Reaction vial
- Storage vial
価格表
抗体ラベリングキット
VivoBrite™ Rapid Antibody Labeling Kit
in vivoイメージング用として、SE Protein Labeling Kitに滅菌用シリンジ・フィルターをセットしたキットです。
キット構成
- CF™-Dye SE
- DMSO, anhydrous
- Sodium bicarbonate solution
- 1×PBS
- Ultrafiltration vial
- Reaction vial
- Storage vial
- Syringe
- Syringe filter
価格表
関連製品
EverBrite™ Mounting Medium
本製品は蛍光(可視光や近赤外を含む全て)退色を防止するmounting mediumで、シアニン色素(Cy™2、Cy™5、Alexa Fluor®647、Dylight™649など)の蛍光退色も効果的に防止します。また、お好みに合わせて核の対比染色操作が不要なDAPI含有品も用意しています。カバーグラスの端をマニュキュアでシーリングした後すぐに観察することができ、封入後4℃で数週間から数ヶ月の保存が可能です。
特長
- 広範囲の蛍光色素の退色を防止
- 封入後すぐに観察可能
- 封入後4℃で保存可能
Cy™5に対する退色耐性
Cy™5の検出には適さないA社製品とは異なり、本製品はFITCに対する退色耐性と同程度の性能を示しました。なおA社製品のデータは、ほとんど蛍光が検出されていないことを示すために補正されていません。
FITCに対する退色耐性
本製品はA社製品と同程度の退色耐性を示しました。
価格表
※記載の内容は、'15年6月現在の情報に基づいております。