K63ポリユビキチン鎖を特異的に検出
LifeSensors社 Biotin-K63 TUBE 1
ユビキチン研究試薬に特化したメーカーのLifeSensors社より新製品Biotin-K63 TUBE（Tandem Ubiquitin Binding Entity）1が発売されましたのでご紹介します。本製品はK63ポリユビキチン鎖を特異的に高感度に検出する試薬で、Sims氏の発表したペプチド*1を基に開発されました。Far-ウェスタンや、精製、in situ検出等にご利用ください。
*1Sims, J.J. et al. Polyubiquitin-sensor proteins reveal localization and linkage-type dependence of cellular ubiquitin signaling. Nat Methods. 5;9(3):303-9 (2012).
特長
- 特異性が高い
- 感度が高い
他社抗体との比較
K48ポリユビキチンとK63ポリユビキチンの検出について、本品（Far-ウェスタン）と他社の抗K63ポリユビキチンモノクローナル抗体（ウェスタン）と比較しました。本品およびC社品がK63ポリユビキチン鎖を強く検出しました。
本品（Far-ウェスタン）とC社品（ウェスタン）について、K11ポリユビキチン鎖も加えて検出をしたところ、本品はK63ポリユビキチン鎖に対する特異性が高いことが示されました。
プロトコール
Biotin-K63 TUBE1を用いたFar-ウェスタン
- 細胞抽出液の準備
- 各レーン30-50μgのタンパク質量でSDS-PAGE
- 膜へ転写、膜のブロッキング
- TBS-T（1% BSA）で1000倍希釈したBiotin-K63 TUBE1と室温1時間でインキュベーション
- TBS-Tで10分洗浄（3回）
- avidin-HRP等を用いた検出
本プロトコールは推奨プロトコールです。サンプルのK63ポリユビキチン鎖、K63ポリユビキチン化タンパク質の量や、検出試薬等によって条件を検討してください。また、転写膜は熱等の変性処理はしないでください。
関連製品
| Tag/ Conjugate | 製品名 | 貯法 | メーカー 製品番号 | 容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|---|---|
| GST | GST-TUBE 1 | -80℃ | UM101 | 200μg （5 mg/ml） |
 |
| GST-TUBE 2 | -80℃ | UM102 | 200μg （5 mg/ml） |
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|
| His6 | His6-TUBE 1 | -80℃ | UM201 | 200μg （5 mg/ml） |
|
| His6-TUBE 2 | -80℃ | UM202 | 200μg （5 mg/ml） |
|
|
| His6-TUBE 3 | -80℃ | UM203 | 200μg （5 mg/ml） |
|
|
| Biotin | Biotin-TUBE 1 | -80℃ | UM301 | 200μg （5 mg/ml） |
|
| Biotin-TUBE 2 | -80℃ | UM302 | 200μg （5 mg/ml） |
|
|
| Agarose | Agarose-TUBE 1 | -20℃ | UM401 | 1 ml （50%スラリー） |
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| Agarose-TUBE 2 | -20℃ | UM402 | 1 ml （50%スラリー） |
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本製品Biotin-K63 TUBE 1の「TUBE1」と上記関連製品の各TUBE1は別物です。
価格表
| 製品名 | 貯法 | メーカー製品番号 | 容量 | オンライン カタログへ |
|---|---|---|---|---|
| Biotin-K63 TUBE 1 | -80℃ | UM304 | 50μg （0.5 mg/ml） |
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