ヒトiPS細胞（414C2株）の凍結保存

データご提供：京都府立医科大学大学院 医学研究科佐藤 貴彦 助教

 

実験概要

凍結保存後の生存率が低いとされる、iPS細胞をCell Reservoir One（ガラス化法用）で凍結保存を行い、性能を検証した。

 

実験方法

＜使用した細胞凍結保存液＞
①A社　ガラス化法用凍結保存液 +Y-27632
②弊社　Cell Reservoir One（ガラス化法用）+Y-27632
③B社　緩慢法凍結保存液
④B社　緩慢法凍結保存液+ Y-27632
⑤弊社　緩慢法凍結保存液
⑥弊社　緩慢法凍結保存液+ Y-27632

＜使用したヒトiPS細胞株＞
414C2株（エピソーマルベクターにより樹立したヒトiPS細胞株）

＜保存期間＞
2ヶ月間液体窒素による気相保存

＜コロニー数評価＞
6ウェルプレートにそれぞれの保存液で保存したヒトiPS細胞を起こして、ヒトiPS細胞培養条件（ReproCell社ヒトES細胞用培地を使用、始めの48時間はY-27632添加し、その後Y-27632無添加）にて1週間培養を行った。その後、アルカリホスファターゼ染色（StemGent社キット）にて、コロニー数により評価した。

 

 

実験結果

 

使用した保存液	保存法	コロニー数
①	ガラス化法用	278個
②		269個
③	緩慢凍結法	38個
④		71個
⑤		15個
⑥		26個

 

使用者の評価

Cell Reservoir One（ガラス化法用）は、生存率が緩慢凍結法と比べると高いことから、ヒトiPS細胞の保存に適している。また、A社製品と比べると保存液の粘度が低いため、扱いやすいと感じた。

 

 

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※記載の内容は、'15年4月現在の情報に基づいております。