ナカライテスク株式会社

モノクローナル標識 Tag 抗体

Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(MC045), AS, Agarose Conjugate

c-Myc タグに対するマウスモノクローナル抗体です。アガロース標識されており、免疫沈降に利用可能です。

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製品説明

製品説明

Clone MC045
Isotype IgG1-κ (Mouse)
Size 500 μg
Antibody Protein ca. 2 mg antibody/mL agarose
Product form 1 : 1 suspension in Dulbecco's PBS(-)

c-Myc tagged Protein との反応

  1. 均一に懸濁させた Anti-c-Myc-Agarose(#04145-55)0.05 mL をフタ付きポリプロピレン容器(0.5 mL)に分注し、Rinse buffer 0.4 mL、および c-Myc tagged protein(1 mg/mL)1 μL を添加して静かに転倒攪拌する(室温 2 時間)。
  2. 遠心分離(10 秒間)で樹脂を沈殿させた後、Rinse buffer を分注器で吸引除去する。さらに、新たな Rinse buffer 0.4 mL を加えて転倒攪拌(10 秒間)して遠心分離する。(5 回繰り返し)
  3. Rinse buffer を濾紙片で十分に吸引除去した Agarose 樹脂、未使用の同 Agarose 樹脂、およびフタ付きポリプロピレン容器(0.5 mL)に分注した c-Myc tagged protein(1 mg/mL)1 μL、の各々に SDS-PAGE 電気泳動緩衝液(+2ME)0.05 mL を添加して煮沸水浴で加熱(5 分間)する。
  4. 水冷後に遠心分離(10 秒間)して、各上清 1 μL を SDS-PAGE(10%)で電気泳動する。

*Rinse buffer : 50mM Tris-HCl pH7.5, 150mM NaCl, 1%(v/v)NP-40, 10mM EDTA, 1mM PMSF, 10μM pepstatin, 20μM leupeptin

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<実験条件>
SDS-PAGE(10%) : 30mA constant 60 分
サンプル : ① M.W. Marker
② Anti-c-Myc-Agarose + c-Myc tagged protein
③ Anti-c-Myc-Agarose
④ c-Myc tagged protein

Anti-c-Myc-Agarose(左図 ③)に c-Myc tagged protein(左図 ④)を反応させた結果、c-Myc tagged protein は Agarose 樹脂に結合しました(左図 ②)。

非特異吸着の確認

c-Myc tagged Protein との反応と同様の手順で c-Myc tagged protein(1 mg/mL)を bacterial lysate 1 μL に変えて操作しました。

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<実験条件>
SDS-PAGE(10%) : 30mA constant, 60 分
サンプル : ① M.W. Marker
② Anti-bacterial lysate
③ Anti-c-Myc-Agarose + bacterial lysate

不特定多数のタンパク質を含有する bacterial lysate を Anti-c-Myc-Agarose に反応させても、非特異的なタンパク質の樹脂吸着はほとんどおこっていません。

顧客使用例

免疫沈降

c-Myc タグを挿入したプラスミドを細胞にトランスフェクションしました。その後、本製品を用いて細胞溶解液を免疫沈降し、ウェスタンブロッティングでの検出を行いました。

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<実験条件>
免疫沈降 : Anti-c-Myc, agarose conjugate(1 : 500)
ウェスタンブロッティング : Anti-c-Myc(#04362)
本データは国立大学 研究者様よりご提供いただきました。

関連資料

価格表

製品名 規格 貯法 製品番号 容量 オンライン
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Anti-c-Myc(Mouse IgG1-κ), Monoclonal(MC045), AS, Agarose Conjugate BC 冷蔵 04145-55 500 μg e-Nacalai.jpg

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