SDS-PAGE ~ CBB 染色 / ウェスタンブロッティング 高速化試薬 Bullet シリーズ
Bullet シリーズは SDS-PAGE から CBB 染色もしくはウェスタンブロッティングを高速化する試薬です。
シリーズすべてを使用することにより、CBB 染色が約 30 分、ウェスタンブロッティングが約 2 時間で完了できます。
製品紹介動画
特長
- Fast(速い)
SDS-PAGE:約 10 分、CBB 染色:15 分、転写:10 分、ブロッキング:5 分、抗体反応:約半分へ短縮 - Precise(正確)
バンドのゆがみもなく、感度も従来と同等に検出可能 - Flexible(柔軟)
一部の工程のみでも高速化可能
Bullet シリーズはすべて ready to use です。調製の手間やミスを減らすことができ、高い再現性を実現します。
ラインアップ
Bullet シリーズを使用することにより、CBB 染色が約 30 分、ウェスタンブロッティングが約 2 時間で完了できます。また、Bullet PAGE One のみ使用して SDS-PAGE を約 10 分、Bullet Blocking One のみ使用してブロッキングを 5 分に短縮するといった、一部の工程のみの高速化も可能です。
SDS-PAGE | ||
約 10 分 | ||
↓ | ↓ | |
CBB 染色 | 転写 | |
15 分 | 10 分 | |
↓ | ↓ | |
Total 約 30 分 | ブロッキング | |
5 分 | ||
↓ | ||
抗原抗体反応 | ||
約半分へ短縮 | ||
↓ | ||
化学発光検出 | ||
Chemi-Lumi One シリーズ |
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↓ | ||
Total 約 2 時間 |
SDS-PAGE ~ CBB 染色
Bullet PAGE One と Bullet CBB Stain One を組み合わせることで、電気泳動から染色までを約 30 分で行うことができます。 Bullet PAGE One のみ、Bullet CBB Stain One のみ使用して SDS-PAGE を約 10 分、CBB 染色を 15 分に短縮するといった、一部の工程のみの高速化も可能です。
Bullet シリーズ | 従来手法 | ||
---|---|---|---|
組み合わせ |
|
||
電気泳動 | 約 10 分(400 V) | 約 1 時間(200 V) | |
CBB 染色 | 前操作 | 必要なし | 約 15 分 |
染色 | 15 分 | 30 ~ 60 分 | |
脱色 | 必要なし | 1 時間以上 | |
計 | 約 30 分 | 約 3 時間 |
<注意事項>
・装置・泳動の準備、サンプル添加、泳動ゲルの取り出しに要する時間などは含めていません。
・従来手法は一例であり、各工程に要する時間は実験方法によって変わります。
実施例
17 ウェルタイプの Bullet PAGE One Precast Gel を用いると、サンプル 16 検体が約 30 分で分析できます。(ゲル 2 枚使用時は、32 検体が分析可能)
実験条件 | ||||
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泳動ゲル | Bullet PAGE One Precast Gel, 5-15%, 17wells(#13080-44) | |||
サンプル | ①タンパク質マーカー(10x)(#29458-24)を 1/10 に希釈後、3 µL/ウェル添加 ② ~ ⑰大腸菌由来タンパク質を以下の容量で各ウェルに添加 ②⑥⑩⑭ 1 µL、③⑦⑪⑮ 2 µL、④⑧⑫⑯ 3 µL、⑤⑨⑬⑰ 4 µL を添加 |
|||
染色 |
Bullet CBB Stain One 20 mL 中で 15 分染色 ※染色像は染色中の容器内で確認可能 |
SDS-PAGE ~ ウェスタンブロッティング
Bullet PAGE シリーズをすべてを組み合わせることで、電気泳動からウェスタンブロッティングまでを約 2 時間で行うことができます。Bullet PAGE One のみ、Bullet Blocking One のみ使用して、SDS-PAGE を約 10 分、ブロッキングを 5 分に短縮するといった、一部の工程のみの高速化も可能です。
Bullet シリーズ | 従来手法 | ||
---|---|---|---|
組み合わせ |
|
||
電気泳動 | 約 10 分(400 V) | 約 1 時間(200 V) | |
転写 | 10 分(25 V) | 約 45 分(10 V) | |
ブロッキング | 5 分 | 約 1 時間 | |
抗体反応 | 従来手法の半分 | 1 時間 ~ 一晩 | |
検出 | 約 10 分 | ||
計 | 約 2 時間 | 約 5 時間 30 分 ~ |
<注意事項>
・装置・泳動の準備、サンプル添加に要する時間などは含めていません。
・従来手法は一例であり、各工程に要する時間は実験方法によって変わります。
実施例
Bullet シリーズを用いることで、わずか 2 時間で従来手法と同等の結果を得ることができます。
Bullet シリーズ | 従来手法 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
ブロッ ティング像 |
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||||
サンプル | HeLa 細胞タンパク質抽出液 5 µg より 2 倍希釈系列 | |||||
電気泳動 |
Bullet PAGE One Precast Gel, |
400 V | 10 分 |
Laemmli 法組成ゲル |
200 V | 60 分 |
転写 |
Bullet Semi-dry Transfer One |
25 V | 10 分 | セミドライウェスタンブロッティング用転写緩衝液 | 10 V | 45 分 |
ブロッキング |
Bullet Blocking One |
5 分 | 5% スキムミルク | 60分 | ||
一次抗体*1 |
Bullet ImmunoReaction Buffer で抗体を希釈 |
30 分 | 0.1%-tTBS で抗体を希釈 | 60 分 | ||
二次抗体*2 |
Bullet ImmunoReaction Buffer |
30 分 | 0.1%-tTBS で抗体を希釈 | 60 分 | ||
検出 |
Chemi-Lumi One Super / LAS-3000(High モード) 露光時間 5 分 | |||||
計(洗浄時間を含む) |
約 2 時間 | 約 5 時間 30 分 |
*1 一次抗体:GAPDH Antibody(Novus #NB300-322)10,000 倍希釈
*2 二次抗体:Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP] (Pre-adsorbed)(Novus #NB7187)200,000 倍希釈