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科思美析 Cholester

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  • 胆甾醇基固定相
  • 使用条件与C18柱相同
  • 提高了立体选择性和几何异构体的分离度
  • 适用于天然物的分离

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产品信息

疏水相互作用

下图为Cholester与C18柱的疏水相互作用的比较结果。结果显示Cholester与C18柱具有相同的疏水性。因此使用Cholester代替C18柱或C30柱时,不需要改变分析条件。

Chromatogram

分析条件
流动相 Methanol/H2O = 80/20 样品
  1. Benzene (1.67μg)
  2. Toluene (1.67μg)
  3. Ethylbenzene (1.67μg)
  4. n-Propylbenzene (1.67μg)
  5. n-Butylbenzene (1.67μg)
  6. Amylbenzene (1.67μg)
流速 1.0ml/min
温度 30°C
检测器 UV 254 nm

立体选择性

Cholester的固定相具有刚性的结构并且能够区别分子形状的不同。对于烷基键合填料(C18和C30)难以分离的结构相似的化合物,Cholester可以实现很好的分离。如下例所示,Cholester保留平面苯并菲的时间长于立体邻三联苯。

表. 立体选择性的比较

Comparison_of_molecular_charp_selectivity

kouzou

Molecular_shape_selectivity_data

分析条件
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 150 mm
流动相 Methanol : Water = 90 : 10
流速 1.0 ml/min
温度 30 °C
检测器 UV 254 nm
样品 1. o-Terphenyl 0.10 µg
2. Triphenylene 0.01 µg

分离性能的改进

与传统的C18柱相比,Cholester具有更强的选择性和分离同分异构体或结构类似物的能力,它可以极好的代替传统C18色谱柱。下图是氯代苯乙酮异构体的分析结果。结果显示,使用C18柱和C30柱很难分离的氯代苯乙酮异构体,使用Cholester时得到了很好的结果。

Improvement-in-separation

更高的制备效率

下图是Cholester与C18柱的制备分离性能比较的结果。两种色谱柱都得到了良好的分离结果。然而,分离性能的微小差异会影响制备柱的样品承载量,Cholester可以负荷的样品承载量是C18柱的4倍。

Efficiency-of-preparative-s

分析条件
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 150 mm 检测器 UV 254 nm
流动相 Methanol : Water = 100 : 0 样品
  1. Bibenzyl
  2. Anthracene
流速 1.0ml/min
温度 30°C

应用数据

儿茶素 (Catechins)

分析条件
柱尺寸 4. 6mm I.D. x 150 mm 样品
  1. (-)‐Gallocatechin [(-)‐GC](0.80mg/ml)
  2. Caffeine (0.08mg/ml)
  3. (-)‐Epigallocatechin [(-)‐EGC](0.80mg/ml)
  4. (-)‐Catechin [(-)‐C](0.40mg/ml)
  5. (-)‐Epicatechin [(-)‐EC](0.40mg/ml)
  6. (-)‐Epigallocatechin Gallate [(-)‐EGCg](0 20mg/ml)
  7. (-)‐Gallocatechin Gallate [(-)‐GCg](0.40mg/ml)
  8. (-)‐Epicatechin Gallate [(-)‐ECg](0.20mg/ml)
  9. (-)‐Catechin Gallate [(-)‐Cg](0.20mg/ml)

Injection Vol. 1.0μl

流动相 A: Acetonitrile/ 20mmol/l Phosphate buffer(pH2.5) = 10/90
B: Acetonitrile/ 20mmol/l Phosphate buffer(pH2 5) = 30/70
B conc. 0→100% 20min Linear gradient
流速 1.0 ml/min
温度 30°C
检测器 UV280nm

黄酮 (Flavones)

分析条件
柱尺寸 4. 6mm I.D. x 150 mm 样品
  1. Fisetin (0.25μg)
  2. Myricetin (0.20μg)
  3. 7,8-Dihydroxyflavone (0.05μg)
  4. Luteolin (0 20μg)
  5. Quercetin (0.20μg)
  6. 7-Hydroxyflavone (0.10μg)
  7. Baicalein (0.05μg)
  8. 6-Hydroxyflavone (0.05μg)
  9. Flavone (0.05μg)
  10. Chrysin (0.05μg)
  11. 6-Methoxyflavone (0.05μg)
  12. 3-Hydroxyflavone (0.25μg)
  13. 5-Hydroxyflavone (0.05μg)
流动相 A: Acetonitrile/ 20mmol/l Phosphate buffer(pH2 5) = 20/80
B: Acetonitrile/ 20mmol/l Phosphate buffer(pH2.5) = 70/30
B conc. 0→100% 20min Linear gradient
流速 1.0 ml/min
温度 30°C
检测器 UV280nm

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使用信息

色谱柱 5μm Cholester
内径(mm) 2.0 3.0 4.6 10 20 28
柱长(mm) ALL ALL ALL 20-150 250 20-100 150-250 ALL
出厂溶剂 乙腈 / 水 = 60 / 40 甲醇 / 水 = 70 / 30 甲醇 / 水 = 80/ 20 甲醇 / 水 = 70 / 30 甲醇 / 水 = 80/ 20
冲洗方法
  1. 去除色谱柱内的缓冲液,盐,酸的方法:使用不含缓冲液,盐,酸的流动相冲洗10-15分钟。
    例:流动相为甲醇/磷酸缓冲液(20mmol/L) =50/50时,就使用甲醇/水 =50/50冲洗
  2. 冲洗色谱柱内附着物的方法,基线不稳时的解决方法
  • 样本不是蛋白质时,使用甲醇或四氢呋喃冲洗。
  • 样品是蛋白质时,使用含0.1%三氟乙酸的50-70%的乙腈/水冲洗

保存方法
  1. 短期(数日)保存:
    使用不含缓冲液,盐,酸的流动相冲洗10-15分钟。保存。
    例:流动相为甲醇/磷酸缓冲液(20mmol/L) =50/50时,就使用甲醇/水 =50/50冲洗
  2. 长期(1个月以上)保存:
    使用后,先用不含酸和盐的流动相清洗色谱柱,再将流动相置换为乙腈/水=70/30或 甲醇/水=70/30,保存。

pH范围 pH2~pH7.5
最大耐压 20MPa 15MPa
温度范围 最高可耐60度,建议在20~50度下进行分析。
可使用的溶剂

除碱溶液和强酸溶液(pH1.5以下)以外都可以使用。(强碱溶液会使硅胶溶化,强酸溶液会使固定相脱落)
注意点:
溶剂粘度过高会导致压力上升,请将压力控制在20Mpa以下。 使用酸性流动相或凝固点高的溶剂后,必须清洗色谱柱。

注意事项
  • 一般情况下缓冲液浓度为0.005~0.02 mol/L即可。
  • 流动相在使用前一定要通过0.5μm以下的滤膜过滤。
  • 蛋白质反相模式分析时,请使用大孔径色谱柱(孔隙直径300Å) COSMOSIL Protein - R(粒径5μm)。
色谱柱 2.5μm Cholester
内径(mm) 2.0 3.0
柱长(mm) ALL ALL
出厂溶剂 乙腈 / 水 = 50 / 50
冲洗方法
  1. 去除色谱柱内的缓冲液,盐,酸的方法:使用不含缓冲液,盐,酸的流动相冲洗10-15分钟。
    例:流动相为甲醇/磷酸缓冲液(20mmol/L) =50/50时,就使用甲醇/水 =50/50冲洗
  2. 冲洗色谱柱内附着物的方法,基线不稳时的解决方法
  • 样本不是蛋白质时,使用甲醇或四氢呋喃冲洗。
  • 样品是蛋白质时,使用含0.1%三氟乙酸的50-70%的乙腈/水冲洗

保存方法
  1. 短期(数日)保存:
    使用不含缓冲液,盐,酸的流动相冲洗10-15分钟。保存。
    例:流动相为甲醇/磷酸缓冲液(20mmol/L) =50/50时,就使用甲醇/水 =50/50冲洗
  2. 长期(1个月以上)保存:
    使用后,先用不含酸和盐的流动相清洗色谱柱,再将流动相置换为乙腈/水=70/30或 甲醇/水=70/30,保存。

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产品手册

  • 科思美析 (COSMOSIL) Cholester pdf (1.2 MB)
  • 科思美析 (COSMOSIL) 2.5Cholester pdf (1.2 MB)
  • Analysis of Natural Compounds by 2.5Cholesterpdf (390 KB)

使用说明书

科思美析 (COSMOSIL) 高效液相色谱柱使用说明书pdf (166 KB)

订购信息

分析柱 (粒径 : 5 µm)
科思美析 (COSMOSIL) Cholester

产品名称 柱尺寸 货号 价格
科思美析 Cholester 保护柱
4.6 mm I.D. x 10 mm 05975-71 e-Nacalai
10 mm I.D. x 20 mm 05978-41
20 mm I.D. x 20 mm 05980-91
20 mm I.D. x 50 mm 05981-81
28 mm I.D. x 50 mm 05983-61
科思美析 Cholester
1.0 mm I.D. x 150 mm 05968-71 e-Nacalai
1.0 mm I.D. x 250 mm 05969-61
2.0 mm I.D. x 150 mm 05971-11
2.0 mm I.D. x 250 mm 05972-01
3.0 mm I.D. x 150 mm 05973-91
3.0 mm I.D. x 250 mm 05974-81
4.6 mm I.D. x 50 mm 06359-21
4.6 mm I.D. x 100 mm 06591-61
4.6 mm I.D. x 150 mm 05976-61
4.6 mm I.D. x 250 mm 05977-51
10 mm I.D. x 150 mm 08011-91
10 mm I.D. x 250 mm 05979-31
20 mm I.D. x 150 mm 06088-71
20 mm I.D. x 250 mm 05982-71
28 mm I.D. x 250 mm 05985-41

超高速液相色谱柱 (粒径 : 2.5 µm)
科思美析 (COSMOSIL) 2.5Cholester

产品名称 柱尺寸 货号 价格
科思美析 2.5Cholester
2.0 mm l.D. x 50 mm 09000-01 e-Nacalai
2.0 mm l.D. x 75 mm 09047-11
2.0 mm l.D. x 100 mm 09048-01
3.0 mm l.D. x 50 mm 09049-91
3.0 mm l.D. x 75 mm 09050-51
3.0 mm l.D. x 100 mm 09051-41

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