ナカライテスク株式会社

高速電気泳動用プレキャストゲル

Bullet PAGE Plus Precast Gel

  • 電気泳動

Bullet PAGE Plus は、高速電気泳動用のプレキャストゲルです。約 10 分という高速で電気泳動が完了できるにもかかわらず、Laemmli 法の泳動用緩衝液および試料緩衝液を使用でき、シャープなバンドが得られます。また、豊富なゲル濃度をラインアップしています。

特長
  • 泳動時間は約 10 分(400 V 定電圧で泳動した場合)
  • 豊富なゲル濃度をラインアップ
  • 従来法(Laemmli 法)の泳動用緩衝液、試料緩衝液を使用可能
  • 界面活性剤不含のため核酸の分析などにも使用可能

*核酸の泳動用緩衝液には、25 mM Tris、192 mM Glycine 緩衝液を使用してください。

製品説明

分離能の比較

本製品は、約 10 分という短時間の泳動にもかかわらず、従来品に近い分離能およびバンドのシャープさを示しています。

製品名 Bullet PAGE Plus Extra PAGE One A 社 B 社
ゲル濃度 5-20% 5-20% 4-20% 4-12%
製品番号 21794-54 13064-64
泳動時間 約 10 分 約 35 分 約 30 分 約 50 分
泳動像 bunrihikaku_Bullet.png bunrihikaku_Extra.png bunrihikaku_A.png bunrihikaku_B.png
<実験条件>
サンプル : タンパク質マーカー(10 倍濃縮)(#29458-24)を 1 × になるように調製し、3 μL 添加
染色 : CBB Stain One(Ready To Use)(#04543)
泳動条件 : 各製品の推奨条件に準じています。(Bullet PAGE Plus 400 V 定電圧、Extra PAGE One 300 V 定電圧)

製品仕様

プレート W100 mm × H80 mm × T3.2 mm(ガラス製)
ゲルサイズ W80 mm × H60 mm × T1.0 mm
ウェル数(ウェル容量) 13 ウェル(40 µL)、17 ウェル(28 µL)

<注意事項>

  • W100 mm × H80 mm × T3.2 mm のサイズのプレートが使用可能な泳動装置をご使用ください。
    推奨機種 : WEP-MN バーティカル高速電気泳動槽(ジェレックスインターナショナル #WEP-MN)
  • 使用前に電気泳動装置への適合性(プレートサイズなど)とパワーサプライの性能(出力範囲など)をご確認ください。

ラインアップ

以下の種類のグラジエントゲルと均一ゲルを用意しています。

ゲル グラジエントゲル
ゲル濃度 5-10% 5-15% 5-20% 7.5-15% 10-20%
製品番号  13 ウェル 21789-34 21791-84 21793-64 21795-44 21797-24
17 ウェル 21790-94 21792-74 21794-54 21796-34 21798-14

タンパク質の泳動像
(SDS-PAGE)

lineup_gradient_SDS-PAGE_5-10.png lineup_gradient_SDS-PAGE_5-15.png lineup_gradient_SDS-PAGE_5-20.png lineup_gradient_SDS-PAGE_7.5-15.png lineup_gradient_SDS-PAGE_10-20.png
核酸の泳動像(PAGE) lineup_gradient_PAGE_5-10.png lineup_gradient_PAGE_5-15.png lineup_gradient_PAGE_5-20.png lineup_gradient_PAGE_7.5-15.png lineup_gradient_PAGE_10-20.png

 

ゲル 均一ゲル
ゲル濃度 7.5% 10% 12.5% 15%
製品番号  13 ウェル 21799-04 21801-44 21807-84 21853-74
17 ウェル 21800-54 21806-94 21811-14 21854-64

タンパク質の泳動像
(SDS-PAGE)

lineup_uniform_SDS-PAGE_7.5.png lineup_uniform_SDS-PAGE_10.png lineup_uniform_SDS-PAGE_12.5.png lineup_uniform_SDS-PAGE_15.png
核酸の泳動像(PAGE) lineup_uniform_PAGE_7.5.png lineup_uniform_PAGE_10.png lineup_uniform_PAGE_12.5.png lineup_uniform_PAGE_15.png
<タンパク質 実験条件>
サンプル : タンパク質マーカー(10倍濃縮)(#29458-24)1 × に調製し、3 μL 添加
泳動緩衝液 : 泳動用緩衝液(10倍濃縮, SDS-PAGE用, トリス-グリシン系)(#30329) 
泳動条件 : 400 V(定電圧)、約 10 分
染色 : CBB Stain One(Ready To Use)(#04543)

 

<核酸 実験条件>
サンプル :

 
① 100bp DNA Ladder One(Ready To Use)(#07908-75)2 μL 添加
② 20bp DNA Ladder(タカラバイオ #3409A)2 μL 添加 (取扱説明書の使用例に従って、6XLoading Buffer と混合)
③ siRNA Ladder Marker(タカラバイオ #3430)2 μL 添加 (取扱説明書の使用例に従って、6XLoading Buffer と混合)
泳動緩衝液 : 泳動用緩衝液(10倍濃縮)(#30340-91)
<注意事項> 泳動緩衝液には、25 mM Tris、192 mM Glycine緩衝液を使用してください。
泳動条件 : 400 V(定電圧)、約 12 分
染色 : Dual Green Nucleic Acid Stain(#20599)

使用方法

パワーサプライの電圧が最大 300 V の機種をお使いの場合は、以下の泳動時間を参考にしてください。泳動時間は試料緩衝液中の BPB がゲル下端の 5 mm 上まで泳動される時間です。泳動用緩衝液の温度やゲル濃度などによって、泳動時間は若干変わります。

電圧 泳動時間
タンパク質の分析(SDS-PAGE) 核酸の分析(PAGE)
400 V 約 10 分 約 12 分
300 V 約 16 分 約 18 分

タンパク質の分析(SDS-PAGE)には、25 mM Tris、192 mM Glycine、0.1% SDS 緩衝液をご使用ください。核酸の分析(PAGE)には、25 mM Tris、192 mM Glycine 緩衝液をご使用ください。サンプルの添加量は、ウェル容量の半量(13 ウェルは 20 μL、17 ウェルは 14 μL)以下を推奨します。

製品使用例

転写確認 : 転写効率の比較

本製品または A 社製品を用いて電気泳動後、PVDF メンブレンに転写しました。転写後のメンブレンを CBB 染色し、転写確認を行いました。本製品は、A 社製品と同等の転写効率を示しました。

ゲル Bullet PAGE Plus
5-20%
A 社
4-20%
転写後染色像 tensyahikaku_Bullet.png tensyahikaku_A.png
<実験条件>
サンプル : ① Protein Ladder One Plus, Triple-color for SDS-PAGE(#19593-25)
② ~ ④ タンパク質マーカー(10倍濃縮)(#29458-24)を ② 3 ×、③ 1 ×、④ 1/3 × になるように調製し、 各 2 μL 添加
転写 : Bullet Semi-dry Transfer One(#15353-01)25 V、10 分
染色 : CBB Stain One(Ready To Use)(#04543)により PVDF メンブレンを染色

ウェスタンブロッティング : サイズの異なるタンパク質の検出

本製品を用いて電気泳動後、ウェスタンブロッティングにより、サイズの異なる 3 種類のタンパク質を検出しました。低分子(Histone H3)から高分子(EGFR)まで、幅広い分子量のタンパク質を検出でき、本製品はウェスタンブロッティングにも適用可能であることが示されました。

検出タンパク質 EGFR(175 kDa) β-Actin(42 kDa) Histone H3(17 kDa)
ブロッティング像 d004034_jissirei_175.png d004034_jissirei_42.png d004034_jissirei_17.png
<実験条件>
サンプル : HeLa 細胞懸濁液(10 μg から 2 倍希釈系列)
SDS-PAGE : Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-20%, 17wells(#21794-54)400 V
転写 : Bullet Semi-dry Transfer One(#15353-01)25 V 10 分 PVDF(ポアサイズ; 0.45 μm)を使用
ブロッキング : Bullet Blocking One for Western Blotting(#13779)室温 5 分
一次抗体 : [EGFR] EGF Receptor (D38B1) XP Rabbit mAb(CST #4267)2,000 倍希釈
Signal Enhancer HIKARI for Western Blotting and ELISA (#02270-81)A 液を用いて希釈 室温 60 分
[β-Actin] β-Actin 抗体(C4)(Santa Cruz #sc-47778)1,000 倍希釈
Bullet ImmunoReaction Buffer(#18439-85)を用いて希釈 室温 30 分
[Histone H3] Histone H3 (D1H2) XP Rabbit mAb(CST #4499)2,000 倍希釈
Bullet Blocking One for Western Blotting(#13779)を用いて希釈 室温 60 分
二次抗体 : [EGFR] Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP](Pre-adsorbed)(Novus #NB7187)50,000 倍希釈
Signal Enhancer HIKARI for Western Blotting and ELISA (#02270-81)B 液を用いて希釈 室温 60 分
[β-Actin] HRP 標識 Anti-Mouse IgG (自家調製)5,000 倍希釈
Bullet ImmunoReaction Buffer(#18439-85)を用いて希釈 室温 30 分
[Histone H3] Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP](Pre-adsorbed)(Novus #NB7187)30,000 倍希釈
Bullet Blocking One for Western Blotting(#13779)を用いて希釈 室温 60 分
検出 : [EGFR] Chemi-Lumi One Super(#02230)
[β-Actin] Chemi-Lumi One L(#07880)
[Histone H3] Chemi-Lumi One Super(#02230)
ChemiDoc Touch MP 3 × 3 ビニング(バイオ・ラッドラボラトリーズ)(AUTO モード)

関連資料

関連動画

Bullet PAGE Plus と従来法組成ゲルの泳動時間比較

価格表

製品名 ウェル数 規格 貯法 製品番号 容量 オンライン
カタログへ
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-10%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21789-34 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-10%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21790-94 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-15%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21791-84 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-15%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21792-74 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-20%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21793-64 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-20%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21794-54 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 7.5-15%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21795-44 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 7.5-15%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21796-34 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 10-20%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21797-24 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 10-20%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21798-14 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 7.5%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21799-04 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 7.5%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21800-54 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 10%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21801-44 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 10%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21806-94 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 12.5%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21807-84 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 12.5%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21811-14 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 15%, 13wells 13 SP(電気泳動用) 冷蔵 21853-74 10 sheets e-Nacalai.jpg
Bullet PAGE Plus Precast Gel, 15%, 17wells 17 SP(電気泳動用) 冷蔵 21854-64 10 sheets e-Nacalai.jpg

関連製品

Bullet シリーズ

Bullet シリーズは SDS-PAGE から CBB 染色もしくはウェスタンブロッティングを高速化する試薬です。 シリーズすべてを使用していただくことにより、CBB 染色が約 30 分、ウェスタンブロッティングが約 2 時間で完了できます。

工程 製品名 時間
SDS-PAGE Bullet PAGE Plus Precast Gel 約 10 分
CBB 染色 Bullet CBB Stain Lite 15 分
転写 Bullet Semi-dry Transfer One 10 分
ブロッキング Bullet Blocking One 5 分
抗原抗体反応 Bullet ImmunoReaction Buffer 従来の約半分

電気泳動槽

WEP_N.png

メーカー名 ジェレックスインターナショナル
製品名 WEP-MN バーティカル高速泳動槽(Bullet 用)
メーカー製品番号 WEP-MN
外寸法 W143 × D84 × H140(mm)
バッファー量 550 mL
オンラインカタログへ e-Nacalai.jpg

※電気泳動槽には、Bullet PAGE Plus 用のアダプター(100 mm × 80 mm)が付属されています。

※掲載内容は予告なく変更になる場合があります。