Bullet Blocking One for Western Blotting は、どのような製品ですか？

本製品は、ウェスタンブロッティング専用の高速ブロッキング剤です。 本製品の使用により、5 分でブロッキングが完了します。

使用方法を教えてください。

イムノブロッティング膜のブロッキングの場合、本製品の原液に膜を浸し、5 分間振とうしてください。 使用方法の詳細は、取扱説明書をご参照ください。

ブロッキング後、洗浄する必要はありますか？

本製品を用いてブロッキング後、tTBS でのリンスを推奨しております。

Bullet Blocking One for Western Blotting に含まれている成分を教えてください。

本製品は、BSA、高分子化合物、両親媒性化合物、防腐剤、緩衝液を含みます。 高分子化合物、両親媒性化合物、防腐剤の詳細については非公開です。組成及び成分情報の詳細は、SDS をご参照ください。

有効期限を教えてください。

本製品の有効期限は、未開封品で製造後 12 ヶ月です。 ラベルに有効期限を記載しておりますので、ご確認ください。

凍結保存は可能ですか？

保証外です。 凍結融解により、沈殿が生じる可能性があります。本製品は防腐剤が含まれているため、開封後も凍結保存する必要はありません。

ELISA、免疫組織染色への適応は可能ですか？

保証外です。 本製品は、イムノブロッティング専用ブロッキング剤です。

蛍光検出ウェスタンブロッティングへの適応は可能ですか？

可能です。 本製品を用いて蛍光ウェスタンブロッティングを実施した結果を HP に掲載しておりますので、ご参照ください。

抗体希釈液として使用可能ですか？

可能です。 使用する抗体の種類や濃度等の条件により、最適な本製品の希釈倍率が異なるため、予備検討を行っていただく必要があります。本製品の抗体希釈液としての使用例は、BULLETIN L-137 または当社 HP をご参照ください。抗体反応時間の短縮を希望される場合、抗体反応が従来の約半分の時間で完了する Bullet ImmunoReaction Buffer（#18439）をご使用ください。

Bullet Blocking One for Western Blotting で希釈した抗体溶液の保存は可能ですか？

当社では、本製品で希釈した抗体溶液を保存したデータを保有しておりません。 したがって、予備検討を行っていただく必要があります。

Bullet Blocking One for Western Blotting を抗体希釈液として用いる場合、milliQ で希釈することは可能ですか？

当社では、本製品を milliQ で希釈し、使用したデータを保有しておりません。 本製品を希釈する際は、tTBS または tPBS の使用を推奨しております。

Bullet Blocking One for Western Blotting は、リン酸化タンパク質に対して適用可能ですか？

使用される抗体によっては、本製品に含まれるウシ由来タンパク質と反応し、バックグラウンドが高くなる可能性があるため、予備検討を行っていただく必要があります。 リン酸化タンパク質を検出する際は、カゼインフリーで内因性ホスファターゼ非含有ブロッキングワン P（#05999）を推奨しております。

Bullet Blocking One for Western Blotting は、アセチル化タンパク質やメチル化タンパク質といった修飾タンパク質に対して、適用可能ですか

当社では、本製品の修飾タンパク質への適用に関するデータを保有しておりません。 したがって、予備検討を行っていただく必要があります。

ELISA やイムノブロッティングの過程で、ブロッキングワン各種（#03953、#05999、#13779）、シグナル増強剤 HIKARI（#02272、#02297）、Bullet ImmunoReaction Buffer（#18439）を併用することは可能ですか？

可能です。 ブロッキングワン各種でブロッキング後、抗体希釈液として、ブロッキングワン各種（希釈したもの）、シグナル増強剤 HIKARI（#02272、#02297）、Bullet ImmunoReaction Buffer（#18439）のいずれかをご使用ください。ただし、併用とは異なる製品同士を混合して使用するという意味ではありませんので、ご注意ください。

Bullet Blocking One for Western Blotting の再利用は可能ですか？

保証外です。 本製品を繰り返し使用すると、安定した性能が得られない可能性があるため、再利用は推奨しておりません。

HP に掲載されている実施例において、5% スキムミルクの代わりに 20 倍希釈の Bullet Blocking One for Western Blotting を抗体希釈液として使用すると強いシグナルを得たとありますが、本製品はシグナル増強剤 HIKARI（#02272、#02297）と比較してどの程度シグナル増強効果がありますか？

本製品はブロッキング剤であり、シグナル増強効果は副次的なもので、抗体の種類や分析条件によって異なります。 シグナル増強を目的とする場合、シグナル増強剤 HIKARI（#02272、#02297）をご使用ください。

ブロッキングワン（#03953）、ブロッキングワン P（#05999）、Bullet Blocking One（#13779）において、ブロッキング時間が異なる理由を教えてください。

ブロッキングワン各種製品のブロッキング時間の違いは、組成及び成分の違いによるものです。 ブロッキングワン P は、ブロッキングワンと基本構成成分となる高分子化合物は同じですが、りん酸化タンパク質の検出に適した組成及び成分となっております。また、Bullet Blocking One は、両親媒性化合物の効果により、短時間でブロッキングワンと同等の効果が得られます。

取扱説明書に記載されている時間より長くブロッキングした場合、ブロッキング効果は強まりますか？

長時間のブロッキングはシグナルの低下につながる恐れがあるため、取扱説明書に記載されている時間以上の処理は推奨しておりません。 本製品のブロッキング処置時間とブロッキング効果に関しては、BULLETIN L-137、または当社 HP をご参照ください。

ブロッキング処理を長時間行い、シグナル強度が下がった場合、tPBS 等で洗浄することでシグナルの減弱を抑えることは可能ですか？

オーバーブロックとなった場合、洗浄を行っても、シグナルの減弱を抑えることはできません。

Bullet Blocking One for Western Blotting を使用した際に、ムラが発生する場合、改善策はありますか？

メンブレンが本製品に十分に浸っていないと、ムラが発生する場合があります。 メンブレンに本製品が均一に行き渡るように、使用量と振とう条件の見直しを行ってください。