分離能の比較

本製品は、約 10 分という短時間の泳動にもかかわらず、従来品に近い分離能およびバンドのシャープさを示しています。

製品名	Bullet PAGE Plus	Extra PAGE One	A 社	B 社
ゲル濃度	5 - 20%	5 - 20%	4 - 20%	4 - 12%
製品番号	21794-54	13064-64	－	－
泳動時間	10 分 07 秒	35 分 12 秒	29 分 35 秒	48 分 32 秒
泳動像

<実験条件＞

サンプル:

タンパク質マーカー(10 倍濃縮）（#29458-24）を 1 × になるように調製し、3 μL 添加

染色:

CBB Stain One(Ready To Use)（#04543）

泳動条件:

各製品の推奨条件に準じています。（Bullet PAGE Plus 400 V 定電圧、Extra PAGE One 300 V 定電圧）

転写効率の比較

本製品は、A 社製品と同等の転写効率を示しています。

転写緩衝液	Bullet Semi-dry Transfer One（#15353-01）
転写条件	25 V（定電圧）、10 分
ゲル	Bullet PAGE Plus 5 - 20%	A 社 4 - 20%
転写後染色像

<実験条件>

サンプル:

①Protein Ladder One Plus, Triple-color for SDS-PAGE（#19593-25）
② ～ ④タンパク質マーカー(10倍濃縮)（#29458-24）を ② 3 ×、③ 1 ×、④ 1/3 × になるように調製し、
各 2 μL 添加

染色:

CBB Stain One(Ready To Use)（#04543）により PVDF メンブレンを染色

ウェスタンブロッティング：サイズの異なるタンパク質の検出

本製品を用いて電気泳動後、ウェスタンブロッティングにより、サイズの異なる 3 種類のタンパク質を検出しました。低分子（Histone H3）から高分子（EGFR）まで、幅広い分子量のタンパク質を検出でき、本製品はウェスタンブロッティングにも適用可能であることが示されました。

検出タンパク質	EGFR（175 kDa）	β-Actin（42 kDa）	Histone H3（17 kDa）
ブロッティング像

<実験条件>

サンプル:

HeLa 細胞懸濁液（10 μg から 2 倍希釈系列）

SDS-PAGE:

Bullet PAGE Plus Precast Gel, 5-20%, 17wells（#21794-54）　400 V

転写:

Bullet Semi-dry Transfer One（#15353-01）　25 V　10 分　PVDF（ポアサイズ; 0.45 μm）を使用

ブロッキング:

Bullet Blocking One for Western Blotting（#13779）　室温 5 分

一次抗体:

【EGFR】	EGF Receptor (D38B1) XP Rabbit mAb（CST #4267）　2,000 倍希釈 Signal Enhancer HIKARI for Western Blotting and ELISA （#02270-81）A 液を用いて希釈　室温 60 分
【β-Actin】	β-Actin 抗体(C4) （Santa Cruz #sc-47778）　1,000 倍希釈 Bullet ImmunoReaction Buffer（#18439-85）を用いて希釈　室温 30 分
【Histone H3】	Histone H3 (D1H2) XP Rabbit mAb（CST #4499）　2,000 倍希釈 Bullet Blocking One for Western Blotting（#13779）を用いて希釈　室温 60 分

二次抗体：

【EGFR】	Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP](Pre-adsorbed)（Novus #NB7187） 50,000 倍希釈 Signal Enhancer HIKARI for Western Blotting and ELISA （#02270-81）B 液を用いて希釈　室温 60 分
【β-Actin】	HRP 標識 Anti-Mouse IgG （自家調製）　5,000 倍希釈 Bullet ImmunoReaction Buffer（#18439-85）を用いて希釈　室温 30 分
【Histone H3】	Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP](Pre-adsorbed)（Novus #NB7187） 30,000 倍希釈 Bullet Blocking One for Western Blotting（#13779）を用いて希釈　室温 60 分

検出:

【EGFR】 【β-Actin】 【Histone H3】

Chemi-Lumi One Super（#02230） Chemi-Lumi One L（#07880） Chemi-Lumi One Super（#02230）

ChemiDoc Touch MP 3 × 3 ビニング（バイオ・ラッドラボラトリーズ）（AUTO モード）

下記の種類のグラジエントゲルと均一ゲルを用意しています。

ゲル		グラジエントゲル
ゲル濃度		5 - 10%	5 - 15%	5 - 20%	7.5 - 15%	10 - 20%
製品番号	13 ウェル	21789-34	21791-84	21793-64	21795-44	21797-24
	17 ウェル	21790-94	21792-74	21794-54	21796-34	21798-14
タンパク質の泳動像 （SDS-PAGE）
核酸の泳動像（PAGE）

ゲル		均一ゲル
ゲル濃度		7.5%	10%	12.5%	15%
製品番号	13 ウェル	21799-04	21801-44	21807-84	21853-74
	17 ウェル	21800-54	21806-94	21811-14	21854-64
タンパク質の泳動像 （SDS-PAGE）
核酸の泳動像（PAGE）

<タンパク質実験条件>

サンプル:

タンパク質マーカー(10倍濃縮)（#29458-24）1 × に調製し、3 μL 添加

泳動用緩衝液:

泳動用緩衝液(10倍濃縮, SDS-PAGE用, トリス-グリシン系)（#30329）

泳動条件:

400 V（定電圧）、約 10 分

染色:

CBB Stain One(Ready To Use)（#04543）

<核酸実験条件>

サンプル:

①100bp DNA Ladder One(Ready To Use)（#07908-75）2 μL 添加
②20bp DNA Ladder（タカラバイオ #3409A）2 μL 添加
（取扱説明書の使用例に従って、6XLoading Buffer と混合）
③siRNA Ladder Marker（タカラバイオ #3430）2 μL 添加
（取扱説明書の使用例に従って、6XLoading Buffer と混合）

泳動用緩衝液:

泳動用緩衝液(10倍濃縮)（#30340-91）
<注意事項> 泳動緩衝液には、25 mM トリス、192 mM グリシン緩衝液を使用してください。

泳動条件:

400 V（定電圧）、約 12 分

染色:

Dual Green Nucleic Acid Stain（#20599）

パワーサプライの電圧が最大 300 V の機種をお使いの場合は、以下の泳動時間を参考にしてください。泳動時間は試料緩衝液中の BPB がゲル下端の 5 mm 上まで泳動される時間です。泳動用緩衝液の温度やゲル濃度などによって、泳動時間は若干変わります。

タンパク質の分析（SDS-PAGE）には、25 mM トリス、192 mM グリシン、0.1% SDS 緩衝液を使用してください。核酸の分析（PAGE）には、25 mM トリス、192 mM グリシン緩衝液を使用してください。サンプルの添加量は、ウェル容量の半量（13 ウェルは 20 μL、17 ウェルは 14 μL）以下を推奨します。

<注意事項>

• W100 mm × H80 mm × T3.2 mm のサイズのプレートが使用可能な泳動装置を使用してください。
  推奨機種：WEP-MN バーティカル高速電気泳動槽（ジェレックスインターナショナル#WEP-MN）
• 使用前に電気泳動装置への適合性（プレートサイズなど）とパワーサプライの性能（出力範囲など）をご確認ください。

メーカー名	ジェレックスインターナショナル
製品名	WEP-MN バーティカル高速泳動槽
メーカー製品番号	WEP-MN
外寸法	W143 × D84 × H140（mm）
バッファー量	550 mL
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※電気泳動槽には、Bullet PAGE Plus 用のアダプター（100 mm × 80 mm）が付属されています。

Bullet シリーズは SDS-PAGE から CBB 染色もしくはウェスタンブロッティングを高速化する試薬です。 シリーズすべてを使用していただくことにより、CBB 染色が約 30 分、ウェスタンブロッティングが約 2 時間で完了できます。