本製品を用いて、大豆アレルゲンタンパク質（Gly m 4）の検出を行いました。本製品を使用することにより、 抗体反応時間を大幅に短縮できることがわかります。

	短時間プロトコール		通常プロトコール
ブロッティング像
抗体希釈液	本製品	5% スキムミルク	本製品	5% スキムミルク
一次抗体 Anti Gly m 4 Rabbit Polyclonal Antibody（ST0225）（自家調製） 1,000 倍希釈	30 分（室温）		一晩（冷蔵）
二次抗体 Stabilized Peroxidase conjugated Goat Anti-Rabbit（H+L）（Thermo Fisher Scientific） 400 倍希釈	30 分（室温）		60 分（室温）

実験条件

ECL は、Cytiva として事業を行う Global Life Sciences Solutions USA LLC およびその関連会社の商標です。

データご提供：近畿大学 農学部 応用生命化学科　森山 達哉 教授 / 矢野 えりか 研究員

本製品、0.1%-tTBS を抗体希釈液として使用し、ウェスタンブロッティングを実施しました。本製品を使用することにより、反応時間を約半分（冷蔵で一晩反応させている場合は室温で 30 ～ 60 分）へ短縮可能であることがわかります。

一次抗体反応時間	15 分	30 分	60 分	120 分	一晩（冷蔵）
二次抗体反応時間	15 分	30 分	60 分	120 分	60 分
本製品
0.1%-tTBS

実験条件

本製品を用いて、 β-Actin タンパク質の検出を行いました。本製品を使用することにより、抗体反応時間を短縮できることがわかります。

抗体希釈液	本製品	0.1%-tTBS	5% スキムミルク
ブロッティング像
一次抗体 Anti β-Actin Rabbit Antibody（CST） 5,000 倍希釈	20 分			60 分
二次抗体 Anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody[HRP] （Novus） 5,000 倍希釈	20 分			30 分

実験条件

【使用者の評価】
通常、5% スキムミルクを抗体希釈液として使用し、一次抗体を 60 分、二次抗体を 30 分それぞれ反応させている。本製品を使用することにより、一次抗体、二次抗体共にわずか 20 分（短時間）の反応時間で同様のバンドが確認できた。

データご提供：京都大学大学院 農学研究科 食品分子機能学分野　後藤 剛 准教授 / 小森 雅臣 研究員

本製品を使用することにより、さまざまな抗原検出において抗体反応時間を 60 分から 30 分へ短縮できました。

抗原	Flotillin-1		β-Actin		Nup98
ブロッ ティング像			HRP 標識一次抗体使用
抗体希釈液	tTBS	本製品	tTBS	本製品	tTBS	本製品
一次抗体	60 分	30 分	60 分	30 分	60 分	30 分
	Flotillin-1 抗体(C-7) （Santa Cruz #sc-133153） 1,000 倍希釈		Human anti Human Actin Beta:HRP（バイオ・ラッド ラボラトリーズ #HCA147P）1,000 倍希釈		Nup98 抗体(C-5)（Santa Cruz #sc-74578） 1,000 倍希釈
二次抗体	60 分	30 分	－		60 分	30 分
	Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP] (Pre-adsorbed)（Novus #NB7574） 40,000 倍希釈				Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP] (Pre-adsorbed)（Novus #NB7574） 40,000 倍希釈
露光時間	15 分		15 分		15 分	5 分	15 分

実験条件

Bullet PAGE One を用いて電気泳動後、タンク式ブロッティングを行いました。その後、Bullet Blocking One および、本製品を用いて β-Actin の検出を行いました。本製品および Bullet シリーズを使用することで、短時間で検出を行うことができます。

実験条件

Mini Trans-Blot^® は Bio-Rad Laboratories, Inc.、C-DiGit^® は LI-COR, Inc. の登録商標です。

データご提供：京都薬科大学 統合薬科学系　高田 和幸 教授 / 西村 周泰 助教

本製品を用いて GAPDH の検出を行いました。二次抗体として AP 標識抗体を使用し、AP の基質である BCIP-NBT により発色させた実験系においても、HRP 標識抗体を用いた実験系と同様に反応時間を短縮することができます。

	AP 標識抗体使用		HRP 標識抗体使用
ブロッティング像
抗体希釈液	本製品	0.1% tTBS	本製品	0.1% tTBS
一次抗体	30 分	60 分	30 分	60 分
	GAPDH Antibody (Novus #NB300-322) 10,000 倍希釈
二次抗体	30 分	60 分	30 分	60 分
	Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [Alkaline Phosphatase] (Pre-adsorbed)（Novus #NB7181）50,000 倍希釈		Anti-Rabbit IgG, HRP-Linked Whole Ab Donkey（Cytiva #NA934）20,000 倍希釈

実験条件

一次抗体としてアイソタイプが IgM の抗 GAPDH 抗体を使用し、本製品を用いて希釈を行いました。本製品は IgM にも使用可能であり、反応時間を短縮することができます。

ブロッティング像
抗体希釈液	本製品	0.1% tTBS
一次抗体	30 分	60 分
	GAPDH Antibody (1D4)（Novus #NB300-221） 50,000 倍希釈
二次抗体	30 分	60 分
	Goat anti-Mouse IgM Secondary Antibody [HRP]（Novus #NBP1-73694） 200,000 倍希釈

実験条件

移行チャート

性能比較

抗体希釈液	本製品	tTBS	HIKARI	A 社	A 社 （Protein-free）	B 社
ブロッ ティング像
一次抗体	30 分	60 分
	EGF Receptor (D38B1)XP Rabbit mAb（CST #4267） 1,000 倍希釈
二次抗体	30 分	60 分
	Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody [HRP] (Pre-adsorbed)（Novus #NB7187） 50,000 倍希釈

実験条件

本製品で目的とする抗体濃度に希釈し、抗原抗体反応を行ってください。 反応時間は従来の半分を目安に短縮してください。 （一次抗体反応を冷蔵で一晩反応させている場合は、室温で 30 ～ 60 分を目安に短縮してください。）

詳細は取扱説明書をご参照ください。（取扱説明書は e-Nacalai からご覧いただけます。）

Bullet シリーズは SDS-PAGE から CBB 染色もしくはウェスタンブロッティングを高速化する試薬です。 シリーズすべてを使用していただくことにより、CBB 染色が約 30 分、ウェスタンブロッティングが約 2 時間で完了できます。