T6. 柱压升高
请参考技术信息3。
T7. 泵压不稳
原因 |
解决方案 |
单向阀内有气泡 |
依据泵的使用手册进行脱气 (打开排液阀让流动相通过) 。 若问题仍然存在, 请在水中使用超声波清洗单向阀。 |
注意;
- 如果经常出现气泡,请使用预柱以增加压力,从而让气泡脱出。
- 使用流动相前进行超声脱气。
T8. C18柱的分离度过低
解决方案 |
特点 |
使用更长的色谱柱 |
样本虽然可以被分离,但是想有更好的分离效果时可以使用更长的色谱柱。柱压和柱长,分离时间成正比。 |
改变流动相条件
(例如pH,有机溶剂的类型或浓度) |
改变流动相条件需要一定的知识和经验。不要设置太复杂的条件,因为它缺乏可重复性。 |
使用非疏水相互作用的填料 |
利用分子形状性或 π-π相互作用分离样品。 |
T9. 使用反相色谱法时基本没有保留
解决方案 |
特点 |
使用离子对试剂 |
离子对试剂会形成离子对而使疏水性增强,从而使分离更容易发生。因此,它不适用于不能离解的样本。 |
使用亲水色谱柱(HILIC) |
能让较小的疏水性样品具有更长的保留时间。 |
T10. 使用反相色谱法时分析时间过长
解决方案 |
特点 |
使用梯度洗脱法 |
梯度洗脱方法可通过改变有机溶剂浓度而缩短分析时间。其缺点是设备之间存在差异,会导致基线上升,每次分析都需要平衡时间。 |
使用超高速液相色谱柱 |
请参阅超高速液相色谱柱的信息。 |
改变流动相条件 |
可通过改变pH值,有机溶剂的浓度或类型解决问题。 |
使用疏水性弱的色谱柱 |
推荐使用COSMOSIL CN-MS。 |
T11. 分离性能和以往相比发生了变化
故障现象 |
原因 |
解决方案 |
理论塔板数减少 |
填料的劣化 |
无法恢复 |
保留时间或分离度的减少 |
填料上吸附有杂质 |
通过冲洗进行恢复 |
固定相脱落 |
无法恢复 |
T12. 使用新的色谱柱后产生了不同的分离效果
原因 |
解决方案 |
分析条件不适合样本 |
调整流动相的PH值在pKa±2之间或者更多。 |
使用再现性好的流动相。 |
以前使用的色谱柱性能老化 |
如果色谱柱老化会导致保留时间的减少或峰形的变化等。新色谱柱的分析结果是正确结果。 |
同一色谱柱的不同批号之间存在差异 |
请告知我们色谱柱名,品号,和现在的分离状态。
(a) 用三种不同批号的填料评估色谱柱。
我们提供三种不同批号的填料以证明色谱柱的高再现性。请联系我们获取更多信息。以下的四种色谱柱可以提供三种不同批号的填料。
填料 |
货号 |
COSMOSIL 5C18-MS-II |
09397-73 |
COSMOSIL 5C18-AR-II |
09396-83 |
COSMOSIL Cholester |
07970-03 |
COSMOSIL HILIC |
09385-23 |
(b) 找到一个受批件差影响小的分析条件。
|
原因不在色谱柱(如流动相,流速,温度) |
找到原因。 |
T13. 经过色谱柱后的洗脱液带有颜色(样本无色)
原因 |
解决方案 |
微量的固定相脱落或吸附在色谱柱内的杂质 |
使用洗脱力强的溶剂(如甲醇)或使用我们的HPLC色谱柱清洁套装 (产品号 08966-30)来清洗。 |
注意;
微量的固定相脱落对保留时间没有影响。
T14. 空气进入了色谱柱(色谱柱内干枯)
使用低粘度的溶剂(如甲醇),以一半于正常流速的速度冲洗色谱柱一小时。
注意;
请将色谱柱密封存储于阴凉黑暗处。