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柱压升高

T6. 柱压升高

请参考技术信息3。

T7. 泵压不稳

原因 解决方案
单向阀内有气泡 依据泵的使用手册进行脱气 (打开排液阀让流动相通过) 。 若问题仍然存在, 请在水中使用超声波清洗单向阀。

注意;

  1. 如果经常出现气泡,请使用预柱以增加压力,从而让气泡脱出。
  2. 使用流动相前进行超声脱气。

T8. C18柱的分离度过低

解决方案 特点
使用更长的色谱柱 样本虽然可以被分离,但是想有更好的分离效果时可以使用更长的色谱柱。柱压和柱长,分离时间成正比。
改变流动相条件
(例如pH,有机溶剂的类型或浓度)
改变流动相条件需要一定的知识和经验。不要设置太复杂的条件,因为它缺乏可重复性。
使用非疏水相互作用的填料 利用分子形状性或 π-π相互作用分离样品。

T9. 使用反相色谱法时基本没有保留

解决方案 特点
使用离子对试剂 离子对试剂会形成离子对而使疏水性增强,从而使分离更容易发生。因此,它不适用于不能离解的样本。
使用亲水色谱柱(HILIC) 能让较小的疏水性样品具有更长的保留时间。

T10. 使用反相色谱法时分析时间过长

解决方案 特点
使用梯度洗脱法 梯度洗脱方法可通过改变有机溶剂浓度而缩短分析时间。其缺点是设备之间存在差异,会导致基线上升,每次分析都需要平衡时间。
使用超高速液相色谱柱 请参阅超高速液相色谱柱的信息。
改变流动相条件 可通过改变pH值,有机溶剂的浓度或类型解决问题。
使用疏水性弱的色谱柱 推荐使用COSMOSIL CN-MS。

T11. 分离性能和以往相比发生了变化

故障现象 原因 解决方案
理论塔板数减少 填料的劣化 无法恢复
保留时间或分离度的减少 填料上吸附有杂质 通过冲洗进行恢复
固定相脱落 无法恢复

T12. 使用新的色谱柱后产生了不同的分离效果

原因 解决方案
分析条件不适合样本 调整流动相的PH值在pKa±2之间或者更多。
使用再现性好的流动相。
以前使用的色谱柱性能老化 如果色谱柱老化会导致保留时间的减少或峰形的变化等。新色谱柱的分析结果是正确结果。
同一色谱柱的不同批号之间存在差异

请告知我们色谱柱名,品号,和现在的分离状态。
(a) 用三种不同批号的填料评估色谱柱。
我们提供三种不同批号的填料以证明色谱柱的高再现性。请联系我们获取更多信息。以下的四种色谱柱可以提供三种不同批号的填料。

填料 货号
COSMOSIL 5C18-MS-II 09397-73
COSMOSIL 5C18-AR-II 09396-83
COSMOSIL Cholester 07970-03
COSMOSIL HILIC 09385-23

(b) 找到一个受批件差影响小的分析条件。

原因不在色谱柱(如流动相,流速,温度) 找到原因。

T13. 经过色谱柱后的洗脱液带有颜色(样本无色)

原因 解决方案
微量的固定相脱落或吸附在色谱柱内的杂质 使用洗脱力强的溶剂(如甲醇)或使用我们的HPLC色谱柱清洁套装 (产品号 08966-30)来清洗。

注意;
微量的固定相脱落对保留时间没有影响。

T14. 空气进入了色谱柱(色谱柱内干枯)

使用低粘度的溶剂(如甲醇),以一半于正常流速的速度冲洗色谱柱一小时。
注意;
请将色谱柱密封存储于阴凉黑暗处。