컬럼의 압력 증가

T6. 칼람의 압력 증가

191 페이지 기술정보 3 참조하십시오.

원인	해답
펌프의 체크 밸브 내에 공기 잔류	체크 밸브에 있는 공기 제거(드레인 밸브를 열고 이동상을 흘림). 만약 계속해서 공기가잔류하면 초음파 세척기에 물을 넣고 그 물 안에 넣고 체크밸브를 세척합니다.

주의;

해답	특징
길이가 긴 칼람으로 사용	길이가 긴 칼람을 사용하면 피크 폭이 더욱 좁아지고 날카로워집니다. 칼람에 걸리는 압력은 증가할 것이고 머무름 시간은 더 길어 집니다.
이동상 조건 바꿈 (예., pH, 칼람 타입, 유기용매 농도)	경험과 지식이 요합니다. 재현성이 나쁜 복잡한 분석 조건을 사용하지 마십시오.
비 친 유성 작용을 갖는 충진물 사용	분자 형상 선택성(molecular shape selectivity) 또는 π-π 상호작용(친 유성 작용 제외) 을 이용하는 칼람으로 시료를 분리합니다. 여려가지 분리 상호작용을 갖는 특수 칼람에대하여 201 페이지 기술정보 7을 참조하십시오.

해답	특징
이온 페어링 시약을 이용	이온 페어링 시약은 친 유성을 증가 시키기 위하여 시료의 이온 쌍을 형성시켜 분리합니다. 그러나 비 해리 시료(non-disssociative sample)의 분리를 위한 조건은 아닙니다.
친 수성 칼람(HILIC)을 이용36 페이지를 참조.	친 유성이 작은 시료는 칼람에 오래 머무릅니다.

해답	특징
구배(gradient) 분리 방법을 이용	구배 분리 방법에서 분석 시간을 짧게 하려면 분석 중 유기용매 농도를 변화시킵니다. 이 방법의 불리한 점은 매 분석 시 더 긴 평형 시간이 필요하고 베이스 라인이평행으로 가지 않고 위로 올라 갑니다. 그리고 이런 조건에는 더 성능이 우수한 장비가요구됩니다.
UHPLC 칼람을 이용	더 많은 정보를 위해서 62 페이지를 참조하십시오.
이동상 조건 바꿈	이 문제는 pH, 칼람 타입, 유기용매 농도를 바꿈으로써 해결 할 수 있습니다.
친 유성이 작은 칼람을 이용	COSMOSIL CN-MS 칼람을 추천합니다. 더 많은 정보를 위해서 31 페이지를 참조하십시오.

원인

해답

분석 조건이 시료와 맞지 않음

이동상의 pH를 pka ±2 또는 이상으로 맞춘다.

재현성이 높은 이동상을 이용한다.

칼람 손상

만약 칼람이 손상되면 시료의 머무름 시간이 감소하거나 피크의 모양이 변합니다. 새 칼람으로 교체.

칼람 제조 로트(lot)마다 성능 차이

칼람 이름, 제품 번호, 현재 분리 상태를 판매대리점에 문의.
(a) 3가지 다른 충진물 로트(lot)별로 칼람 성능을 평가합니다. 저희는 칼람(크기 4.6 x150 mm, 3가지 셑트)에 대해서 3가지 다른 충진물 로트의 칼람을성능 평가합니다.

(b) 로트 별 제조 시 성능 변화 영향이 적은 칼람을 찾으십시오.

칼람의 원인이 아님
(예., 이동상, 유속, 온도)

원인을 찾으십시오.

원인	해답
불순물 또는 전에 있던 시료가 나오거나 작은양의 고정상이 흘러나옴.	강한 이동상(예.,메탄올)으로 칼람 세척 또는 세척 용매 키트(제품번호:08966-30)을 이용하여 역상 HPLC 칼람을 세척.

주의;
작은 양의 고정상이 흘러 나왔어도 머무름 시간에는 영향이 없습니다 .