컬럼을 어떻게 세척하는가?
Q13. 칼람을 어떻게 세척하는가?
- 칼람에 있는 염과 산과 같은 버퍼를 어떻게 제거하는가?
염과 산과 같은 버퍼가 없는 용매를 이용하여 세척하고 보관합니다.
(예.,메탄올 : 20 mmol/l 인산버퍼= 50 : 50 을 사용했을 때, 메탄올 : 물 = 50 : 50의 용매로 세척하십시오)
주의;
만일 유기용매 와 물의 비율이 바뀌면 염이 석출될 수 있습니다(유기용매비율을 높게 하지 마십시오). - 안정한 베이스라인을 얻기 위해서 칼람 안에 있는 불순물을 어떻게 제거하는가?
시료가 이동상에 잘 녹아야 되고 강한 용출특성을 갖는 이동상을 이용해야 합니다.
타입 사용가능 이동상/ 첨가제 역상 - 시료가 단백질이 아닐 경우
메탄올 또는 THF
역상 HPLC 칼람 세척 용매 키트 (제품번호. 08966-30) 참조 - 시료가 단백질일 경우
50-70% 아세토나이트릴 : 0.1% trifluoroacetic acid을 포함하는 물주의; 유기용매 농도가 높을 때 약간의 단백질이 석출될 수 있습니다.
순상 메탄올, THF, 에탄올l 풀러린( Fullerene) 분리용 칼람 1,2,4-trichlorobenzene 그리고 기타 첨가제 Sugar-D, NH2, HILIC A아세토나이트릴 : 물 = 50 : 50
* Sugar-D 와 HILIC 칼람은 100% 물로 세척합니다.주의;
염기성 용매 (pH7.5 또는 그 이상 ) 는 사용하지 마십시오 . 충진물 ( 실리카겔 ) 을 녹입니다 . 아울러 강산성 용매 (pH1.5 또는 그이하 ) 도 충진물이 녹을 수 있으니 사용하지 마십시오 . - 시료가 단백질이 아닐 경우
- 칼람 입구가 불순물로 막혔을 경우 어떻게 제거하는가?
보통 분석 조건 보다 절반의 유량으로 칼람에 거꾸로 용매를 흘립니다.
주의;
칼람 세척 시 검출기에 연결되었던 칼람을 탈착하고 실시합니다.
- 만약 여전히 칼람 압력이 높으면, 191 페이지 기술정보 3을 참고하십시오.
Q14. 칼람을 사용 후 어떻게 보관하는가?
- 단기간 보관(2-3일)
염과 산과 같은 버퍼가 없는 용매를 이용하여 세척하고 보관합니다.
(예., 메탄올 : 20 mmol/l 인산버퍼= 50 : 50 을 사용했을 때, 메탄올 : 물 = 50 : 50의 용매로 세척하십시오)
- 장기간 보관(1개월 또는 그 이상)
칼람 충진물의 손상 그리고 건조, 곰팡이를 방지하기 위하여 다음과 같은 용매로 교환합니다.
칼람 | 염기성 용매 또는 버퍼의 농도 | |
---|---|---|
역상 | 역상 칼람용 보관용매(제품번호. 08967-20) 메탄올: 물 = 70 : 30, 아세토나이트릴: 물= 70 : 30 |
|
순상 | 할로겐(halogen) 또는 산이 없는 유기용매 (핵산 : 에탄올 = 90 : 10) | |
이온교환 겔 침투 친유성 상호작용 |
0.05% sodium azide 용매 그리고 기타 | |
풀러린(Fullerene)분리용 | 톨루엔 그리고 기타 | |
Sugar-D, NH₂, HILIC | 아세토나이트릴 : 물 = 70 : 30 |
주의;
칼람 입구를 단단히 막고 진동이 없고 서늘한 어두운 장소에 보관합니다 .
Q15. 칼람의 수명을 늘리기 위해서 어떻게 하는가?
칼람 수명 시간은 분석 조건에 좌우합니다(시료, 농도, 염, 산, 유기용매의 pH)
주의 ;
칼람 수명을 단축 시키는 가장 공통된 원인은 불충분한 시료 전처리 입니다 .
193 페이지 기술정보 4 를 참고하십시오 .