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科思美析(COSMOSIL)SFC超临界流体色谱柱

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特征:

  • 三种类型的固定相以适应不同类型的化合物
  • 与HPLC柱相比,具有不同的选择性

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产品

类型 I: 用于中等极性或者大极性化合物的分离

对于分离此类型的化合物,可适用于大极性的固定相。极性越大的化合物保留时间越长。

产品 固定相 特征
COSMOSIL PY 吡啶基 与2-乙基吡啶有着相似的选择性, 保留能力较强
COSMOSIL HP 3-羟苯基 和PY柱不同的选择性; 对碱性化合物有很强的保留能力
COSMOSIL Diol 二醇基 离子相互作用影响较小

类型 II: 用于中等极性或者小极性化合物的分离

对于分离此类型的化合物,可适用于小极性的固定相。

产品 固定相 特征
COSMOSIL Cholester 胆甾醇基 比C18拥有更好分子结构识别能力和分离性能

类型 III: 特殊分离能力的SFC色谱柱

与高效液相色谱(HPLC)相比,在超临界流体色谱(SFC)中,π-π相互作用或色散作用力对样品分离的影响更加突出。因此,这些色谱柱在SFC中具有独特的分离能力。

产品 固定相 特征
COSMOSIL πMAX 芘基乙基 π-π 相互作用比苯基柱更强
COSMOSIL PBr 五溴苯基 独特的色散分离作用

分析例1

黄嘌呤衍生物(大极性化合物) XLogP3: -0.8 – 0.0

类型 I 色谱柱 (COSMOSIL 5PY, 5HP, 5Diol)  和COSMOSIL 5πMAX 都显示出了良好的分离性能。使用COSMOSIL 5πMAX,样品的溶出顺序和类型I色谱柱不一样。

xanthine derivatives chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 273 nm

流动相

A:CO2
B:Methanol
B conc. 10%(πMAX only:20%)
样品
    1. Caffeine (0.10 mg/mL)
    2. Theophylline (0.10 mg/mL)
    3. Theobromine (0.09 mg/mL)

sfc-1-sample.jpg

流速 3.0 mL/min `进样量 5.0 µL

结构同分异构体 (中等极性化合物) XLogP3: 1.4 – 1.9

类型 I 色谱柱 (COSMOSIL 5PY, 5HP, 5Diol) 产生最佳分离效果.

positional isomers chromatogram 1

分离条件
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 254 nm
流动相 A:CO2
B:Methanol
B conc. 5%
样品

o-Hydroxyacetophenone (0.1 mg/mL)

m-Hydroxyacetophenone (0.1 mg/mL)

p-Hydroxyacetophenone (0.1 mg/mL)

sfc-2-sample.jpg

流速 3.0 mL/min 进样量. 5.0 µL

结构同分异构体 (小极性化合物) XLogP3: 5.8 – 6.0

类型III (COSMOSIL 5πMAX, 5PBr) 和类型II (5Cholester) 这两种色谱柱显示出良好的分离性能.

positional isomers chromatogram 2

Conditions
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 254 nm
流动相 A:CO2
B:Methanol
B conc. 5%(PBr only: 15%)
样品

o-Terphenyl(0.1 mg/mL)

m-Terphenyl(0.1 mg/mL)

p-Terphenyl(0.1 mg/mL)


sfc-3-sample.jpg
流速 3.0 mL/min 进样量 5.0 µL

分析例2

Vitamin D

COSMOSIL 5πMAX 和 5PBr 可以很好的分离维生素。但是和COSMISIL 5PBr一样,用卤原子作为固定相的PFP (五氟苯基) 色谱柱却不能分离维生素。
※PBr使用的色散分离作用与较大分子的相互作用更强烈,由于PFP是一种小分子,其分离性能与COSMOSIL 5PBr不同。

vit. d chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 265 nm
流动相 A:CO2
B:Methanol
B conc. **%
样品
  1. Vitamin D3 (0.6 mg/mL)
  2. Vitamin D2 (0.6 mg/mL)
流速 3.0 mL/min 进样量 3.0 µL

核酸碱基

COSMOSIL 5Diol 可以分离出5种类的核酸碱基.

nucleobase chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 260 nm
流动相 A:CO2
B:100 mmol/L Ammonium Acetate -Methanol
B conc. **%
样品
  1. Thymine (0.2 mg/mL)
  2. Uracil (0.2 mg/mL)
  3. Adenine (0.2 mg/mL)
  4. Cytosine (0.2 mg/mL)
  5. Guanine (0.2 mg/mL)
流速 3.0 mL/min 进样量 5.0 µL

聚苯乙烯

这些具有不同聚合度的聚苯乙烯样品可以根据聚合体单体数量的不同进行分离。 COSMOSIL 5πMAX 和5PBr能够适用于分离这种高分子量的聚苯乙烯聚合体样品。

polystyrene chromatogram

分析条件
色谱柱 COSMOSIL ** 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 220 nm
流动相 A:CO2
B:Tetrahydrofuran
B conc. *→*% 10 min Linear gradient
样品

Polystyrene, MW906 (5.0 mg/mL)

Polystyrene, MW2,200 (5.0 mg/mL)

sfc-6-sample.jpg

流速 3.0 mL/min 进样量 5.0 µL

表面活性剂

surfactant chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL 5PBr 背压调整器 10 MPa
柱尺寸 4.6 mmI.D. × 250 mm 温度 40°C
检测器 UV 220 nm
流动相 A:CO2
B:Methanol
B conc.2→100% 10min Linear gradient
样品

Triton X-100 (5.0 mg/mL)

sfc-8-sample.jpg

流速 2.0 mL/min 进样量 5.0 µL

非甾体抗炎药

NSAID chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL HP 样品
  1. Ibuprofen
  2. Fenoprofen
  3. Flurbiprofen
  4. Ketoprofen
  5. Indoprofen
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 150 mm
流动相 Carbon Dioxide : Methanol
流动相变化 95:5 to 65:35 over 6 minutes
流速 5.0 ml/min
温度 30°C
检测器 UV 230 nm

β阻滞药

在相同的条件下,样品的溶出顺序相反。

beta blocker chromatogram

分离条件
色谱柱 COSMOSIL HP and a 2-ethylpyridine column 样品
  1. Pindolol
  2. Atenolol
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 150 mm
流动相 Carbon Dioxide : Methanol
w/20 mM ammonium formate
流动相变化 95:5 to 50:50 over 4 minutes
流速 5.0 ml/min
温度 30°C
检测器 APCI(+)

亲水性有机物

COSMOSIL PY (Pyridinyl)

hydrophilic organics chromatogram

分离条件
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 150 mm
流速 5.6 mL/min
压力 140 bar
温度 Ambient
流动相 Methanol gradient 5-50%
@18%/minute;
hold @ 50% 0.1 min;
return to 5% @99%/min

脂溶性维生素分析

COSMOSIL Cholester

当用于SFC分析时,COSMOSIL Cholester 可以分离脂溶性维生素及其杂质。

fat-soluble vitamin chromatogram

分离条件
柱尺寸 4.6 mm I.D. x 250 mm
流动相 IPA in CO2
IPA conc. 0→10%(0–10min),10%(10–12min)
流速 3.0 ml/min
背压调整器 15 MPa
温度 40°C
检测器 UV-VIS
Sample conc 2.0 mg/ml
进样量 1.0 µl
样品

COSMOSIL Cholester exhibits strong retention for fat-soluble vitamins and is suitable for on-line SFE-SFC using Shimadzu’s Nexera UC. The on-line extraction from food also produced triglyceride impurities, which were successfully separated from the
vitamins.
Data courtesy of Shimadzu Corporation

色谱柱数据对比

阿米替林

分离条件
柱尺寸 2.1 mm I.D. × 150 mm 温度 40°C
流动相 A: CO2
B: 0.1% CH3COONH4 -Methanol
B conc. 0→60% (0–14 min), 60% (14–17 min)
检测器 UV 250 nm
进样量 2.0 µl
样品 Amitriptyline (1 mmol/l)
流速 0.8 ml/min
背压调整器 10 MPa

数据由九州大学医学研究所生物调节研究中心代谢组学提供

利血平

分离条件
柱尺寸 2.1 mm I.D. × 150 mm 背压调整器 10 MPa
流动相 A: CO2
B: 0.1% CH3COONH4 -Methanol
B conc. 0→60% (0–14 min), 60% (14–17 min)
温度 40°C
检测器 UV 260 nm
Inj. Vol. 2.0 µl
流速 0.8 ml/min
样品 Reserpine (1mmol/l)

数据由九州大学医学研究所生物调节研究中心代谢组学提供

3-氨基苯甲酸

分离条件
柱尺寸 2.1 mm I.D. × 150 mm 背压调整器 10 MPa
流动相 A: CO2
B: 0.1% CH3COONH4 -Methanol
B conc. 0→60% (0–14 min), 60% (14–17 min)
温度 40°C
检测器 UV 250 nm
进样量 2.0 µl
流速 0.8 ml/min
样品 3-Aminobenzoic Acid (10mmol/l)

数据由九州大学医学研究所生物调节研究中心代谢组学提供

安息香酸

分离条件
柱尺寸 2.1 mm I.D. × 150 mm 背压调整器 10 MPa
流动相 A: CO2
B: 0.1% CH3COONH4 -Methanol
B conc. 0→60% (0–14 min), 60% (14–17 min)
温度 40°C
检测器 UV 230nm
进样量 2.0 µl
流速 0.8 ml/min
样品 Benzoic Acid (10 mmol/l)

数据由九州大学医学研究所生物调节研究中心代谢组学提供

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材料性质

填料PYHPDiolCholesterπMAXPBr
硅胶 高纯度球形多孔硅胶
平均粒径 (µm) 3, 5 5 5 5 5
平均孔径 (Å) 120
固定相构造 PY-kouzousiki.png paiMAX-kouzousiki.jpg
吡啶基 3-羟苯基 二醇基 胆甾醇基 芘基乙基 五溴苯基
封端处理 近乎完美的封端

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COSMOSIL PY (Pyridinyl)

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COSMOSIL HP (3-Hydroxyphenyl)

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