컬럼의 충진물 성능이 저하되었을 때의 증상은?
Q16. 칼람의 충진물 성능이 저하되었을 때의 증상은?
압력이 증가할 때 칼람의 성능 저하의 공통된 증상은 이론단수 감소, 시료의 머무름 시간 짧아지며 피크의 모양이 나빠 질 뿐더러분리
능이 감소합니다.
주의;
174 페이지의 고장 처치법을 참고합니다.
Q17. 칼람 성능이 저하되었을 때 어떻게 확인하는가?
칼람 구매 시 상자 안에 있는 COA(certificate of analysis)와 같은 조건하에서 칼람의 성능 저하를 평가합니다. 기존 사용하던 기기를 이용하여 칼람의 성능을 매 시간 기록한다. 칼람을 새것으로 교체 시 표준 값으로 기록하여 둔다.
종목 | 내용 | |
---|---|---|
용량계수(k' ) | 만약 고정상이 손상돠면 시료 머무름 시간은 짧아진다. | |
이론단수(N) | 칼람의 충진물 상태 또는 불순물로 인해 이론단수 감소. | |
피크 비대칭(S) | 칼람의 충진물에 불순물 흡착 또는 충진물의 성능 저하로 인해 피크 비대칭 상승. | |
압력 | 시료가 충진물에 흡착 또는 충진물에 압착으로 칼람 필터가 막혀 압력 증가. |
( 참고자료 )
다음은 5C18-MS-II (4.6 mm I.D. × 150 mm) 칼람에 대한 참고 자료입니다 .
- 용량계수(k' ) : 90% 또는 Naphthalene의 k' 값 이하
- 이론단수(N) : 9000 또는 이하
- 피크 비대칭(S) : 0.86-1.25 범위 벋어남
- 압력 : 20 MPa 또는 이상
Q18. 준 마이크로(semi-micro) 칼람을 사용할 때 주의점은?
준 마이크로 칼람을 사용할 때는 특별히 제작된 인젝터, 튜빙, 검출기 셀을 사용하여야 합니다.
주의;
칼람의 단면적에 비례해서 용매의 유량이 일정하게 흐르는지 확인하십시오. 더 많은 정보를 원하시면 189 페이지에 이는 기술정보
2를 참조하십시오.
Q19. UHPLC 칼람을 사용할 때 주의 점은?
- UHPLC 용 장비를 사용하십시오.
- 일반 HPLC을 사용할 경우 검출기의 응답 속도(0.02초)가 빨라집니다.
- UHPLC 칼람용으로 제작된 인젝터, 튜빙, 검출기 셀을 사용하십시오.
- 칼람의 압력은 30MPa 또는 이하로 사용합니다.
Q20. 분취(prep) 칼람을 사용할 때 적정한 주입 시료 양은?
시료 주입 양은 시료가 용매에 대한 용해도 또는 시료 분리 능에 따라 다릅니다. 분석 칼람의 최대 시료 주입 양을 최적화하기 위해서
칼람의 단면적에 비례해서 결정합니다.
주의;
분석 칼람으로부터 분취 칼람까지 확대(scale up)하는 방법은 35 페이지를 참고하십시오. 칼람의 유량과 관, 내경에 대해서 189
페이지 기술 정보 2를 참고하십시오.
Q21. 같은 HPLC에 역상과 순상의 두 가지 용매를 사용해야 할 경우 주위 해야 할 점은?
역상과 순상에서 용매를 교환해야 할 경우 에탄올과 같은 용매를 섞어서 치환 후 새로운 용매로 교환합니다.
주의;
역상용 물과 메탄올 순상용 핵산과는 혼합할 수 없습니다.