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컬럼의 충진물 성능이 저하되었을 때의 증상은?

Q16. 칼람의 충진물 성능이 저하되었을 때의 증상은?

압력이 증가할 때 칼람의 성능 저하의 공통된 증상은 이론단수 감소, 시료의 머무름 시간 짧아지며 피크의 모양이 나빠 질 뿐더러분리 능이 감소합니다.
주의;
174 페이지의 고장 처치법을 참고합니다.

Q17. 칼람 성능이 저하되었을 때 어떻게 확인하는가?

칼람 구매 시 상자 안에 있는 COA(certificate of analysis)와 같은 조건하에서 칼람의 성능 저하를 평가합니다. 기존 사용하던 기기를 이용하여 칼람의 성능을 매 시간 기록한다. 칼람을 새것으로 교체 시 표준 값으로 기록하여 둔다.

종목 내용
용량계수(k' ) 만약 고정상이 손상돠면 시료 머무름 시간은 짧아진다.
이론단수(N) 칼람의 충진물 상태 또는 불순물로 인해 이론단수 감소.
피크 비대칭(S) 칼람의 충진물에 불순물 흡착 또는 충진물의 성능 저하로 인해 피크 비대칭 상승.
압력 시료가 충진물에 흡착 또는 충진물에 압착으로 칼람 필터가 막혀 압력 증가.

( 참고자료 )
다음은 5C18-MS-II (4.6 mm I.D. × 150 mm) 칼람에 대한 참고 자료입니다 .

  • 용량계수(k' ) : 90% 또는 Naphthalene의 k' 값 이하
  • 이론단수(N) : 9000 또는 이하
  • 피크 비대칭(S) : 0.86-1.25 범위 벋어남
  • 압력 : 20 MPa 또는 이상

Q18. 준 마이크로(semi-micro) 칼람을 사용할 때 주의점은?

준 마이크로 칼람을 사용할 때는 특별히 제작된 인젝터, 튜빙, 검출기 셀을 사용하여야 합니다.
주의;
칼람의 단면적에 비례해서 용매의 유량이 일정하게 흐르는지 확인하십시오. 더 많은 정보를 원하시면 189 페이지에 이는 기술정보 2를 참조하십시오.

Q19. UHPLC 칼람을 사용할 때 주의 점은?

  • UHPLC 용 장비를 사용하십시오.
  • 일반 HPLC을 사용할 경우 검출기의 응답 속도(0.02초)가 빨라집니다.
  • UHPLC 칼람용으로 제작된 인젝터, 튜빙, 검출기 셀을 사용하십시오.
  • 칼람의 압력은 30MPa 또는 이하로 사용합니다.

Q20. 분취(prep) 칼람을 사용할 때 적정한 주입 시료 양은?

시료 주입 양은 시료가 용매에 대한 용해도 또는 시료 분리 능에 따라 다릅니다. 분석 칼람의 최대 시료 주입 양을 최적화하기 위해서 칼람의 단면적에 비례해서 결정합니다.
주의;
분석 칼람으로부터 분취 칼람까지 확대(scale up)하는 방법은 35 페이지를 참고하십시오. 칼람의 유량과 관, 내경에 대해서 189 페이지 기술 정보 2를 참고하십시오.

Q21. 같은 HPLC에 역상과 순상의 두 가지 용매를 사용해야 할 경우 주위 해야 할 점은?

역상과 순상에서 용매를 교환해야 할 경우 에탄올과 같은 용매를 섞어서 치환 후 새로운 용매로 교환합니다.
주의;
역상용 물과 메탄올 순상용 핵산과는 혼합할 수 없습니다.